EGCG对肿瘤生物抑制机制影响的探讨

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过抑制血管内皮生长因子(VEGF)的血管生成效应减少肿瘤生长和血管生成。方法:MTT法检测内皮细胞生长、Transwell检测内皮细胞迁移,同时检测内皮细胞体外小管形成情况及Matrigel胶塞体内实验检测体内血管生成情况;建立异位胃癌裸鼠模型,检测肿瘤生长及肿瘤组织微血管密度,明确EGCG对肿瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制。结果:体外实验显示,随着EGCG处理时间和剂量的增加,VEGF诱导生长的内皮细胞数呈时间和剂量依赖性地减少;随着EGCG剂量的增加,VEGF诱导迁移的内皮细胞数和形成的小管样结构也剂量依赖性地减少,差异有统计学意义,P<0.05;Matrigel胶塞体内实验也显示EGCG抑制VEGF诱导的胶塞血管化;动物实验显示治疗组肿瘤生长缓慢,生长曲线明显低于对照组,平均肿瘤抑制率为60.4%,P<0.01;治疗组肿瘤组织微血管密度显著降低,P<0.01。结论:EGCG可以抑制VEGF诱导的血管生成,从而抑制肿瘤生长和血管生成。

PTEN和E-钙粘蛋白表达与胃癌浸润转移和预后的关系

目的探讨胃癌组织中PTEN和E-钙粘蛋白的表达、相互关系及意义。方法应用免疫组化SP技术检测80例胃癌组织中PTEN和E-钙粘蛋白的表达。结果胃癌组织中PTEN高表达率和E-钙粘蛋白正常表达率分别为43.8%(35/80)和41.3%(33/80),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关;PTEN与E-钙粘蛋白表达显著正相关,与病人预后相关,Kaplan-Meier生存曲线分析显示PTEN高表达和E-钙粘蛋白正常表达者术后累计生存率显著高于PTEN低表达和E-钙粘蛋白异常表达者,PTEN高表达和E-钙粘蛋白正常表达者术后3年、5年生存率高,Log-rank检验差异有显著性。结论胃癌组织中PTEN表达减少,E-钙粘蛋白表达异常,PTEN可能通过调控胃癌组织钙粘蛋白表达,抑制胃癌的浸润和转移,影响病人的预后。

PTEN与基质金属蛋白酶在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨PTEN与基质金属蛋白酶(MMP)在胃癌组织中的表达、相互关系及意义。方法:应用免疫组化SP技术检测80例胃癌组织中PTEN、MMP2和MMP9表达,同时检测20例正常对照组胃粘膜中PTEN表达。结果:胃癌组织中PTEN高表达率35／80(43.8％)显著低于对照组20／20(100. 0％)(P<0.01);PTEN表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关;胃癌组织中 MMP2、MMP9阳性表达率分别为41／80(51.3％)、29／80(36．3％),与胃癌浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关;PTEN与MMP2、MMP9表达显著负相关,与病人预后相关,Kaplan-Meier生存曲线分析显示PTEN高表达者术后累计生存率显著高于低表达者,PTEN高表达者术后3年、5年生存率显著高于低表达者;MMP2、MMP9阳性表达者术后累计生存率显著低于阴性表达者,MMP2、MMP9阳性表达者术后3年、5年生存率显著低于阴性表达者。结论:胃癌组织中PTEN表达显著减少,PTEN 与MMP2、MMP9表达显著负相关,PTEN可能通过调控胃癌组织MMP2、MMP9表达,抑制胃癌的浸润和转移,影响病人的预后。

胃癌组织中PTEN、VEGF和MMP2表达及其临床意义

目的:探讨PTEN、VEGF和MMP2在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP技术检测80例胃癌组织中PTEN、VEGF和MMP2表达。结果:胃癌组织中PTEN高表达率43.8,与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关。VEGF、MMP2阳性表达率分别为60.0和51.3,与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关。胃癌组织中PTEN与VEGF和MMP2表达显著负相关,与病人预后相关,Kaplan-Meier生存曲线显示PTEN高表达者术后累计生存率显著高于低表达者;VEGF和MMP2阳性表达者术后累计生存率显著低于阴性表达者。结论:PTEN通过调控胃癌组织VEGF和MMP2表达,抑制胃癌的浸润和转移,改善病人预后。

