国家重点实验室仪器设备公用平台的建设和开放式管理

国家重点实验室是我国科技创新体系的重要组成部分,建立管理有序、运行高效的仪器设备公用平台为科学研究、培育人才提供了重要保障。医药生物技术国家重点实验室从统筹统购、集中放置统一管理、安全建设等方面进行了仪器设备公用平台的建设,通过监控网络、有偿服务等科学手段进行全天候开放式管理,制定并逐渐完善了一系列的管理制度,有效提高了仪器设备的使用效率,推动了实验室的全面开放运行,提高了实验室的管理水平和学术水平。

高液相色谱在研究人工核酸酶中的应用

目的:用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定了用Cu（Ⅱ）组氨酸配合物切割DNA-二核苷酸2’-脱氧腺嘌吟（3’→5’）-2’-脱氧腺嘌呤核苷酸的产物。方法:色谱柱Hypersil BDS C18 150mm×4.6mm;流动相为C:0.2mol·L-1磷酸二氢铵溶液（pH5.5）,B:甲醇-水（3:2）;流速:0.85mL·min-1;梯度为B:0 0→5min;B:0→50％ 5→17min;B,50％→100％17→18min;B:100％19min 停止。紫外检测波长260nm。结果:在本文中,用HPLC检测可得到直接有效的数据。结论:本方法准确、灵敏。

钙离子对HRPC结构和电催化活性影响的研究

通过比较辣根过氧化物酶同工酶C(HRPC)中Ca2+移除前后的HRPC的光谱和电化学特性,阐明了Ca2+的存在对HRPC的重要作用。移除Ca2+后HRPC的紫外-可见吸收光谱发生了变化,Soret带的最大特征吸收峰以及α带和β带特征吸收峰均发生不同程度的蓝移和峰强减弱,表明其血红素微环境及结构发生了变化。移除Ca2+后的HRPC也可在与聚L型赖氨酸共修饰的石墨电极上表现出对H2O2的催化响应,但是天然HRPC比去除Ca2+后的HRPC对H2O2表现出更低的检测限,更宽的检测范围,更高的灵敏度以及更好的稳定性。实验结果表明,Ca2+对HRPC血红素微环境的保持、催化活性和稳定性均有重要的作用。

雷公藤内酯醇靶蛋白的筛选及其结合的初步验证

采用噬菌体展示肽库技术筛选雷公藤内酯醇的靶蛋白,得到了一个肽段,并通过酶联免疫吸附(ELISA)和免疫共沉淀验证了该片段对雷公藤内酯醇的结合特异性。用Basic Local Alignment Search Tool(BLAST)进行序列对比后,找到了77个匹配序列,其中最为匹配的序列是人类类固醇生成因子-1(hSF-1),因此hSF-1可能是雷公藤内酯醇的一个潜在受体。在大肠杆菌中表达纯化了hSF-1的配体结合域(LBD),荧光光谱实验表明雷公藤内酯醇对hSF-1-LBD有荧光淬灭作用、等温滴定量热(ITC)实验表明雷公藤内酯醇与hSF-1-LBD发生焓驱动的特异性结合,表面等离子体共振(SPR)实验表明雷公藤内酯醇可以与hSF-1-LBD剂量依赖性结合,这些都证实了hSF-1与雷公藤内酯醇存在特异性相互作用。

含微囊藻毒素的蓝藻水华提取物对小鼠抗氧化酶的毒性作用(英文)

在世界范围内发生的富含营养的废水中生长蓝藻水华已经造成了严重的水污染。已有报道显示水华中的有毒成分是一类单环七肽微囊藻毒素,它们对人和家畜有严重的毒害作用,本文所使用的蓝藻水华采集于我国的太湖地区。我们采用三个亚致死计量(16、32、64 mg冻干藻细胞/kg体重,相当于4.97、9.94、19.88μg藻毒素/kg体重)的蓝藻水华提取物(CBE),分析它们对小鼠肝脏抗氧化酶的影响。经过连续14d每天腹腔注射CBE,小鼠分别在第3、5、7、9、11、13、15天处死并检测三种主要的抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽巯基转移酶(GST)的活性。SOD和CAT的活性均呈现了抑制效应,GST的活性也发生了明显的变化。为了进一步确定过氧化的程度,我们又通过检测丙二醛的含量分析了脂质过氧化的程度。经过14d CBE处理后脂质过氧化表现出了明显的浓度依赖性的上升趋势。我们的结果表明,CBE对小鼠的抗氧化酶有严重毒害作用,并且能够引起脂质的过氧化。

人ERCC1在大肠杆菌中的表达研究

人ERCC1基因是与核苷酸切除修复有关的基因 .为了对其结构和功能进行进一步研究 ,将ERCC1基因放入大肠杆菌中进行表达 .试验中发现表达产物大多以包涵体的形式存在 .为了提高表达产物的可溶性表达 ,实验了 3种方法 :将ERCC1与GROES/EL共表达 ,将ERCC1与PDI共表达及在低温下进行ERCC1的表达 。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体临床治疗应用前景

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)具有选择性细胞毒性,不仅诱导肿瘤细胞凋亡,还诱导肝和脑细胞凋亡,也诱导病毒感染的细胞凋亡,但对机体正常组织无毒性。TRAIL已成为全球新药研究的热点。本文从TRAIL的凋亡通路及其调控、肿瘤细胞对TRAIL抵抗的原因综述TRAIL在难治性疾病治疗中的应用。