针刺秩边穴对实验性大鼠非菌性前列腺炎影响的研究 Ⅱ.针刺对免疫系统及血管调质的良性调节作用

以 NBP大鼠为实验模型 ,观察对外周血中嗜中性颗粒细胞吞噬功能和 TL C计数的影响 ,及对前列腺组织中 ET含量的影响。结果 :模型上述各项免疫功能指标均低于正常 (P<0 .0 0 1 ) ,而针刺后回升至正常水平。模型前列腺组织中 ET含量明显高于正常 (P<0 .0 0 1 ) ,针刺后回降至正常水平。针刺治疗 NBP取效 ,可能与上述途径有关。

化湿方对糖尿病大鼠肾组织非酶糖化及氧化干预作用的实验研究

目的:研究化湿方治疗糖尿病肾病的可能机制。方法:分别用化湿方、氨基胍处理糖尿病大鼠,12周后测肾皮质晚期糖化终产物(AGEs)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、尿白蛋白排泄率、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN),观察肾组织形态。结果:化湿方能减少糖尿病大鼠肾皮质 AGEs 表达,提高 SOD 活性、降低 MDA 含量,减少尿白蛋白排泄率,改善肾功能,改善肾组织形态。结论:化湿方是较理想的中药非酶糖化抑制剂并具有抑制氧化应激反应的功能,其作用不依赖于降低血糖。

阿霉素肾病肾小球硬化动物模型的研究

目的:探讨肾小球硬化不同病理发展阶段动物模型的制作。方法:采用单侧肾切除并高低剂量阿霉素尾静脉注射法建立大鼠肾小球硬化模型,观察各组大鼠血尿生化和肾组织病理改变。结果:8周时高低剂量阿霉素模型组均出现尿蛋白排出增加,血脂升高,肾功能下降;高剂量阿霉素注射组光镜下肾小球硬化达80 %以上,呈弥漫性,其中2 5 %～5 0 %呈球性硬化,肾小球脏层上皮细胞足突广泛融合或消失;肾小管病变严重,肾小管上皮细胞肿胀、颗粒变性、坏死甚至脱落入小管腔,可见大量蛋白管型;间质纤维化和大量炎细胞浸润;低剂量阿霉素注射组肾小球硬化呈局灶节段性分布,肾小球肥大,肾小囊扩张,约5 0 %肾小球有不同程度的硬化,球性硬化达10 %左右,间质可见明显纤维化和局灶性炎细胞。结论:阿霉素对肾小球脏层上皮细胞、毛细血管内皮细胞及肾小管上皮细胞均有明显毒性损伤;高低剂量阿霉素注射组均为病变稳定的肾小球硬化模型,其中高剂量阿霉素注射组肾小球硬化模型为中晚期病理改变;低剂量阿霉素注射组为肾小球硬化早期病理改变。

疏利少阳标本兼治法对IgA肾病相关作用机制的研究

IgA肾病为世界范围内较常见的一种肾小球疾病，也是肾小球源性血尿最常见的病因。该病病因未明，可能与致病性IgA产生、机体免疫功能状态、遗传等因素有关，随着肾活检的开展，对其认识逐步深刻，约15％一20％的患者在诊断本病后10年内、30％一35％在20年内进入终末期肾衰。而肾小球硬化则是这一病理进程的重要病理基础，探讨IgA肾病肾小球硬化的发生、发展机制及防治策略具有重要意义。

肾疏宁对大鼠系膜增生性肾炎的肾小管间质损害的形态学影响

目的 :观察中药肾疏宁对系膜增生性肾炎 (MsPGN )的肾小管间质损伤的影响。方法 :制作大鼠MsPGN模型。予肾疏宁治疗并以肾炎康复片为对照组 ,观察肾脏形态学及 2 4h尿蛋白定量。结果 :肾疏宁能明显减轻MsPGN大鼠的蛋白尿 ,减轻肾组织病理病变尤其是肾小管间质损伤 ,且对损伤的肾组织有修复作用。与模型组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ,与肾炎康复片组相比 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;与正常组相比 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :肾疏宁能降低尿蛋白、保护肾功能、减轻MsPGN的肾小球病变及肾小管间质损伤。

