白色念珠菌氟康唑耐药相关基因的差异显示研究

采用差异显示PCR技术 (DifferentialDisplay PCR ,DD PCR)寻找白色念珠菌的氟康唑耐药相关基因。体外用含氟康唑的酵母培养基 (YEPD)诱导培养临床白色念珠菌氟康唑敏感株 4 35 (对咪康唑耐药 ) ,诱导 80d后得到氟康唑耐药子代 4 35 2 (MIC =1 2 8μg mL)。DD PCR比较 4 35 2、4 35分别在含氟康唑、不含药的YEPD液基中的基因表达 ,找到 3个明显差异片段 ,分别与数据库中白色念珠菌的醇脱氢酶基因ADH1、多药耐药基因CDR1及拓扑异构酶基因TOP2有高度同源性。半定量RT PCR中证实了ADH1、CDR1在氟康唑耐药株中的差异表达 ;对已知氟康唑耐药基因MDR1作半定量RT PCR时发现MDR1在氟康唑耐药株 4 35 2中无表达 ,而在氟康唑敏感株 4 35中有表达。结果表明 ,ADH1、CDR1基因的高表达与白色念珠菌氟康唑耐药性形成相关 ,ADH1可能是新的耐药基因 ;

致病念珠菌的临床药敏分析与基因分型探讨

目的调查阴道念珠菌感染致病菌种及对常用抗真菌药物的耐药谱;探讨念珠菌基因型检测方法的临床及流行病学价值,为临床念珠菌病的防治提供临床与实验依据。方法采用酵母菌鉴定板及ATB真菌药敏试剂条对临床589例再发性念珠菌阴道炎患者的分离株作菌种鉴定及药敏分析;ERIC-PCR指纹方法比较147株白色念珠菌咪康唑敏感株及60株咪康唑耐药株的基因型。结果白色念珠菌仍是优势致病菌株,占82.7%,非白色念珠菌中光滑念珠菌感染率高达12.7%;非白色念珠菌对酮康唑、咪康唑与益康唑的耐药率高(P<0.01),白色念珠菌则对5-氟胞嘧啶较多耐药(P<0.01);念珠菌对常用唑类药物益康唑、酮康唑、咪康唑存在较高的交叉耐药率;念珠菌对制霉菌素耐药率极低;白色念珠菌咪康唑敏感株及耐药株ERIC-PCR指纹一致。结论菌株的基因型可作为流行病学调查的稳定标记,但念珠菌阴道炎治疗的临床用药应以菌种鉴定及药敏分析为基础;唑类药物使用要慎防各唑类药物之间的交叉耐药;制霉菌素在无耐药检测条件下可作为部分顽固病例的经验用药。

白色念珠菌对氟康唑耐药机制研究进展

白色念珠菌是人体重要的机会性致病原 ,在免疫缺陷背景下大量使用氟康唑易导致白色念珠菌耐药株出现。多种分子机制参与白色念珠菌对氟康唑耐药的形成 :药物作用靶酶的生物合成途径变化、靶酶编码基因的突变和 /或过度表达、膜外排泵基因的表达增加及其他耐药基因的差异表达等。另外 。

差异显示PCR技术在念珠菌基因表达研究中的应用

目的探讨差异显示PCR技术(DD-PCR)在念珠菌基因表达研究中的方法学要点。方法将临床阴道来源的白色念珠菌氟康唑敏感菌株435体外诱导氟康唑耐药性,于诱导80d得到耐药子代435-2,采用长引物差异扩增、银染显示差异条带、反式点杂交预筛选及非放射性法标记探针的改良的DD-PCR,比较435与435-2在有药及无药培养基中的表达差异。结果在435-2含药培养组中得到较435-2、435无药培养组表达明显增强的片段N2、N3、N12,分别与数据库中白色念珠菌的醇脱氢酶基因ADH1、拓扑异构酶基因TOP2及多药耐药基因CDR1基因有高度同源性;半定量RT-PCR中证实了ADH1、CDR1基因在耐药株中的高表达。结论ADH1、CDR1基因的高表达与白色念珠菌氟康唑耐药性形成相关,ADH1可能是新的耐药基因;改良的DD-PCR技术降低了假阳性率的产生,使确证步骤更加便捷,在念珠菌研究领域有很好的应用前景。

