转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立

建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)设计奶牛内源性基因引物,根据外源基因人溶菌酶基因(human lysozyme,hLY)及标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明,建立的方法灵敏、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。

EIAV弱毒疫苗株和强毒株诱导的特异性体液免疫应答差别

目的:通过研究EIAV弱毒疫苗株和强毒株在诱导多种特异性抗体方面的差异,初步探讨特异性体液免疫应答在EIAV弱毒疫苗株保护性免疫中的作用。方法:试验马匹根据接种毒株分为疫苗组和强毒隐性感染组,应用ELISA方法对血清中病毒囊膜蛋白Env和衣壳蛋白P26结合抗体的滴度、亲和力及Env结合抗体的构象依赖性进行动态实相检测,同时采用细胞蚀斑染色和逆转录酶活性检测方法对中和抗体水平进行同期检测。结果:Env和P26结合抗体的滴度、亲和力、构象依赖性及中和抗体的中和活性均存在一个缓慢上升的过程。对于P26抗体滴度及Env抗体亲和力,疫苗组和强毒隐性感染组仅在病毒接种2个月内,表现为统计学差异(P<0.05)。疫苗组从接种后14d开始,Env抗体的构象依赖性高于强毒隐性感染组(P<0.05),并持续至最后一个监测点。最明显的是,疫苗组诱导产生具有中和强毒特性毒株(EIAVDLV34)和弱毒特性毒株(EIAVFDDV)活性的中和抗体均高于强毒隐性感染组(P<0.05)。结论:弱毒疫苗株和强毒株诱导机体产生结合抗体和中和抗体的时间、水平和性质均存在明显差异,其中中和抗体和构象依赖性抗体的差异,可能是EIAV弱毒疫苗诱导保护性免疫的主要因素之一。

转人乳铁蛋白基因奶牛多重PCR检测方法的研究

本研究旨在建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品出入境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因(mtDNA)设计奶牛内源基因引物,根据外源基因人乳铁蛋白基因(human lactoferrin,hLF)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。本方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。

转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立

建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。

肌肉生成抑制素基因敲除猪多重PCR检测方法的建立

[目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,MSTN)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持。[方法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2M)设计猪内源性基因引物,标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,NPTⅡ)和测定的边界序列设计特异性引物,对引物的量进行调整,优化反应条件。对PCR的敏感性和特异性进行检测,并应用建立的方法对随机选取的32份猪肺和脾脏组织样品进行检测,均仅扩增出B2M条带。[结果]该方法的最佳退火温度为56℃,最低能检测出含1%MSTN基因敲除基因组成分的样本,对32份组织样本仅扩增出B2M条带。[结论]建立的多重PCR方法敏感、特异,在一个反应中能检测多个基因片段,可用于MSTN基因敲除猪的检测,为此品系转基因动物检测标准的建立提供依据。

车集煤矿2407工作面底板注浆改造工程的优化设计

以车集煤矿2407综采工作面底板注浆改造为例,根据煤层底板裂隙发育、太原组上段灰岩水的原始导高距煤层较近这一特征,在设计注浆孔时,上下巷交替布置钻场,在改造底板薄层灰岩,变含水层为隔水层的同时,还有效的封堵了煤层底板浅层导水裂隙。为类似条件的矿井提供参考依据。

我国进出境动植物检疫体系科学技术储备及保障机制研究

通过分析比较国内外科学技术储备及保障机制发展现状,探讨中国特色的进出境动植物检疫体系运行保障措施,从加强科技知识设备和人才储备、加强组织保障、强化政策支持等方面提出科学技术储备及保障机制的相关建议。

克隆技术在养猪生产中的应用概况

克隆技术结合成熟的胚胎生物技术,为家畜的生产性能提高、品种改良和资源保护提供了新的途径,也为大量复制优秀种猪提供了可能。尽管体细胞核移植技术仍有需要完善之处,但许多科研机构和企业还是对克隆技术的发展充满了信心,并取得了一些突破。结合国内外在该领域的研究和开发现状,对克隆技术在养猪生产中的应用进行总结。

克隆公猪血液生化指标测定与比较分析

采用自动生化分析仪对克隆公猪在12月龄和18月龄时的32项血液生化指标进行测定和分析。结果表明,克隆公猪在12月龄和18月龄两个阶段仅有蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)和二氧化碳总量(TCO2)与对照组均显示出统计学差异,具体为:12月龄时的总蛋白(TP)、蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、肌酐(CREA)和二氧化碳总量(TCO2)的测定值与对照组差异显著(P<0.05);18月龄时的白蛋白(ALB)、蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)和铁(Fe)的测定值与对照组差异极显著(P<0.01),二氧化碳总量(TCO2)的测定值与对照组差异显著(P<0.05)。血液生化指标的测试结果说明,克隆公猪与普通种公猪在生理状态方面基本相似,而且在代谢和免疫水平上表现出更优的状态。

基于气相色谱-质谱联用技术的转人血清白蛋白水稻的代谢组学方法研究

为推动代谢组学研究,利用转人血清白蛋白水稻,对样品前处理、色谱柱选择、GC-MS的检测方法、谱图处理和数据分析等方面进行研究。结果显示:在提取液为水∶乙腈∶异丙醇=1∶1.5∶1.5的条件下,30℃衍生90min,作为样品前处理条件,选用DB-5MS色谱柱,采用保留时间锁定的数据采集方法,用AMDIS软件的保留时间分析模式对谱图解卷积,然后经过MPP软件进行主成分分析,建立了一套完整的代谢组学研究方法流程。