EGCG对胃癌血管新生中VEGF信号通路的多靶点作用

目的:探讨EGCG对胃癌血管生成抑制作用及其信号通路。方法:建立裸鼠异位胃癌模型,经腹腔注射EGCG,检测肿瘤生长及肿瘤组织微血管密度;不同浓度EGCG处理胃癌细胞24 h,检测胃癌VEGF蛋白和mRNA表达及VEGF分泌;同时不同浓度EGCG处理脐静脉内皮细胞,检测内皮细胞生长、迁移和体外小管形成。结果:EGCG显著抑制胃癌生长和肿瘤血管生成,平均肿瘤抑制率60.4%;EGCG显著抑制胃癌VEGF蛋白、mRNA表达和VEGF分泌;EGCG时间和剂量依赖性地抑制VEGF诱导的内皮细胞增殖,同时也剂量依赖性地抑制VEGF诱导的内皮细胞的迁移和小管生成。结论:EGCG多靶点作用于VEGF信号通路,抑制胃癌生长和血管生成。

中低位直肠癌术后局部复发危险因素的临床病理研究

目的:探讨中低位直肠癌根治性切除术后局部复发的危险因素。方法:分析2001年1月至2005年12月我院收治的行直肠系膜全切除(TME)的中低位直肠癌49例临床资料,分析局部复发与临床病理因素的关系。结果:中低位直肠癌根治性切除术后局部复发率为12.2%(6/49)。局部复发与肿瘤直径(P=0.011)、浸润深度(P=0.040)、分化程度(P=0.018)、淋巴结转移(P=0.041)、脉管侵袭(P=0.010)、环周切缘情况(P=0.017)和Dukes分期(P=0.021)显著相关,但与病人性别、年龄、系膜转移和手术方式不相关(P>0.05)。结论:肿瘤直径、浸润深度、分化程度、淋巴结转移、脉管侵袭、环周切缘情况和Dukes分期是直肠癌根治性切除术后局部复发的重要因素。

PTEN基因与肿瘤浸润转移

PTEN是最近克隆的肿瘤抑制基因,能多途径调控肿瘤浸润转移过程,抑制肿瘤浸润和转移。PTEN能稳定和增强肿瘤细胞间粘附,抑制肿瘤细胞迁移扩散和非锚定依赖性生长,以及诱导失巢凋亡,并可抑制细胞外基质降解和肿瘤血管生成等,从而抑制肿瘤浸润和转移。

舒芬太尼用于腹部手术后病人硬膜外自控镇痛的临床观察

目的探讨舒芬太尼硬膜外自控镇痛(PCEA)的临床效果及对腹部术后胃肠功能的影响。方法90例腹部手术病人随机分为三组,每组30例,分别接受舒芬太尼PCEA、芬太尼PCEA或疼痛时肌注哌替啶,观察三组术后镇痛效果、不良反应、肠蠕动恢复以及肛门排气、排便时间,同时检测血浆胃动素(MOT)水平。结果两个PCEA组各时段疼痛评分均低于对照组,镇痛满意度高;舒芬太尼组不良反应发生率显著低于芬太尼组,与对照组相似,但恶心、呕吐发生率显著低于对照组;舒芬太尼组肠蠕动恢复、肛门排气、排便时间较芬太尼和对照组显著缩短;术后血浆MOT水平舒芬太尼组迅速恢复,术后48 h恢复到术前水平,较芬太尼和对照组(72 h)快,术后24、48 h血浆MOT水平显著高于芬太尼和对照组。结论舒芬太尼PCEA安全、有效,通过增加血浆MOT水平,促进胃肠功能恢复。

胰岛素瘤19例诊治分析

目的:探讨胰岛素瘤的诊断与治疗。方法:对19例胰岛素瘤患者的临床资料进行回顾性分析。结果:本组有误诊史13例;表现为惠普尔(Whipple's)三联征,空腹胰岛素与血糖的比值超过0.3。术前16例经B超检查,定位4例;9例经CT检查,定位2例;3例经彩色多普勒超声扫描,定位2例;6例经选择性腹腔动脉造影检查,定位4例。术中19例病人经触诊定位17例;7例经B超检查,全部获得定位;术中B超引导下细针穿刺细胞学检查定位1例。手术后19例均治愈。结论:胰岛素瘤误诊率较高,术前经B超、CT定位率低,术中B超定位可作为常规检查,结合仔细触诊清查病灶。

重组激肽释放酶结合蛋白抑制胃癌淋巴管新生的实验研究

目的:探讨重组激肽释放酶结合蛋白(KBP)对胃癌淋巴管新生的抑制作用及其可能的分子机制。方法:培养SGC-7901胃癌细胞系,建立胃癌裸鼠异位移植瘤模型,了解KBP对胃癌生长和淋巴管新生的抑制作用。免疫组织化学和Western blot方法检测肿瘤细胞和组织中的血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达,明确KBP通过减少肿瘤细胞VEGF-C表达抑制肿瘤淋巴管新生和肿瘤生长。结果:腹腔内注射KBP导致胃癌生长抑制,抑制率为61.4%。KBP处理的肿瘤组织中淋巴管密度显著降低,提示KBP可以抑制肿瘤淋巴管生成和肿瘤生长。免疫组织化学和Western blot检测显示KBP处理的SGC-7901胃癌细胞和组织中VEGF-C的表达显著减少。结论:下调VEGF-C在肿瘤细胞和肿瘤组织中的表达,提示KBP可能通过抑制肿瘤淋巴管新生作用,进而抑制肿瘤淋巴转移的作用。

