剪接因子SQD在家蚕中的表达定位与功能分析

BmSQD(Bombyx mori SQUID)是一种具有RRM结构域(RNA recognition motif,RRM)的核内不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoproteins,hnRNPs)。为探究SQD在家蚕中的表达定位和功能,在生物信息学分析和克隆表达与抗体制备的基础上,本文通过对变态发育和胚胎发育时期部分组织的BmSQD蛋白水平和mRNA水平表达量进行分析,辅以组织细胞定位的免疫组化分析,对SQD蛋白的基本特性和在家蚕Bombyx mori中的表达定位及功能进行了研究。生物信息学分析显示,昆虫中的SQD同源基因相似性高,尤其是SQD蛋白二级结构的α螺旋和β折叠按照β1-α1-β2-β3-α2-β4的空间顺序组合形成的两个RRM结构域在昆虫中高度保守;BmSQD是一种亲水性且具有特定空间结构的hnRNPs蛋白,存在潜在的磷酸化位点;BmSQD在家蚕中的大部分组织中都有表达,尤其在卵巢与精巢等重要组织,且主要在家蚕发育的重要时期如胚胎发育与变态发育时期高表达,主要定位在细胞核内,对基因转录后调节起到剪接调控作用。本文为研究SQD蛋白在昆虫变态发育和胚胎发育中的剪接调控机制提供数据参考的意义。

试论构建“环东湖体育圈”的基础条件、发展战略及对策

"环东湖体育圈"这一概念集中体现了现代旅游和体育观念。认为应充分整合体育、旅游的产业优势,联结上下游相关产业链,促进区域经济发展。并对"环东湖体育圈"构建所需的基础条件,发展的战略构想及对策提出了有关见解。

对高校新生身体素质状况的调查与分析

通过对新生的综合调查,了解到当前中学体育课上课的情况和学生的身体素质状况,提出几个突出性的问题,探讨解决问题的方法,供有关部门参考。

篮球投篮CAI课件的设计探讨

介绍了一种适合各种层次人群学习的篮球投篮CAI课件的设计过程和该课件的整体框架及特点。

构建“环荆州体育圈”的基本条件、战略发展和可行性研究

在全面建设小康社会的新的历史时期,体育事业需要新的发展思路,“环荆州体育圈”的概念的出现就是迎合这一时代主题,即集中体现现代旅游和体育观念,充分整合体育、旅游的产业优势,联结相关上下游产业链,促进区域经济发展的新兴的体育旅游新概念。

终身体育与高校体育教学改革

探讨了“终身体育”思想对高校体育的重要作用 ,分析比较了中小学、大学、工作三个阶段对“终身体育”思想的影响 ,提出高校体育深化改革应围绕“终身体育”这一主题 .

我国中小体育用品企业的营销战略

中国中小体育用品企业是我国体育产业发展的主力军,在激烈的市场竞争中,应制定切实可行的市场营销策略,可以采用的策略主要有:“缝隙营销”策略、“聚焦营销”策略、“卫星营销”策略、“寄生营销”策略、“共生营销”策略、“虚拟营销”策略。

新北京 新奥运与我国经济发展和社会精神文明建设

奥运会是具有丰富思想内涵的现代化国际性体育盛会 ,本文拟从经济学和社会学的角度来分析研究奥运会对社会精神文明建设和经济发展的重要意义 ,使我们对奥运文化有一个新的认识 。

家蚕翅原基表皮蛋白基因BmWCPs的生物信息学分析与激素诱导表达特征

翅原基表皮蛋白（WCPs）在昆虫翅的发育中起着非常重要的作用。为了研究家蚕翅原基表皮蛋白基因BmW CPs的表达是否与蜕皮激素（20E）的调节有关,用生物信息学方法分析BmW CPs基因的序列结构与系统进化特点,并通过半定量RT-PCR检测蜕皮激素对部分BmW CPs基因表达的诱导作用。11个BmW CPs基因成簇分布在家蚕基因组中,除BmW CP6和BmW CP10分别分布在第7号、第21号染色体外,其余的BmW CPs均分布在第22号染色体上;11个BmW CPs的核苷酸序列长度为588～2 670 bp,编码115～312个氨基酸,蛋白质分子质量12～35 kD,等电点4.30～7.45;11个BmW CPs基因的ORF内均有内含子插入,81.82%的基因含有2～3个内含子,内含子长度50～5 958 bp,在50～300 bp之间分布频率最高,占46%。将解剖获取的上蔟1 d蚕体的翅原基进行体外培养,并用浓度为2μmol/L的20E直接处理12 h后再常规培养18 h,提取翅原基总RNA并反转录合成cD NA,经半定量RT-PCR检测样品中BmW CPs的表达水平显著上调。依据上述研究结果初步认为,用蜕皮激素直接处理12 h后再常规培养18 h的脉冲作用,可诱导基因组中成簇分布的BmW CPs在翅原基组织中大量表达,以利于家蚕完成翅原基的变态发育。