舞钢市土地使用权流转现状调查与分析

一、现状 伴随着农村经济的发展，舞钢市采取多种有效措施使农村的土地使用权流转工作也出现了快速流转的势头。截止到2008年6月底，全市不同形式的土地流转总面积达到2066．67hm^2，占全市总耕地面积的9．6％。参与流转农户达到8255户。占农户总数13名。全市共建成33．33hm^2以上规模土地流转示范方19个。目前舞钢市农村土地使用权流转主要有以下几种类型。

查办假劣兽药案件有关问题思考

兽药影响动物源性食品质量安全,加大兽药监督执法力度是保障兽药质量,确保动物源性食品安全的重要内容。基于《兽药管理条例》修订滞后及兽药严重违法行为从重处罚情形等新规定出台等因素,致使执法人员在法律适用、违法事实认定和证据收集、货值及违法所得认定等方面存有争议。本文提出了应修订《兽药管理条例》及自由裁量基准,对无证经营兽药案中兽药进行定性,根据检验报告认定假劣兽药适用法律依据,正确认定兽药违法所得及文书制作等相关思考,旨在为规范兽药监督执法行为,提升执法队伍依法行政水平提供参考。

舞钢市设施黄瓜病虫害适期防治技术

近几年来,舞钢市棚室黄瓜通过品种更新、标准化技术推广、基地化市场运作,产量、品质和规模都有极大的提高和发展。为了有效控制棚室黄瓜病虫害的发生,确保黄瓜安全高效生产,在研究、示范的基础上,提出了设施黄瓜病虫害适期防治技术。1设施黄瓜病害防治1.1培育壮苗选用抗病、耐病品种,做好种子处理,培育适龄壮苗。1.1.1因地制宜,选择品种一般选择适宜本地环境条件的优质、高产、抗逆性好、抗病性强、耐低温、早熟、连续结瓜、瓜条把短、刺密、颜色好、瓜长35~40cm、产量高、后期不歇秧的品种。

舞钢市农村沼气服务体系建设中存在的问题及建议

舞钢市自2006年建设农村沼气以来，坚持因地制宜分类指导、群众参与、稳步推进的原则，把确保沼气建设质量、提高沼气利用率、发挥沼气综合效益作为根本目标，积极推进专业化施工、物业化发展的建设模式，农村沼气建设取得了显著成效。截至2012年底，全市已累计建成农村户用沼气池1．2万座。户用沼气的建设不仅改善了农村生产生活条件，优化了农村用能结构，也促进了农业增效、农民增收和农业生态的良性循环，从而加快了新农村建设进程。

农村植保技术服务存在的问题及对策

一、存在的问题（一）缺乏农药使用知识1、盲目用药不分防治对象。见药就用，有的用药户看邻居打什么药，他就买什么药，不知其农药的作用、特点、毒性，更谈不上对农药理化性质的认识。因此，出现了把杀菌剂用来杀虫和防治生理性的病害，特别是在农药紧缺的情况下。此类情况尤为严重。有的人错误认为。是药就治病”，如把阿波罗、尼索朗、卡死克用来防治红蜘蛛成螨，结果越防越重。

舞钢市农村沼气建设现状调查与分析

当前。党中央、国务院把农村新能源建设作为全面建设小康社会，改善农村生活条件的。六小工程”之一，河南省舞钢市委、市政府把农村沼气建设列为。十大民心”之一。为了准确掌握农村沼气建设的现状，为政府提供较准确的决策依据，并确定今后农村沼气发展方向，舞钢市农村能源环境保护站深入全市4个乡镇9个行政村563户，对2010年底前已建成的沼气用户采取召开座谈会、发放调查问卷、深入沼气用户走访等方式进行了实地调查。

舞钢市莲藕高产栽培技术研究与探讨

近年来,舞钢市坚持工业兴市、农业富民,用抓工业理念谋化发展农业,大力调整农业结构,推进农业产业化经营.

建筑智能化施工管理现状及完善策略

随着建筑行业不断发展下,我国建筑智能化施工管理领域发展取得一些成就,但是在智能化施工管理实际应用和推广方面仍然存在诸多不足。因此,本文研究主要目的是探究出建筑智能化施工管理的完善策略,从阐述建筑智能化施工管理现状的角度着手,剖析当前建筑智能化施工管理存在的不足,并针对汇总出的内容,提出针对性的完善策略。

棉田甜菜夜蛾发生规律及防治对策

本文阐述了甜菜夜蛾在棉花上的为害症状以及甜菜夜蛾的发生特点、生活习性,并提出了有效的防治措施。

利用体细胞核移植技术生产优秀种公猪

为探讨体细胞核移植技术用于种公猪的实际生产,复制优秀种公猪的可行性,精选优秀种公猪作为供体,取其耳组织成纤维细胞作核供体,体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎,胚胎体外培养后进行移植。试验先后移植了3 437枚1～4细胞期克隆胚胎到18头受体母猪的输卵管内,28d经B超检测,有16头受体母猪妊娠(88.89%),11头妊娠足月(68.75%)分娩产下53头仔猪,体细胞克隆猪的生产效率为2.80%(出生仔猪/移植胚胎)。早期生长性状测定结果显示,0和7d时克隆猪的体质量和体尺与普通公猪无显著差异(P>0.05)。利用体细胞核移植技术生产克隆种公猪,可以延伸种公猪的利用时间和空间,放大优秀种猪的利用价值。