白色念珠菌体外诱导氟康唑耐药性的实验研究(简报)

随着广谱抗生素的普遍应用以及免疫缺陷人群的增加,机会性致病菌念珠菌感染日益增多.深部念珠菌感染已经成为重症患者死亡的重要原因,白色念珠菌(C.albicans)是其中的主要致病菌.

浙江省汉族人群18-STR基因座的分型资料及其应用

【目的】建立浙江地区汉族人群18个STR基因座(D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO、D3S1358、TH01、D13S317、D16S539、D2S1338、D19S433、VWA、TPOX、D18S51、D5S818、FGA、PentaE、PentaD、SE33)的遗传多态性数据资料,并探讨18-STR鉴定分析系统在亲子鉴定、产前诊断等领域的应用。【方法】对浙江汉族598例无血缘关系个体,采用2组荧光标记STR-PCR复合扩增系统及毛细管电泳基因分型技术,获取18个STR基因座数据资料;在497个亲子鉴定案例中,比较18-STR与15-STR鉴定系统在亲子鉴定和产前诊断中的应用。【结果】18个STR基因座基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。18个STR基因座的杂合度在0.630～0.942之间,累积个体识别力大于0.9999999999,基因型分布与中国其它地区汉族人群存在差异。与15-STR鉴定系统相比,18-STR鉴定系统更有利于二联体亲缘关系的认定及可疑突变的判断。在胎儿亲子鉴定中偶然发现的1例21三体胎儿在D21S11、PentaD两个STR基因座出现了特征性峰型。【结论】18个STR基因座在浙江汉族人群中呈高度多态性,对法医学亲子关系的认定或排除具有较大价值,部分STR基因座的检测也有助于非整倍染色体的产前诊断。

658例产后出血病例分析

目的：探讨不同产后出血量患者的妊娠结局、干预措施及输血情况。方法：回顾性分析我院2010年1月至2014年12月期间产后出血的658例患者的临床资料,并根据出血量〈1500 ml、1500~2500 ml、≥2500 ml进行分组分析。比较不同产后出血量患者的妊娠结局、干预措施及输血情况。结果：〈1500 ml组、1500~2500 ml组、≥2500 ml组3组产妇弥散性血管内凝血（DIC）、失血性休克、肺损伤的发生率比较差异有统计学意义（P〈0.01）。73例因保守措施难以控制而采取了子宫切除术的患者,其出血量中位数达4000 ml。出血量≥2500 ml采取子宫切除的比例显著高于出血量小的组（χ^2=123.1,P〈0.05）。子宫切除组瘢痕子宫、凶险性前置胎盘及羊水栓塞的比例显著高于保守治疗止血组（P〈0.01）。接受输血治疗者中按治疗单位计算输注红细胞悬液∶新鲜冰冻血浆平均数为1∶1.15。结论：对产后出血量进行临床分级,将有助于指导治疗方案、把握治疗时机。针对产科出血特点,需进一步规范产后出血的输血管理。

我国城市地下空间法制化建设的进程与展望

系统回顾总结了我国自1980年代以来城市地下空间开发利用的法制化建设进程,分析归纳了近年来城市地下空间法制化建设的成就与问题,分析借鉴了国外发达国家和我国台湾地区城市地下空间法制化建设的成功经验,分析预测了我国城市地下空间开发利用的发展态势,研究提出了我国城市地下空间资源开发利用的法制化建设基本体系、发展策略以及近期急需建立的法律法规。