肾络宁对IgA肾病大鼠肾间质细胞外基质代谢的影响

[目的]通过复制免疫球蛋白A肾病(IgAN)大鼠模型,探讨肾络宁对IgAN大鼠肾间质细胞外基质(ECM)代谢的影响。[方法]口服并定时尾静脉注射牛血清白蛋白,复合葡萄球菌肠毒素感染的方法复制IgAN模型,同时给予肾络宁治疗,利用原位分子杂交和免疫组织化学的方法,结合计算机病理图像分析,观察肾络宁对IgAN大鼠肾间质Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)基因及蛋白表达的影响。[结果]1)肾络宁组肾间质ColⅢ蛋白及PAI-1、TIMP-1mRNA表达与模型组相比明显降低(P<0.01或0.05)。2)肾络宁组肾间质MMP-1mRNA表达与模型组相比显著升高(P<0.01)。[结论]肾络宁能降低IgAN模型大鼠肾间质ColⅢ蛋白的表达,下调PAI-1、TIMP-1mRNA的表达,上调MMP-1mRNA的表达,从而发挥调节ECM代谢的作用。

肾炎3号方对肾小球系膜细胞TGF-β_1及其mRNA表达的影响

目的 :观察肾炎 3号方对肾小球系膜细胞TGF β1及其mRNA表达的影响。方法 :应用血清药理学方法制备含药血清 ,作用于正常胎牛血清培养和脂多糖刺激下的系膜细胞 ,利用ELISA和RT -PCR方法 ,观察肾炎 3号方对肾小球系膜细胞TGF β1及其mRNA表达的影响。结果 :肾炎 3号方能显著抑制系膜细胞TGF β1的分泌及其mRNA的表达。结论 :肾炎 3号方抑制TGF β1及其基因表达可能是其治疗系膜增生性肾炎防止肾小球硬化的机制之一。

慢肾消对家兔实验性膜性肾炎的影响

目的 :探讨慢肾消对膜性肾炎治疗作用的机理。方法 :用阳离子化牛血清白蛋白 (C BSA)复制家兔膜性肾炎模型 ,分为慢肾消组、雷公藤组、模型组和正常组。每 2周检测 1次蛋白尿 ,实验结束时检测血浆白蛋白、总蛋白和胆固醇以及血栓素B2 (TxB2 )、6 酮 前列腺素 (6 keto PGF1a)。并进行光镜、电镜和免疫荧光的观察。结果 :慢肾消组和雷公藤组从第 4周开始 2 4h尿蛋白定量明显低于模型组 (P <0 0 1) ,而且血浆白蛋白、总蛋白以及胆固醇与模型组相比 ,均有明显改善 (P <0 0 5或P <0 0 1)。其中慢肾消提高血浆白蛋白、降低血浆胆固醇及TxB2 的作用明显优于雷公藤 (P <0 0 5) ,光镜、电镜和免疫荧光均发现两个用药组均较模型组病理损害减轻 ,尤以慢肾消组更为明显。结论 :慢肾消能减少尿蛋白 ,提高血浆总蛋白和白蛋白 ,降低血浆胆固醇 。

肾小球硬化中肾小管间质细胞表型转化及肾疏宁的干预作用

目的 :探讨肾小球硬化大鼠肾小管上皮细胞及间质成纤维细胞的表型转化情况及中药复方肾疏宁的作用。方法 :SD大鼠随机分为假手术组、模型组、模型组 +肾疏宁治疗组、模型组 +苯那普利治疗组。采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射的方法建立大鼠肾小球硬化模型 ,8周末光镜及透射电镜观察肾组织病理 ,免疫组织化学染色法观察大鼠肾小管上皮细胞及间质成纤维细胞α -平滑肌肌动蛋白 (alphasmoothmuscleactin ,α -SMA)和转化生长因子 - β1(transforminggrowthfactorβ1,TGF - β1)表达情况 ,用计算机病理图像分析软件检测肾小管间质α -SMA和TGF - β1染色阳性相对面积 ,和肾间质纤维化相对面积。同时观察肾疏宁对肾小球硬化大鼠体重、尿蛋白、血总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐的影响。结果 :假手术组大鼠肾小管间质α -SMA少量表达 ,TGF - β1微量表达 ,肾小球硬化模型组大鼠肾小管间质α-SMA明显阳性表达 (P <0 .0 1) ,TGF - β1显著阳性表达 (P <0 .0 1) ,肾小管间距加宽 ,肾间质纤维化和大量淋巴细胞和单核细胞浸润 ,血白蛋白、总蛋白明显降低 (P <0 .0 1) ,尿蛋白、血尿素氮、肌酐明显升高(P <0 .0 1) ,肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组 2 4h尿蛋白排泄量、血尿素氮、肌酐明显降低 (P <0 .0 1) 。

