嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2参与狼疮小鼠肾脏损害的机制研究

目的通过嗜酸性粒细胞相关核糖核酸酶A家族成员2(Ear2)髓系细胞条件性敲除小鼠探讨其在狼疮发病中的作用及参与肾脏损害的可能机制。方法利用规律间隔成簇短回文重复序列关联基因9(CRISP/Cas9)技术构建Ear2髓系细胞条件性敲除小鼠模型,应用PCR鉴定小鼠基因型。实验分为3组:CKO+R848组,对照+R848组,对照组。R848处理敲除鼠和同型对照鼠,评估小鼠狼疮样病变发生情况。荧光实时定量PCR法检测小鼠肾脏中Toll样受体(TLR)7/8和炎症因子的表达。流式细胞术检测狼疮小鼠肾脏中巡逻单核细胞(PMOs)的比例,免疫荧光法分析Ear2和PMOs在肾组织中的空间分布。R848体外刺激条件性敲除(CKO)和对照小鼠的骨髓细胞,流式细胞术检测PMOs比例变化。采用单因素方差分析对3组进行比较。结果髓系细胞条件敲除Ear2小鼠构建后PCR显示基因型为Lyz2^(ki/wt)Ear2^(fl/fl),敲除鼠骨髓细胞中Ear2 mRNA水平显著下调[(1.03±0.26)与(0.22±0.15),t=6.65,P<0.001]。与对照+R848组相比,CKO+R848组小鼠狼疮表型得到改善,生存率有上升趋势(6/10与7/8,χ^(2)=1.51,P=0.220),病理结果提示CKO+R848组小鼠肾脏病变减轻。CKO+R848小鼠肾脏组织中TLR7表达水平降低[(1.02±0.09)与(0.53±0.04),t=5.13,P=0.003],同时PMOs浸润减少[(62.00±3.38)%与(52.36±0.68)%,t=2.80,P=0.023],免疫荧光结果显示Ear2和PMOs在肾组织共定位。体外R848刺激引起对照组PMOs比例的增多[(3.99±0.59)%与(33.48±1.38)%,t=-33.84,P<0.001],敲除Ear2可以抑制TLR7引起的PMOs的增多[(14.33±1.72)%与(16.10±1.44)%,t=-1.37,P=0.220]。结论Ear2条件性敲除可减轻狼疮小鼠发病,尤其是肾脏损害。其机制与抑制TLR7通路激活、减少PMOs局部浸润有关。

狼疮肾炎诊治进展

近年来狼疮肾炎(LN)的诊治取得了较大的进展,如2018年国际肾脏病学会联合肾脏病理学会对狼疮肾炎的病理分类进行了修订,2019年欧洲抗风湿病联盟的狼疮管理建议得到更新,2019年中国LN诊断和治疗指南重点推荐了LN多靶点治疗策略。此外,生物制剂如利妥昔单抗、贝利尤单抗等治疗LN的研究也陆续问世,不断地改变着人们对LN治疗的认识。文章对近期LN的进展进行了回顾,着重于肾活检时机、治疗目标、药物选择以及药物减停这几个关键问题,以期为患者的临床诊治提供参考。

免疫抑制药物在重症狼疮中的应用

系统性红斑狼疮是自身免疫性疾病的原型疾病,尽管近年来患者预后已有了较大的改善,重症狼疮的死亡率仍居高不下。重症狼疮的类型复杂,治疗上循证医学证据不多,同时糖皮质激素和免疫抑制药物的不恰当应用会增加感染和其他并发症的发生风险,导致残疾甚至死亡。综述神经精神狼疮、狼疮性肾炎、心肺受累、消化系统病变和血小板减少等不同种类重症狼疮的免疫抑制治疗方案,以期为临床合理用药提供参考。