2010年广州亚运会与珠江三角洲都市圈经济发展及其对策

分析了2010年广州亚运会对于珠江三角洲都市圈经济发展的若干作用,对广州如何把握2010年亚运会的历史机遇,发挥其核心作用,在迈向国际大都市的进程中,加快珠江三角地区经济发展,促进珠江三角洲都市圈成为具有国际都市圈形态的经济群落,提出了主要对策。

新型复合式小孔消音器在高压燃气管道放散降噪的应用研究

本文分析了压力高达4.0MPa的高压燃气管道噪声产生的原因,并对采用了新型复合式小孔消音器现场工程的相关管段进行了放散实验,同时对其噪声值进行了测试。结果表明：安装使用该新型消音器后取得了明显的降噪效果,原燃气管道排气未安装该消音器时,噪声值最高达126dB（A）,安装后在同样的排气量下,噪声值降至60~65dB（A）,满足了环保降噪要求,从而可知该种新型复合式小孔消音器用于高压燃气管道放散降噪是可行的。

谈提高高一新生信息技术操作基础课的策略

作为中等职业类高一新生的教师,在信息技术操作基础这门课程的教学过程中,笔者结合这几年在信息技术专业多个学科教学上的理解,浅谈一些针对职业类高一新生信息技术操作基础教学中的四点体会。

某机车车库燃气辐射采暖的节能研究

本文对应用两种不同安装形式的燃气辐射采暖系统的机车车库进行了温度场的测试，使用能耗软件Energy-Plus 分析对比了车库内不同数量机车的耗能情况，结果表明：两种方案下的燃气辐射采暖系统的节能效果不同，车库内停留的机车数量不同时节能效果也不同。其中机车停满车库时车库的节能效率最差，仅为4.7%；5~6列机车停留在车库时车库的节能效果最明显，可达33.4%。该研究为该项技术应用于其他机车车库提供了更加节能的设计方案。

运用行为引导型教学法优化中职计算机教学研究

在行为引导型教学模式下,教学活动不再是传统的“教师讲、学生听”,而是以学生为中心的新型教学模式,与新课标“以人为本”的教育理念是相符的。文章结合教学案例,重点探讨在中职计算机专业课堂教学中,开展引导型教学法的有效策略,以期能引导学生自主收集信息,积累实践经验,培养学生的团队精神,增强就业竞争力。

增强中职计算机课堂教学的吸引力

在中等职业学校,计算机是一门很重要的学科。它的实践性非常强,课堂教学有别于其他学科。开始时,学生对计算机充满着神秘感,有着浓厚的兴趣,但随着计算机教学内容的深入、难度增大,且学习的内容与社会上的计算机应用又有一定距离,学生的兴趣就会降低。对此教师要多动脑筋,在现有的教学条件下,充分利用资源,不断进行教学研究,营造良好的学习氛围,让学生"要我学"的主观意识彻底转变为"我要学",提高教学效果,采用多种灵活教学方法,激发学生学习兴趣,增强课堂吸引力。

家蚕保幼激素信号途径中转录因子BmKr-h1的基因克隆与表达分析

Krüppel homolog 1(Kr-h1)是含有C2H2锌指结构的转录因子,在昆虫变态发育中起重要作用。从家蚕5龄第3天幼虫的表皮中克隆了Bm Kr-h1基因,该基因全长c DNA为1 918 bp,其中开放阅读框1 047 bp,GC含量42.2%,编码348个氨基酸。氨基酸序列比对分析发现大部分昆虫物种的Kr-h1都含有8个锌指结构,暗示该蛋白质的功能具有一定的保守性。通过生物信息学方法预测Bm Kr-h1不含信号肽和糖基化位点,但含有19个可能的磷酸化位点,暗示其活性可能受到磷酸化和去磷酸化修饰的影响。利用原核表达系统表达获得了可溶的Bm Kr-h1蛋白并制备了抗体。Western blot和半定量RT-PCR检测的结果显示,不论在mRNA水平还是蛋白质水平,Bm Kr-h1在家蚕幼虫5龄初期和吐丝期的翅原基都有较高水平表达,而在蛹期的表达量较低。用保幼激素(JH)类似物Methoprene和蜕皮激素(20E)分别注射家蚕5龄第3天幼虫,发现2种激素均能诱导蚕体内Bm Kr-h1的表达上调。免疫组织化学结果显示,Bm Kr-h1在5龄第3天幼虫各组织中的表达量很低,而在吐丝期的中肠、脂肪体和表皮中都有一定水平的表达,暗示其可能参与家蚕蜕皮变态的过程。上述结果表明Bm Kr-h1可以响应JH和20E的诱导,提示其在家蚕的变态发育中发挥作用。

