目的:研究飞燕草素对HER-2^+乳腺癌细胞MDA-MB-453自噬的诱导作用及其分子机制。方法:以不同浓度飞燕草素处理MDA-MB-453细胞,CCK-8检测细胞增殖情况;TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)和Wes...目的:研究飞燕草素对HER-2^+乳腺癌细胞MDA-MB-453自噬的诱导作用及其分子机制。方法:以不同浓度飞燕草素处理MDA-MB-453细胞,CCK-8检测细胞增殖情况;TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)和Western印迹检测细胞凋亡和与凋亡相关蛋白的表达;荧光斑点、免疫荧光和Western印迹检测自噬的诱导情况和诱导机制。结果:飞燕草素抑制MDA-MB-453细胞增殖,增加TUNEL阳性细胞数,下调caspase-3和caspase-9蛋白活性,上调裂解的caspase-3和裂解的caspase-9蛋白活性。飞燕草素增加GFP-LC3荧光斑点数、LC3免疫荧光斑点数、LC3-Ⅱ和ATG5蛋白表达。飞燕草素下调mTOR通路蛋白AKT,mTOR,eIF4E和p70s6k蛋白活性。结论:飞燕草素诱导HER-2^+乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡的同时通过抑制AKT/mTOR通路诱导细胞自噬。展开更多
文摘目的:研究飞燕草素对HER-2^+乳腺癌细胞MDA-MB-453自噬的诱导作用及其分子机制。方法:以不同浓度飞燕草素处理MDA-MB-453细胞,CCK-8检测细胞增殖情况;TdT介导的脱氧尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)和Western印迹检测细胞凋亡和与凋亡相关蛋白的表达;荧光斑点、免疫荧光和Western印迹检测自噬的诱导情况和诱导机制。结果:飞燕草素抑制MDA-MB-453细胞增殖,增加TUNEL阳性细胞数,下调caspase-3和caspase-9蛋白活性,上调裂解的caspase-3和裂解的caspase-9蛋白活性。飞燕草素增加GFP-LC3荧光斑点数、LC3免疫荧光斑点数、LC3-Ⅱ和ATG5蛋白表达。飞燕草素下调mTOR通路蛋白AKT,mTOR,eIF4E和p70s6k蛋白活性。结论:飞燕草素诱导HER-2^+乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡的同时通过抑制AKT/mTOR通路诱导细胞自噬。