MMP-2与MMP-7在直肠癌中的表达及临床意义

目的研究直肠癌中MMP-2和MMP-7的表达情况,探讨它们与直肠癌侵袭和转移的关系及临床意义。方法对60例直肠癌、20例癌旁正常组织进行MMP-2和MMP-7免疫组化染色。结果MMP-2和MMP-7在癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,二者之间差异显著(P<0.05),MMP-2和MMP-7表达均与肿瘤分化程度、Dukes分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论直肠癌组织中MMP-2、MMP-7的表达与肿瘤进展有一定关系,可被视为反映直肠癌生物侵袭性的有价值的标志物,联合检测有助于判定结直肠癌临床病理特征及预后。

RNA联合干扰对肝癌细胞增殖的影响

目的探讨RNA联合干扰(RNAico)对肝癌细胞株Hepa1-6增殖的影响。方法设计针对小鼠肝癌细胞Hepa1-6 CDC20和HPSE mRNA的小干扰RNA,以阳离子脂质体包埋后转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,即RNAico;转染48 h后,采用MTT法和流式细胞术检测小干扰RNA对肝癌细胞体外生长和复制的影响。结果与对照组相比,联合干扰组肝癌细胞体外生长和复制均明显受抑制(P<0.05)。结论 RNAico可显著抑制小鼠肝癌细胞Hepa1-6的增殖。

肝癌细胞系HepG2中侧群细胞的生物学特性观察

目的:分选肝癌细胞系HepG2中侧群细胞并观察其生物学特性。方法:利用流式细胞荧光激活分选技术分选肝癌细胞系HepG2中的侧群细胞(SP)。实验细胞分为SP细胞、非侧群细胞(NSP)以及未分选细胞(Total组)3群,分别采用细胞生长曲线法比较3群细胞的增殖能力,平板克隆形成实验和裸鼠成瘤实验观察其体内外成瘤能力。结果:HepG2细胞中分选出的SP细胞比例为(3.1±0.2)%,细胞生长曲线表明SP细胞的增殖速度快于NSP细胞和未分选细胞(P<0.05),SP、NSP和未分选细胞软琼脂平板克隆形成率分别为66%、16%和32%;裸鼠体内成瘤率分别为100%(10/10)、30%(3/10)和70%(7/10),同时3组肿瘤平均质量分别为0.728g、0.185g及0.452g(P<0.05)。结论:肝癌细胞系HepG2中SP细胞的成瘤性和增殖能力强于非SP细胞和未分选细胞,表明SP细胞在肝癌的发生、发展中具有重要作用。

不同浓度绿茶活性成分协同作用抑制血管内皮细胞生长并诱导凋亡的效果分析

目的探讨不同浓度绿茶活性成分协同作用抑制血管内皮细胞生长并诱导凋亡的效果分析。方法采用不同浓度的绿茶四种主要活性成分(EGCG、ECG、EGC和EC)单独或联合作用于人脐静脉内皮细胞,检测血管内皮细胞的生长和凋亡。结果EGCG、ECG、EGC和EC都可以剂量依赖性地抑制血管内皮细胞生长和诱导其凋亡;其中,EGCG作用最强,小剂量的EGC、ECG和EC与EGCG联合应用可以显著增强EGCG抑制血管内皮细胞生长和诱导凋亡效应。结论不同浓度的绿茶主要活性成分都具有抑制血管内皮细胞生长和诱导凋亡作用,同时能够协同作用抑制血管生成。