多神经网络在软测量仪表中的应用

针对化工过程对象的复杂性和不确定性 ,介绍了采用以RBF神经网络作为子网络的多神经网络在软测量仪表中的应用。

回收式自体输血在剖宫产手术中的应用进展

全世界每天约有800名妇女死于妊娠或分娩相关的并发症，其中产后出血一直是产妇死亡原因的第二位（占18％）。由于多次剖宫产和侵入性的胎盘疾病等原因，产科用血呈逐年上升趋势。

戊型肝炎病毒一步法多重荧光定量PCR分型鉴定技术的建立及应用

为建立鉴别检测戊型肝炎病毒(HEV)各基因型的方法,本研究基于HEV1、HEV3和HEV4的基因组序列,设计一对保守扩增引物和3条型特异性探针,通过体系优化,建立了用于鉴别检测不同型HEV感染的多重荧光定量PCR方法,并以绿色荧光蛋白(EGFP)为内部质控,确保整个诊断流程的准确和有效。特异性试验结果显示该方法仅对HEV扩增为阳性,而对甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、疱疹病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒等核酸扩增均为阴性,特异性好。敏感性试验结果显示,该方法对HEV 1、HEV3和HEV 4的最低检测限均为50个基因组拷贝/反应,敏感性高。分析表明一步法多重荧光定量PCR对不同浓度的HEV 1、HEV3和HEV4重复性试验的变异系数均小于4%,表明该方法具有良好的检测重复性和稳定性。对采集自浙江、安徽、江西、上海和福建省等地区的猪粪便、猪血清和人血清等临床样品进行检测,其结果与传统套式PCR及测序的鉴定结果一致,表明该多重荧光定量PCR对于临床样品的检测具有高准确性,可用于临床HEV隐性感染或早期感染的快速检测。本研究为该病的有效治疗奠定基础。

妊娠期妇女血清甘胆酸与血脂水平相关性研究

目的:探讨妊娠期妇女肝内胆汁淤积症(ICP)的发病率及甘胆酸(CG)与血脂、碱性磷酸酶(ALP)水平的相关性。方法:采用放射免疫分析检测甘胆酸,用酶法测定血脂,速率法测定ALP。结果:2040例妊娠期妇女中有18.5%CG值升高,其中有2.8%可确诊为ICP。ICP患者与正常妊娠组相比,TG、CHOL、LDL、ALP均明显升高,而HDL则略降低。结论:ICP为妊娠期常见并发症,应将CG作为常规产前检查项目。ICP患者结合分析其血脂、ALP水平,有助于病情判断。

5488对异常孕产史夫妇的细胞遗传学研究

目的探讨染色体异常与异常孕产史的关系。方法采用外周血淋巴细胞培养和染色体G显带分析,对5488对异常孕产史的夫妇进行核型分析。结果检出异常核型443例,异常率4.04%。其中数目异常25例,平衡易位182例,臂间倒位67例,多态性变异166例,缺失3例。结论异常孕产史不但与染色体畸变有关,与染色体多态性也有关联。对异常孕产史的夫妇进行染色体检查是十分必要的,有助于病因的诊断和分析,为其生育及治疗提供指导。

浙江省出生缺陷防治人才培训现状与质量评估

目的了解浙江省出生缺陷防治人才培训现状并评估教学质量。方法纳入浙江省2018—2019年度参加出生缺陷防治人才培训项目的学员为调查对象,实际参训时间分别是2019年2—5月和2019年9—11月。收集整理学员报名信息,开展教学质量评估问卷调查,分析学员人群特征、教学实施和教学质量。结果研究期间共计培训400名学员,以中青年、女性、中级及以下职称,来自区县级医疗卫生保健机构,从事妇产科、儿科(含儿童保健)和超声专业为主。2019年度学员较2018年度男性和中级及以下比例增加,不同级别医院分布更加均衡,妇产科类占比上升,差异有统计学意义(P<0.05)。培训整体满意率从2018年度88.2%上升至2019年度93.4%。学员最为认可课程“贴切培训目标与内容”、教学“有利于理论联系实际”“有利于专业技能提升”“时间安排”“引导学习方向”“提升主动性”方面需改进。结论浙江省出生缺陷防治人才培训学员覆盖面广,但略有不平衡,培训质量整体较好,但在时间安排、加强学员学习方向的引导和提升主动性方面仍有待提升。

