基于斑马鱼模型的抗结核药物肝脏毒性比较研究

目的以肝脏绿色荧光转基因斑马鱼Tg(L-FABP:EGFP)为模型,研究一线抗结核药物异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇对斑马鱼肝脏的影响以及比较其肝毒性大小。方法用不同浓度的异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇分别处理发育至72h的斑马鱼,于加药后24、48和72hpe(hour post-exposure)观察斑马鱼的死亡率、畸形率和肝脏形态变化情况,荧光显微镜下观察药物对斑马鱼肝脏荧光面积和荧光强度的影响。结果随着给药浓度的增加和给药时间的延长,异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇导致斑马鱼死亡率、畸形率升高。在72hpe,与空白对照组相比,1、2.5和5mmol/L吡嗪酰胺组斑马鱼肝脏荧光面积显著下降,5mmol/L异烟肼组斑马鱼肝脏荧光面积显著下降,10、20和30mmol/L乙胺丁醇组斑马鱼肝脏荧光面积显著下降。5mmol/L浓度下,异烟肼导致斑马鱼肝脏荧光面积降低程度高于吡嗪酰胺。结论异烟肼、吡嗪酰胺和乙胺丁醇均有肝脏毒性,乙胺丁醇肝毒性最小。1和2.5mmol/L浓度下吡嗪酰胺导致斑马鱼发生肝损伤程度强于异烟肼,但5mmol/L下异烟肼肝脏损伤程度强于吡嗪酰胺,其有关机制需进一步研究。

菊花及其副产物的药理作用及在饲料添加剂中的应用

菊花为一种常见的药食同源中药,在我国种植范围很广。菊花中含有多种活性成分。文章综述了菊花及其副产物茎叶等部位的活性成分种类和含量、药理作用,以及菊花副产物在畜禽和水产养殖中的应用,为菊花及其副产物作为饲料添加剂的开发提供了依据,以达到资源的有效利用。

牡丹籽油微囊粉对异烟肼诱导的斑马鱼发育毒性的保护作用

为评价牡丹籽油微囊粉(PSO)对异烟肼(INH)发育毒性的保护作用,用不同浓度的PSO处理发育至2 h的斑马鱼胚胎,于处理后24、48、72、96 h观察幼鱼的死亡率、孵化率与形态学变化,确定斑马鱼对PSO的耐受剂量。通过死亡率、形态评分等指标评价PSO对INH诱导的斑马鱼发育毒性的保护作用。结果表明,PSO在20、40、80μg/mL浓度下对斑马鱼发育没有影响,20μg/mL PSO缓解了INH导致的斑马鱼幼鱼畸形情况,降低了INH导致的斑马鱼幼鱼死亡率。PSO对INH发育毒性具有保护作用。

基于斑马鱼模型的蟾酥甲醇提取物抑制血管生成和抗炎活性研究

目的对蟾酥甲醇提取物中化学成分进行初步分析,并利用斑马鱼模型评价其抑制血管生成及抗炎活性。方法采用液质联用(LC-MS)技术,用反相C_(18)色谱柱,以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾-三重四级杆飞行时间质谱正/负离子双重扫描方式,对提取物中的样品进行分析;采用受精后24 h(24 hpf)绿色荧光标记血管的转基因斑马鱼作为实验动物模型,荧光显微镜下观察背部节间血管生成情况,计算节间血管长度,研究PTK787(阳性药,0.2μg/mL)和蟾酥甲醇提取物2、4、6μg/mL浓度对斑马鱼血管生成的影响;采用受精后3 d(3 dpf)健康绿色荧光标记炎症细胞的转基因斑马鱼作为实验动物模型,设置对照组、模型(CuSO_(4),20μmol/L)组、布洛芬(阳性药,20μmol/L)组和蟾酥甲醇提取物(0.4、0.8μg/mL)组,计数神经丘周围炎症细胞个数。结果蟾酥甲醇提取物中共检测出33个色谱峰,并鉴定出其中7个为结合型蟾蜍二烯酸内酯。与对照组比较,蟾酥甲醇提取物4、6μg/mL浓度组斑马鱼血管生成受到抑制,血管长度变短,具有显著性差异(P<0.05、0.01);与对照组比较,CuSO_(4)模型组斑马鱼迁移到神经丘侧线部位的炎症细胞数量显著增多(P<0.01);与模型组比较,蟾酥甲醇提取物0.8μg/mL组炎症细胞迁移减少,具有显著差异(P<0.01)。结论通过LC-MS法从蟾酥甲醇提取物中鉴定出7个结合型蟾蜍二烯酸内酯,蟾酥甲醇提取物具有抑制血管生成和抗炎活性。

基于斑马鱼模型的三峡阳菊叶水提物安全性评价研究

目的以斑马鱼为模型,评价三峡阳菊叶水提物(WELTGY)对斑马鱼整体形态以及心脏、肾脏和肝脏等主要脏器的影响。方法用不同浓度(2.8、3.4、3.8、4.8、5.8、6.8 mg/mL)的WELTGY处理受精后72 h(72 hpf)的斑马鱼,处理24、48 h后,观察斑马鱼死亡率、畸形率和整体形态;显微镜下观察斑马鱼心脏形态并拍照,记录心率,使用ImagePro Plus 5.1测量斑马鱼静脉窦-动脉球(SV-BA)距离,评价WELTGY对斑马鱼心脏的影响;显微镜下观察拍照记录各组斑马鱼是否有眼水肿,判断WELTGY对斑马鱼肾脏的影响;用WELTGY处理肝脏标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg(LFABP:EGFP),荧光显微镜下拍照记录斑马鱼肝脏荧光情况,评价WELTGY对斑马鱼肝脏的影响。结果与对照组比较,2.8 mg/mL及以下浓度的WELTGY对斑马鱼的整体形态、心脏、肾脏和肝脏无明显影响;3.4 mg/mL以上浓度的WELTGY导致斑马鱼鱼鳔减小,对心脏、肝脏、肾脏无影响;4.8 mg/mL以上浓度的WELTGY导致斑马鱼心率显著降低(P<0.01),对心脏SV-BA距离、肾脏、肝脏荧光强度和荧光面积无明显影响。结论WELTGY毒性微弱,对斑马鱼幼鱼几乎没有毒性;高浓度下会导致轻微心脏毒性,在家禽养殖业的使用中有必要合理控制用量。