~Aγ-225～-222缺失复合β地中海贫血的研究

目的:探讨Aγ-225^-222缺失导致的非缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征(nondeletional hereditary persistence of fetal hemoglobin,nd-HPFH)复合β地中海贫血的基因突变和临床特征。方法:选择2013年6月至2014年7月在广西医科大学第一附属医院就诊的病例进行血常规检查;应用高效液相色谱法(HPLC)测定血红蛋白Hb F和Hb A2水平;应用DNA测序方法分析γ珠蛋白基因突变;应用反向斑点杂交(RDB)和gap-PCR方法检测地中海贫血基因突变;应用SPSS 16.0统计软件对数据进行统计分析。结果:在122例Hb F增高的病例中,检测出7例Aγ-225^-222AGCA缺失杂合子,其中3例复合Gγ-158C→T突变杂合子,1例同时复合β地中海贫血-28A→G突变杂合子以及Gγ-158C→T突变杂合子,1例复合β地中海贫血CD17A→T突变杂合子。血常规检查显示7例Hb为96.7~142.3g/L,MCV为54.61~77.65fl,MCH为16.10~25.26pg。Hb分析显示7例Hb F为4.0%~11.2%,其中复合Gγ-158C→T突变杂合子Hb F为4.0%~8.1%,复合β地中海贫血杂合子Hb F为8.1%~11.2%。5例Hb A2正常,2例复合β地中海贫血杂合子Hb A2增高(5.6%~6.4%)。Aγ-225^-222缺失复合β地中海贫血杂合子与β地中海贫血杂合子相比,Hb F、Hb水平明显升高(P<0.05)。结论:Aγ-225^-222缺失可导致Hb F水平升高,其杂合子均无临床症状,Hb正常或降低,MCV、MCH降低。Aγ-225^-222缺失复合β地中海贫血杂合子的Hb F、Hb水平明显高于β地中海贫血杂合子。

KLF1基因对非缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征的修饰作用

目的:探讨KLF1基因对非缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征(HPFH)的修饰作用。方法:选择2017年6月1日至2018年4月30日广西医科大学第一附属医院门诊进行地中海贫血筛查且年龄大于2岁的患者,经血红蛋白(Hb)分析提示胎儿血红蛋白(HbF)升高,且β-地中海贫血基因检测无突变、β珠蛋白基因启动子测序有突变的73例患者进行KLF1基因测序,同时分析其血常规、Hb电泳等表型特征。结果:73例患者中52例有KLF1基因变异,共筛查出8种基因位点突变。有KLF1突变(52例)和无KLF1突变(21例)患者平均红细胞体积(MCV)、HbF、成人血红蛋白A2(HbA2)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);KLF1基因-251C>G,c.304T>C纯合子(18例)较-251C/G,c.304T/C杂合子(24例)有更高的HbF水平(P<0.05)。结论:KLF1基因与非缺失型HPFH对升高HbF有协同作用;KLF1不同基因型对HbF升高作用不同。

非缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征复合β地中海贫血的研究进展

遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征（hereditary persis-tence of fetal hemoglobin，HPFH）是由于β珠蛋白基因簇中DNA序列的碱基替换或缺失导致出生后胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin，HbF）持续增高的遗传性血红蛋白病［1］。 HPFH可分为缺失型HPFH和非缺失型HPFH（nd-HPFH）。 nd-HPFH是由于γ珠蛋白基因启动子区点突变或小片段缺失所致［2］。正常成人体内血红蛋白主要是HbA，HbF含量小于总血红蛋白的1％［3］。β地中海贫血（β地贫）是由于β珠蛋白基因缺陷或缺失使β珠蛋白肽链合成减少或缺如，导致血红蛋白组分改变的遗传性溶血性贫血，可分为轻型、中间型和重型，临床表现从几乎无症状到严重贫血［4－5］。 nd-HPFH复合β地贫的HbF明显升高，高水平HbF可通过平衡珠蛋白链合成而改善贫血症状［6］。广西、广东等南方地区是国内β地贫高发区，本文就nd-HPFH复合β地贫的基因突变类型和临床表现作一综述，为β地贫诊治提供理论依据。

一种新的β-珠蛋白基因启动子突变-38G>A导致β-地中海贫血的研究

目的:研究β-珠蛋白基因启动子区-38G>A基因突变导致β-地中海贫血的临床特征以及基因型-表型相关性。方法:收集2019年7月至2020年1月在广西医科大学第一附属医院就诊的确诊为β-地中海贫血的病例412例,应用血细胞自动分析仪进行血常规检测,血红蛋白(Hb)分析仪进行Hb分析,荧光PCR熔解曲线法及DNA测序检测β-珠蛋白基因突变类型。结果:在412例β-地中海贫血病例中检出1例新的β-珠蛋白基因-38G>A(HBB:c.-88 G>A)杂合子突变,该病例轻度贫血,无黄疸、肝脾肿大,无输血史;血常规结果:Hb 108.8 g/L,红细胞计数(RBC)5.85×1012/L,红细胞平均容积(MCV)62.51fL,红细胞平均血红蛋白(MCH)18.61 pg,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)297.7 g/L,血细胞比容(HCT)0.365;Hb分析结果:血红蛋白A2(HbA2)3.5%,胎儿血红蛋白(HbF)0.6%。结论:首次发现β-珠蛋白基因启动子-38G>A突变导致β-地中海贫血,其致病机制可能是影响与转录因子或者结合蛋白的结合,从而影响转录起始速率。其杂合子表现为轻度贫血,HbA2稍升高,为轻型β-地中海贫血。

应用铁过载小鼠模型筛选铁代谢相关miRNA的研究

目的通过构建铁过载小鼠模型,筛选出小鼠小肠细胞的铁代谢相关miRNA。方法将40只昆明雄性小鼠随机分成正常对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组4个小组,分别腹腔注射右旋糖酐铁0、1.5、3、6 mg/次,共20次,构造铁过载小鼠模型。造模结束后测量小鼠的血清铁蛋白及肝肾等器官的铁含量,评价造模效果。采集其中两组小鼠的小肠上皮细胞,提取miRNA并进行小RNA高通量测序及生物信息学分析,筛选出可能与小肠铁代谢相关的miRNA。结果小鼠的血清铁及小肠等组织的铁元素含量增加,镜下可见铁沉积,各组织铁元素含量升高,升高程度与铁剂注射量成正比;对测序结果进行生物信息学分析,共选出9个可能与铁代谢相关的miRNA。结论通过腹腔注射铁剂的方法,可以构建合格的铁过载小鼠模型;通过对小肠上皮细胞进行小RNA测序及生物信息学分析可以筛选出铁代谢相关miRNA。