留守儿童情绪调节能力对学业成绩的影响

本研究采用问卷的方式,调查了留守儿童的情绪调节能力以及学业成绩。326名被试参与了本研究,其中60名为父母均不在家的双留守儿童,70名是一方父母在家的单留守儿童,196名为父母均在家的普通儿童。通过方差分析,结果发现留守状况对学业成绩有显著的影响,双留守儿童的学业成绩显著低于单留守儿童和普通儿童,而留守状况间的情绪调节能力不显著。结果表明父母教育的缺失对儿童的心理的发展具有显著的影响。

血清高糖基化hCG检测在21-三体综合征产前筛查中的意义探讨

目的初步探讨孕母血清高糖基化hCG(HhCG)用于孕中期产前筛查21-三体的临床意义。方法采用Nichols全自动化学免疫发光分析仪测定115例孕15～20周的孕妇(包括17例21-三体妊娠和98例正常妊娠)的血清高糖基化hCG水平。结果 17例21-三体妊娠的孕妇HhCGMoM值中位数为10.11,约是正常妊娠中位数值(3.55)的3倍。将115例孕妇按AFP、F-β-hCG筛查结果分成21-三体妊娠者和高风险、低风险正常妊娠3组,3组数据呈对数正态分布,组间比较,21-三体妊娠孕妇HhCGMoM值高于高风险、低风险正常妊娠(P<0.02、P<0.001)。除此,17例21-三体妊娠者HhCGMoM值均大于2.9(文献提示的21三体高风险判断阈值);2例AFP、F-β-hCG产前筛查为假阴性患者其HhCGMoM值分别为7.5、10.11,均大于2.9。结论 21-三体妊娠者孕中期血清HhCG较正常妊娠升高,血清HhCG指标有产前筛查的应用价值。

RDW-CV、PDW及NLR与复发性流产的相关性

目的观察复发性流产(RSA)患者红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、血小板分布宽度(PDW)及中性粒细胞淋巴细胞比率(NLR)的变化及临床意义。方法选取780例RSA患者及1 412例健康者外周血,分别检测红细胞计数(RBC)、红细胞比容(HCT)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、RDW-CV、血小板计数(PLT)、血小板比容(PCT)、PDW、中性粒细胞(Neu)及淋巴细胞(Lym),并计算Neu与Lum比值(NLR),分析RDW-CV、PDW及NLR在RSA患者中的变化及临床意义。结果 RSA组及健康人对照组RBC、HCT、Hb、MCV、MCH及MCHC差异无统计学意义(P>0.05)。与健康人对照组比较,RSA组RDW-CV、PDW、Neu及NLR升高(P均<0.01),PCT、PLT及Lym降低(P均<0.01)。RDW-CV≥12.5%发生RSA风险是<12.5%发生RSA风险的3.06倍(χ2=130,P<0.01,OR=3.06,95%CI:2.52~3.72)。PDW≥15.75%发生RSA风险是<15.75%发生RSA风险的12.29倍(χ2=647,P<0.01,OR=12.29,95%CI:9.98~15.14)。NLR≥1.788发生RSA风险是<1.788发生RSA风险的3.96倍(χ2=216,P<0.01,OR=3.96,95%CI:3.28~4.78)。结论 RSA组RDW-CV、PDW及NLR升高,RDW-CV、PDW及NLR升高可能预示RSA发病的风险增加。