家蚕 BmChd64 基因的克隆与表达定位分析

Chd64是含有钙结合蛋白同源(Calponin homology,CH)结构域的蛋白,在果蝇蜕皮激素与保幼激素信号通路中发挥重要作用。本研究以家蚕Bombyx mori为研究对象,利用PCR克隆了与果蝇Drosophila melanogaster DmChd64同源的BmChd64基因,与表达载体pET-28a连接后,成功获得体外原核表达的BmChd64蛋白,并对其进行了亚细胞定位分析。家蚕BmChd64基因开放阅读框(ORF)的序列为567 bp,编码188个氨基酸,预测分子量大小为20.9 kDa,理论等电点为8.41,编码的蛋白在第27~130个氨基酸处存在CH结构域。同源性比对与进化分析显示,BmChd64与赤拟谷盗Tribolium castaneum和果蝇的Chd亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示,BmChd64在家蚕5龄游走期的不同组织中均有表达,且在翅原基中的表达趋势与家蚕体内蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,20E)滴度变化规律一致。亚细胞定位结果显示,BmChd64在细胞核与细胞质中均有分布,细胞核内荧光信号较强,且在细胞核外围较弱,推测细胞质中BmChd64也可入核,最终定位在细胞核中。研究结果表明BmChd64可能主要通过20E信号通路调控翅原基等的变态发育,这为进一步完善20E调控昆虫变态发育的分子机制提供了实验基础。

长株潭高校学生消费行为对两型社会发展的影响及对策——基于互联网金融背景

2007年12月,长株潭城市群被确定为"两型社会"实验区,自被确立以来,长株潭地区的发展一直牵动着人民群众的心。随着互联网科技发展,互联网金融越来越成为社会经济发展的核心,大数据与金融发展形成了创新长株潭地区的经济发展模式中两大必不可缺的因素。长株潭高校学生的消费行为在一定程度上对两型社会的发展产生着不可忽视的作用。本文通过调查研究,阐述了在互联网金融背景下长株潭高校学生的消费行为对两型社会建设的具体影响,并根据实际情况提出了切实可行的引导和解决对策。

家蚕BmMet2基因的组织定位与激素诱导表达分析

Met作为保幼激素(JH)的受体,能编码bHLH-PAS结构域结合DNA并调控下游基因的表达。为了探究BmMet2是否作为JH的受体参与调控家蚕的生长发育,以家蚕为材料,用生物信息学方法分析了BmMet2蛋白结构,利用实时定量PCR检测其在翅原基不同时期和激素诱导下的表达情况;原核表达了BmMet2中能与DNA结合的蛋白区域BmMet2DBD,并制备了抗体;利用蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组化检测了BmMet2在家蚕多个时期和各组织中的定位表达情况。结果显示:在翅原基中,BmMet2在5龄第3天和5龄第6天有较高水平的表达,蛹期的表达量较低,这与家蚕体内JH的滴度一致;BmMet2在5龄第6天、吐丝期和预蛹期的胸节表皮、脂肪体及翅原基等组织中都有较高的表达;JH和20E均对BmMet2有不同程度的诱导,说明其可能同时参与了JH和20E的调控,进而参与调控家蚕变态发育过程。

谈谈蔬菜高效栽培模式在都匀市的推广应用

蔬菜作为一种高产高效的经济作物,对土壤、水分及养分的需求高,但是有限的土地,在生产和供应当中对蔬菜产业发展的方式提出了更高的要求。都匀市坚持以市场化为导向,聚焦优势单品、优势时段,推广蔬菜高效种植模式,既体现出都匀市蔬菜产业的高水平,又推动了全市蔬菜产业规模化、标准化,产业发展得到了历史性的突破。