基于SSR分子标记的多花水仙资源遗传多样性分析

基于SSR分子标记技术,利用17对引物对21份多花水仙资源进行遗传多样性分析。结果表明,聚丙烯酰胺凝胶电泳共扩增出99条多态性条带,多态位点百分率为93.40%。Nei’s遗传多样性指数均值为0.2667,Shannon信息指数均值为0.4117。主成分分析和UPGMA聚类分析结果显示,供试的21个水仙种源分成四大类,中国水仙单复瓣种质都聚在Ⅰ类群,遗传多样性水平低,洋水仙(Grand Soleil d′Or、Ziva和Pearl)所在的类群(Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ)遗传相似系数在0.4~0.8之间,类群间亲缘关系较远。本研究为今后多花水仙传统育种结合生物技术育种提供理论依据。

龙柚芽变系的RAPD分析鉴定

利用100个10bp的随机引物对龙柚的4个芽变系的基因组DNA进行RAPD扩增分析,探讨芽变系遗传物质的变化.在这100个随机引物中,筛选出能在4个芽变系中扩增出稳定多态性片段的引物11个,一共扩增出了63条片段,其中多态性片段有19个,占30.16%.聚类分析的结果,芽变系2和4的遗传距离最小(0.1001),相似系数最大(0.9048).表明了芽变引起的遗传物质的改变能够通过无性繁殖的方式存在,用RAPD的方法来分析不同芽变系的遗传关系是可行的.

福建6种柚RAPD鉴定分析

以福建省栽培面积较广,果实成熟期不同的渡尾文旦柚、琯溪蜜柚、坪山柚、长泰文旦柚、龙柚、下河蜜柚6种柚为研究对象,用100个10bp的随机引物对6种柚的基因组DNA进行RAPD分析,筛选出能扩增出稳定多态性片段的引物31个,一共扩增出174条片段,其中多态性片段有137个,占78.74%.聚类分析的结果,RAPD标记所反映的6个品种之间的遗传相互关系与传统的分类结果是一致的.

下河蜜柚RAPD反应体系的建立

利用改良的CTAB方法从柚叶片中提取高质量的DNA。在参考一般RAPD反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合柚PCR扩增程序为:模板DNA15ng,随机引物3.3ng/ul,10*PCR buffer 1ul,dNTP 0.5ul,TaqDNA聚合酶0.25ul(1U),总体积10ul。95℃预热2min,94℃变性30s,35.1℃退火45s,72℃延伸45s,30个循环后72℃延伸8min。

针灸治疗周围性面瘫的临床研究进展

周围性面瘫（简称＂面瘫＂）亦称贝尔氏面瘫,是茎乳突孔内急性非化脓性炎症引起的周围性面神经麻痹。本病起病突然,可发生于任何年龄,多在春秋两季发病,常见发病诱因有受寒着凉等,绝大多数患者表现为一侧面神经麻痹,临床上常在晨起梳洗时发现患侧额纹消失,眼睑闭合不全,眼睑扩大,泪液外溢,鼻唇沟变浅,口角歪向健侧,不能做皱额、蹙眉、露齿、鼓腮、吹口哨等动作。

龙柚双引物RAPD分析方法初探

实验选取龙柚3个芽变系基因组DNA作为模板,在100个10bp单引物的基础上,筛选出8个能扩增出稳定、清晰的条带的RAPD引物,用于RAPD双引物的扩增,结果比单引物扩增反应产生出更多更清晰的条带,为龙柚遗传多样性等后续研究奠定基础。

几种常见方法提取番荔枝基因组DNA的比较

以番荔枝幼嫩叶片为材料,分别采用改良高盐低pH值法、改良的CTAB法、SDS法三种方法提取总DNA,通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法对三种提取方法进行综合比较。结果显示改良的CTAB法所得的DNA纯度和得率较高,SDS法最差。