营养不良型大疱性表皮松解症1家系COL7A1基因诊断和产前诊断

目的分析常染色体显性遗传的营养不良型大疱性表皮松解症(DDEB)1家系的致病基因COL7A1基因突变位点,并在此基础上探讨产前诊断的可行性。方法采用聚合酶链扩增反应及双向直接测序的方法对DDEB家系中2例不同表型的患者进行COL7A1基因突变检测,以家系中的2例健康者及50例无亲缘关系的健康个体作对照。确定致病突变后,对家系中的2例高危胎儿分别进行了产前遗传学分析和胎儿绒毛组织DNA产前诊断。结果该家系2名不同表型患者COL7A1基因的87号外显子第6859位碱基鸟嘌呤G被腺嘌呤A替代(c.6859G>A,p.Gly2287Arg),家系中健康对照及无亲缘关系的健康个体均未发现该突变。先证者姐姐怀孕4周,被证明未携带致病突变,继续妊娠并诞生一个健康男婴。先证者配偶怀孕11周,产前诊断胎儿携带与患者相同的突变。先证者夫妇选择治疗性引产术后,取胎儿皮肤标本行基因诊断,结果与产前诊断相同。结论甘氨酸替代突变c.6859G>A,(p.Gly2287Arg)是该DDEB家系的致病原因,同一家系患者呈现不同表型。COL7A1基因分析可以快速且准确地进行DDEB的基因诊断和产前诊断,有利于指导生育健康后代。

中国东北冷涡背景下连续发生的中尺度对流系统的组织演变特征个例分析

使用雷达、地面加密观测、探空数据和ERA5再分析数据研究2009年7月22日0400—2400 UTC的21小时内东北冷涡后部在京津地区连续发生的4次中尺度对流系统的组织形态演变和中尺度环境特征。研究结果表明,在东北冷涡后部稳定的西北气流背景下,由于东北冷涡后部对流层中层西北气流中的浅槽、其在对流层低层发展的低槽和低涡以及对流层低层高压脊西北部的西南暖湿气流与冷池之间复杂的相互作用,导致4次过程中强对流的组织形态各异。第一次过程受冷涡西侧一个浅槽锋生影响,在河北北部形成西南‒东北走向弱对流线,对流线位于北京北部的对流发展较强,移动迅速,发展为超级单体和弓形回波,其冷池出流和西南暖湿气流辐合形成西北‒东南走向的后部增生型组织形态,横贯京津地区。第二次过程是第一次过程位于北京南部的冷池出流触发,形成超级单体,之后受第一次过程冷池向西出流的影响,产生西南‒东北走向的后部增生型对流线。第三次过程发生在第一个浅槽造成对流层低层低涡发展的环境下,低涡西侧的偏北风与低层高压脊北部的偏南风在冷池上面辐合,造成多条平行的西北‒东南走向的后部增生型对流线,产生列车效应,造成天津的强降水。第四次过程由冷涡西南部的又一个浅槽锋生和冷涡在天津北部调整出的切变线共同触发,两个初始的西南‒东北走向对流线合并形成一条西南‒东北走向的线状对流,最后南侧的对流发展为弓形回波。4次过程中出现的弓型回波部分还具有弓箭回波结构特征。

“8·31”云阳特大暴雨地形动力作用数值研究

利用NCEP再分析资料和WRF模式对2014年8月31日云阳特大暴雨过程进行环流形势分析和数值模拟,并针对大巴山和齐岳山进行地形敏感性试验。结果表明:西南涡、辐合切变线、低空急流是本次暴雨的直接影响系统。大巴山对暴雨的影响主要是阻挡作用和迎风坡作用。大巴山高度降低后,低涡明显向北扩展,降水中心向东北方向偏移,低层辐合减弱导致垂直次级环流上升支强度和对流高度降低使暴雨减幅。齐岳山对暴雨的影响主要是地形狭管效应。齐岳山高度降低后,狭管效应减弱,低空急流强度减弱、位置南压;低层辐合区位置偏南导致垂直次级环流上升支的位置偏南。