人参皂苷Rg1对重症急性胰腺炎模型大鼠肺损伤的治疗作用及其机制

目的探讨人参皂苷Rg1对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠肺损伤的治疗作用及其可能的分子机制。方法SD大鼠75只,分为假手术组、模型对照组、乌司他丁组和人参皂苷Rg1低、高剂量组(10、40 mg·kg-1),每组15只。采用ELISA法检测大鼠血清脂肪酶活性和BALF炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的水平;全自动生化分析仪检测血清淀粉酶活性;HE染色观察大鼠胰腺及左肺组织病理学改变;取右肺组织测肺组织W/D比;全自动血气分析检测仪检测动脉OI;qRT-PCR和Western blot法检测肺组织中炎症小体NLRP3、caspase-1、ASC的mRNA和蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型对照组血清脂肪酶和淀粉酶活性、胰腺组织和肺组织病理学评分,BALF中炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α的水平、肺组织W/D值、动脉血中OI值以及肺组织中炎症小体NLRP3、ASC和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型对照组比较,人参皂苷Rg1高剂量组和乌司他丁组的上述检测指标水平均明显下降(P<0.05),人参皂苷Rg1低剂量组差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参皂苷Rg1可能通过抑制炎症小体NLRP3的激活,降低肺组织炎症因子水平,有效地减轻急性胰腺炎大鼠肺损伤。

白术多糖通过调控TLR4/NF⁃κB信号通路对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障的影响

目的探讨白术多糖对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜免疫屏障的保护作用及其机制研究。方法采用逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠溶液法建立SAP模型,术后立即给予相应药物处理。于术后48 h,检测血清中淀粉酶、TNF⁃α(肿瘤坏死因子⁃α)、白介素IL⁃6和IL⁃1β水平;HE染色观察胰腺和小肠组织病理学变化;流式细胞术检测小肠黏膜中CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞亚群比例;放射免疫法检测小肠黏膜中sIgA(分泌性免疫球蛋白A)水平;Western blot检测小肠组织中TLR4/NF⁃κB通路相关蛋白表达。结果与假手术组比较,SAP模型组大鼠胰腺和小肠组织损伤严重,血清淀粉酶活性及TNF⁃α、IL⁃6和IL⁃1β水平增加,小肠黏膜CD4+T细胞亚群比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值和sIgA水平降低,而CD8+T细胞亚群比例上升,同时小肠组织中MyD88(髓样分化因子)和TLR4蛋白及NF⁃κB p65蛋白磷酸化水平增加(均P<0.05)。与SAP模型组比较,白术多糖高剂量组和乌司他丁组大鼠胰腺和小肠组织损伤有所改善,血清淀粉酶活性和TNF⁃α、IL⁃6、IL⁃1β水平降低,小肠黏膜中CD4^(+)T细胞亚群比例及CD4^(+)/CD8^(+)比值和sIgA水平增加,CD8^(+)T细胞亚群比例降低,而小肠组织中MyD88、TLR4蛋白及NF⁃κB p65磷酸化水平降低(均P<0.05)。结论白术多糖可改善重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF⁃κB信号通路活化有关。

柚皮素通过调控巨噬细胞NLRP3炎症小体活化对脓毒症致急性肺损伤的影响

目的探讨柚皮素(NAR)调控巨噬细胞NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化对脓毒症致急性肺损伤的影响。方法采用随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、柚皮素低剂量组(25 mg/kg)和柚皮素高剂量组(75 mg/kg),每组15只。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,并于术后6、12、18 h腹腔注射不同浓度柚皮素进行干预治疗。术后24 h,颈内动脉插管采血测定氧合指数(OI);收集大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)并分离巨噬细胞,采用RT-PCR法和Western blotting法分别检测巨噬细胞中(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱天冬酶-1(caspase-1)mRNA及蛋白表达水平;取肺组织,测定肺组织湿/干比(W/D),采用苏木精-伊红染色法观察肺组织病理学改变并评分,采用免疫荧光染色法检测肺组织中巨噬细胞水平,采用ELISA法测定肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中白介素1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)水平。结果 (1)与假手术组比较,模型组大鼠肺组织损伤严重,肺组织病理评分、W/D值及巨噬细胞水平升高(P<0.05),OI值降低(P<0.05),而肺组织和BALF中IL-1β、IL-18表达水平以及肺泡巨噬细胞中NLRP3 mRNA(1.027±0.064 vs 5.567±0.208)和蛋白(0.043±0.001 vs 1.242±0.065)、ASC mRNA(0.993±0.035 vs 5.000±0.200)和蛋白(0.018±0.001 vs 0.433±0.060)以及caspase-1 mRNA(0.973±0.038 vs 7.667±0.351)和蛋白(0.101±0.001 vs 0.959±0.078)表达水平均增加,差异有统计学意义(P<0.05);(2)与模型组比较,柚皮素高剂量组大鼠肺组织损伤程度得到改善,肺组织病理评分、W/D值及巨噬细胞水平显著降低(P<0.05),OI值上升(P<0.05),且肺组织和BALF中IL-1β、IL-18表达水平以及肺泡巨噬细胞中NLRP3 mRNA(5.567±0.208 vs 3.367±0.473)和蛋白(1.242±0.065 vs 0.172±0.023)、ASC mRNA(5.000±0.200 vs 3.433±0.404)和蛋白(0.433±0.060 vs 0.121±0.010)以及caspase-1 mRNA(7.667±0.351 vs 4.000±0.200)和蛋白(0.959±0.078 vs 1.020±0.088)表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。而柚皮素低剂量组与模型组比较,相关指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论柚皮素可减轻脓毒症大鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制肺泡巨噬细胞内NLRP3炎症小体的活化有关。