三焦浅议

三焦学说的研究可大致分为形态三焦说、部位三焦说、功用三焦说、辨证三焦说等。今后应提倡结合临床实践探讨其功用,以更好的发挥这一传统中医理论的作用。

肾络宁对IgA肾病肾小球硬化大鼠治疗作用的实验研究

目的:研究肾络宁治疗IgA肾病(IgAN)肾小球硬化模型大鼠的治疗作用。方法:通过切除一侧肾脏,反复注射较大剂量的葡萄球菌肠毒素B(SEB),制作IgAN肾小球硬化大鼠模型,观察肾络宁对大鼠肾脏功能以及病理形态的影响。结果:肾络宁可显著减少尿蛋白、红细胞,改善肾脏功能,减轻肾小球损伤,促进肾脏组织的修复。结论:肾络宁对IgAN肾小球硬化具有较好的防治作用。

系膜增生性肾炎肾小管间质损害模型的建立及肾疏宁的保护作用

[目的]建立一种新的系膜增生性肾炎肾小管间质损害模型,并观察肾疏宁的保护作用。[方法]在系膜增生性肾炎(MsPGN)模型基础上,延长造模时间至12～16周,使其自然发展成肾小管间质损害模型,观察肾疏宁对进展性肾小管间质损害的保护作用,并设苯那普利为阳性对照组。[结果]随着造模时间的延长,模型组肾小管间质损害逐渐加重,肾疏宁及苯那普利组损伤程度明显减轻。[结论]系膜增生性肾炎中肾小管间质损害模型成功,中药肾疏宁对肾小管间质损害具有明显的保护作用。

肾疏宁对肾小管间质损害大鼠TGF-β_1及其下游因子CTGF mRNA表达的影响

目的观察肾疏宁对肾小管间质损害大鼠TGF-β1、CTGF蛋白及CTGFmRNA表达的影响。方法在系膜增生性肾炎(MsPGN)模型基础上,延长造模时间至12～16周,使其自然发展成肾小管间质损害模型,观察肾疏宁对肾小管间质TGF-β1、CTGF蛋白及CTGFmRNA表达的影响,并设苯那普利为阳性对照组。结果第12～16周末,造模各组肾小管间质TGF-β1、CTGF蛋白及CTGFmRNA表达量均明显高于正常组(P<0.01),肾疏宁组、苯那普利组均显著低于模型组(P<0.01);第12周末,肾疏宁组与苯那普利组比较无显著性差异(P>0.05),而第16周末,肾疏宁组明显低于苯那普利组(P<0.01)。结论肾疏宁可对抗CTGF基因的表达,直接或间接抑制TGF-β1,从而保护肾小管间质损害。

IgA肾病肾小球硬化实验动物模型及其病理改变的研究

通过切除一侧肾脏,反复尾静脉注射较大剂量葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法,制作比较接近人类IgA肾病肾小球硬化病变发展过程的大鼠实验动物模型,并进行光镜、电镜等的观察比较,以期为进一步的研究提供依据。

转化生长因子-β1与纤维连结蛋白在IgA肾病肾小球硬化模型中的表达及肾络宁的干预作用

目的:观察以疏利少阳为治疗原则的肾络宁对IgA肾病肾小球硬化模型的影响。方法:SD大鼠90只随机分为正常组、模型组、苯那普利组、肾炎康复片组、肾络宁组。采用单肾切除后反复尾静脉注射较大剂量葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法,制作接近人类IgA肾病肾小球硬化病变发展过程的大鼠实验动物模型,并观察不同时间节点时,各组转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连结蛋白(FN)的表达情况。结果:模型组肾小球TGF-β1、FN表达量升高,各治疗组肾小球中TGF-β1、FN表达量下降。与苯那普利、肾炎康复片组比较,肾络宁组在第9周后的治疗效果更为突出。结论:以疏利少阳为治疗原则的肾络宁对防治IgA肾病肾小球硬化有良好的疗效。

肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质的影响

目的 :观察肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质中ColⅣ、FN的影响。方法 :综合运用口服牛血清白蛋白 ,尾静脉注射葡萄球菌肠毒素 ,定期注射弗氏佐剂 ,复制了大鼠MsPGN模型 ,利用免疫组化观察肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质中ColⅣ、FN的影响。结果 :模型组系膜基质中ColⅣ、FN表达明显增多 ,肾疏宁组和肾炎康复片组的表达则明显减少 ,其中肾疏宁组尤为显著。结论

肾疏宁对肾小管间质损害大鼠FN、ColⅢ、PAI-1 mRNA的作用

目的：观察肾疏宁对肾小管间质损害大鼠FN、colm、PAl—lmRNA表达的影响。方法：在系膜增生性肾炎（MsPGN）模型基础上。延长造模时间至12～16周，使其自然发展成肾小管间质损害模型，观察肾疏宁对肾小管间质FN、colm、PAl—lmRNA表达的影响，并设苯那普利为阳性对照组。结果：第12～16周末，造模各组肾小管间质FN、ColⅢ、PAI-1mRNA表达量均明显升高（P〈0．05或P〈0．01），肾疏宁组、苯那普利组均显著低于模型组（P〈0．05或P〈0．01），第12周末，肾疏宁组与苯那普利组比较无统计学差异（P〉0．05），而第16周末，肾疏宁组明显低于苯那普利组（P〈0．01）。结论：肾疏宁能抑制细胞外基质的合成，促进其降解，从而保护肾小管间质损害。

肾疏宁对肾小球硬化大鼠肝细胞生长因子的影响

目的:探讨肾疏宁对肾小球硬化大鼠肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的影响。方法:采用单侧肾切除及尾静脉注射阿霉素方法建立大鼠肾小球硬化模型。42只造模大鼠随机分为模型组,肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组,另设8只大鼠作为假手术组。肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组分别予以肾疏宁和苯那普利治疗8周,其余两组予以等量蒸馏水灌胃。治疗8周末,测定大鼠24 h尿蛋白定量(urine protein,Upr)、血清肌酐(creatinine,Cr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);光镜下观察各组大鼠肾组织病理形态学改变,比较各组大鼠肾小球毛细血管直径、系膜基质和肾小球硬化指数;采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测肾组织HGF mRNA的表达水平。结果:模型组大鼠24 h Upr、血清Cr和BUN较假手术组明显升高(P<0.01);肾小球硬化呈弥漫性分布,肾小球内部分毛细血管腔缩小或塌陷闭塞,系膜基质增多,系膜区增宽,肾小球硬化指数3.32±0.35;肾组织HGF mRNA的表达明显下调(P<0.05)。肾疏宁治疗组和苯那普利治疗组大鼠24 h Upr、血清Cr和BUN较模型组明显降低(P<0.01);系膜细胞增生和系膜基质明显减少,毛细血管开放好转,肾小球硬化指数降低(P<0.01);肾组织HGF mRNA的表达明显上调(P<0.01)。结论:肾疏宁可以上调肾组织HGF mRNA的表达,减少系膜基质,改善肾脏病理形态,延缓肾小球硬化的进程。

疏利少阳法对MsPGN大鼠肾小管间质损害部位PDGF-BBmRNA表达的影响

目的:观察疏利少阳法对MsPGN大鼠肾小管间质损害部位PDGF-BBmRNA表达的影响。方法:在传统的系膜增生性肾炎模型基础上,延长造模时间至12～16周,使其自然发展成肾小管间质损害模型,观察疏利少阳法对肾小球疾病中肾小管间质损害的保护作用。采用原位杂交的方法检测小管间质损害部位PDGF-BBmRNA表达水平的变化,并设立苯那普利为对照组。结果:第12周,模型组肾小管间质损害部位PDGFmRNA表达明显增加(P<0.01),中、西药治疗组与模型组相比,均明显降低(P分别<0.01、0.05),且疏利少阳法中药明显优于西药苯那普利(P<0.01)。第16周,随着造模时间的延长,模型组肾小管间质损害部位PDGFmRNA的表达仍居高不下(P<0.01),中药治疗组继续起作用(P<0.01),而西药组作用不明显(P>0.05)。结论:疏利少阳法对系膜增生性肾炎大鼠肾小管间质损害具有明显的保护作用。