抽水蓄能电厂在电力系统中的经济运行方式初探

本文对抽水蓄能电厂经济运行的最优准则及在电力系统中的经济运行方式进行了探讨

5-氟尿嘧啶对肝癌细胞株PLC/RAF/5生物学特性及耐药机制的影响

目的研究化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)反复作用肝癌细胞株PLC/RAF/5后生物学特性的变化,探讨耐药肝癌细胞与肝癌干细胞之间的相关性。方法用低浓度的5-Fu(1μg/ml)反复多次作用于人肝癌细胞株PLC/RAF/5后建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株,观察两种细胞的形态学差异。用CCK-8法检测不同浓度的5-Fu(0、0.25、0.5、1、1.5、2μg/ml)对两种细胞增殖的抑制作用;在不同浓度的5-Fu(0.5、1、2μg/ml)作用48 h后,流式细胞仪分析不同浓度下两种细胞的凋亡情况;检测两种细胞中侧群细胞的比例;平板克隆集落实验比较两种细胞的克隆形成能力;Western Blot检测两种细胞中Bax、Bcl-2、ABCG2和Fox M1蛋白的表达情况。计量资料组间比较采用t检验。结果用化疗药物5-Fu成功建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株。PLC/RAF/5/5-Fu细胞比PLC/RAF/5细胞体积大,突起减少,呈长梭形改变,折光性增强。与亲本细胞相比,PLC/RAF/5/5-Fu细胞对5-Fu增殖抑制作用的敏感性降低,细胞周期G0/G1期比例降低,而S期和G2/M期比例上升;抗凋亡能力增加;侧群细胞比例增加;增殖能力增强,上述差异均具有统计学意义(P值均<0.05)。Western Blot检测表明PLC/RAF/5/5-Fu细胞Bcl-2、Fox M1、ABCG2蛋白表达增强,而PLC/RAF/5细胞的Bax蛋白表达增强,差异具有统计学意义(P值均<0.01)。结论细胞株PLC/RAF/5/5-Fu中肝癌干细胞可能是其耐药的根源;低浓度的5-Fu(1μg/ml)可以富集肝癌干细胞样细胞。

胃肠道间质瘤的诊治——附18例报告

目的 探讨胃肠道间质瘤的诊断与治疗。方法 回顾分析 1998- 2 0 0 3年外科收治并经病理证实的 18例胃肠道间质瘤 (GIST)的临床资料。结果 本组患者平均年龄 5 1.2岁 ,男女比为 2∶1。部位以胃及小肠最多见。免疫组化表型CD1 1 7阳性率 77% ,CD34 阳性率 76 % ,SMA阳性率 4 4 % ,S - 10 0蛋白阳性率 2 4 % ,Desmin阳性率 2 2 %。病理诊断GIST良性 9例 ,交界性 1例 ,恶性 8例。 18例均行根治手术或局部切除。结论 GIST的诊断有赖于纤维光镜及钡剂肠道造影与免疫组化的结合 。

EGCG抑制IL-6诱导肿瘤血管生成的作用及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抑制IL-6诱导胃癌血管生成的作用及机制。方法以50 ng/mL IL-6或不同浓度EGCG培养AGS胃癌细胞株,Western blot免疫印迹法检测胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达;Elisa法检测肿瘤细胞培养液中VEGF的蛋白水平;RT-PCR检测胃癌细胞VEGF mRNA表达;制备胃癌细胞条件培养液培养血管内皮细胞,采用MTT法检测血管内皮细胞的体外增殖;小管形成实验检测血管内皮细胞体外小管形成;基质胶(matrigel)塞实验检测体内血管形成。结果 IL-6诱导胃癌细胞VEGF蛋白表达增加2.4倍,VEGF蛋白分泌增加2.8倍,而VEGF mRNA表达增加3.1倍;EGCG呈剂量依赖性地抑制IL-6诱导的胃癌细胞VEGF蛋白的表达、分泌和VEGF mRNA表达。VEGF中和抗体及EGCG在体外可以显著抑制IL-6诱导的血管内皮细胞增殖(t=3.02,P<0.01;t=2.56,P<0.05)和小管形成(t=3.38,P<0.01;t=3.61,P<0.01)以及在体内的血管生成(t=2.66,P<0.05;t=3.77,P<0.01)。结论 EGCG通过下调胃癌细胞VEGF的表达,而抑制IL-6诱导的肿瘤血管生成。

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制胃癌生长和血管生成及其分子机制的研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）抑制胃癌生长和血管生成的分子机制。方法建立裸鼠异位胃癌肿瘤模型．检测肿瘤生长及肿瘤组织微血管密度（MVD）。培养SGC-7901胃癌细胞．Western印迹方法检测肿瘤细胞及其组织血管内皮生长因子（VEGF）、总信号转导、转录活化因子（Star3）和磷酸化形式Stat3的表达，同时采用ELISA方法检测肿瘤细胞培养液中VEGF蛋白水平．RT-PCR方法检测胃癌细胞VEGFmRNA的表达水平。结果EGCG组肿瘤组织平均质量（0．32±0．08）g，显著低于对照组（0．81±0．12）g，t=7．24，P〈0．01。EGCG组平均肿瘤抑制率为（60．4±6．1）％：其肿瘤生长曲线也显著低于对照组、EGCG组的肿瘤组织MVD（15．2±4．3）也显著低于对照组（24．6±6．6）（t=3．41，P〈0．01）。EGCG组胃癌组织的VEGF表达也减少78．6％．并呈剂量依赖性地下降：其肿瘤组织中Stat3磷酸化活化也减少了53．5％，也呈剂量依赖性地下降：但并未影响总的Stat3表达。结论EGCG通过抑制Stat3活化减少胃癌细胞VEGF表达．从而抑制胃癌生长和血管生成。