改良CTAB法提取柚总DNA及叶片保存方法的研究

采用改良的CTAB方法提取龙柚新鲜叶片的总DNA,在提取过程中,采用不同的处理液进行预处理,提得的DNA产量高,纯度好,降解少,可用于PCR扩增,能满足相关的分子生物学研究要求。同时,尝试用饱和NaCl-CTAB保存液来保存新鲜叶片,并对分别保存7天、14天、21天、28天的叶片进行总DNA提取,实验结果表明:保存7天的叶片总DNA提取效果最佳。

用PCR技术从金定鸭卵巢cDNA库克隆新基因

本文以3月龄金定鸭(Anas platyrhynchos domesticus)的卵巢组织样为材料,采用SMART(switching mechanism at 5 end of RNA transcript,SMART)技术,合成了金定鸭卵巢组织样的基因组双链cDNA.在此基础上,通过再扩增、产物纯化、T载体连接转化和克隆测序等过程,从金定鸭卵巢cDNA库克隆了基因.克隆基因746bp的cDNA,包含453 bp的阅读框(包括终止密码子),编码150个氨基酸残基.同源性分析和典型模体分析,没有发现与之高度同源的序列.氨基酸序列保守结构域分析发现3个典型的序列保守结构域区间,但与目标结构域的同源性概率不高,因而这个基因的功能作用还有待于进一步的研究.

一个与鸭繁殖性能相关卵巢差异表达基因的分离分析

本文用mRNA差异表达显示技术,分离分析了繁殖准备期金定鸭(Anas platyrhynchos domesticus)和绿头野鸭(Anas platyrhynchos)卵巢差异表达基因.通过卵巢组织RNA提取、反转录、mRNA差异显示PCR扩增、PAGE和银染检测扩增产物、差异带回收纯化、T载体连接转化和克隆测序分析,获得一个可能与鸭繁殖性能有关的卵巢差异表达基因片段,片段大小882bp.同源性分析表明,其序列与发情期羊卵巢cDNA(同源性为96%)、褐家鼠睾丸cDNA(同源性为83%)有很高的同源性.基因家族摸体分析表明,该序列的部分片段分别与Sox-5基因、转录因子USF基因、性别决定因子SRY、Cdx A基因都有90%以上的同源性典型摸体.由上述分析,我们推测该cDNA片段与鸭繁殖性状有关.

台湾麻豆文旦RAPD反应条件的优化

在参考一般RAPD反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合台湾麻豆文旦基因组DNA的RAPD扩增程序为(总体积10 ul):模板DNA5 ng,随机引物33 ng,dNTP 1.5 ul,10×PCR buffer 1 ul,MgCl22.0 mmol/L,Taq酶1U。95℃预热2 min,94℃变性30 s,38.7℃退火45 s,72℃延伸45 s,30个cycle后72℃延伸8 min。

斯坦福大学生物交叉学科项目的研究生培养模式——对医学专业研究生交叉培养的思考

工业的发展和知识大爆发推动形成了现在界限分明的学科分类,对高等教育产生了深远影响。随着当今时代科技的进一步发展以及所面临科学问题的复杂性,突破单一学科壁垒走向跨学科融合成为了越来越重要的发展趋势。培养具有跨学科背景的复合型人才,也成为了世界高等教育的共同发展方向。2020年9月教育部、发改委、财政部联合发布了《关于加快新时代研究生教育改革发展的意见》,明确提出要促进交叉学科发展,培养关键领域核心技术高层次人才。

柚基因组DNA提取方法的研究

以下河蜜柚的幼嫩叶片为材料,采用CTAB法、SDS法和SDS-CTAB法3种不同的DNA提取方法提取其基因组DNA,用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。分析结果表明,无论从得率还是DNA质量上看,SDS-CTAB法明显优于其它两种方法。

原位凝聚法制备聚电解质微胶囊--模板中掺杂聚电解质量对微胶囊结构与性能的影响

通过在CaCO3制备过程中加入不同浓度聚苯乙烯磺酸钠(PSS)的方法来控制掺杂进CaCO3粒子中的PSS含量,得到了PSS掺杂量为4%～11%,尺寸均匀的CaCO3球形微粒.在微粒表面仅吸附一层聚烯丙基胺盐酸盐(PAH)后,用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)使碳酸钙溶解;释放出的PSS与PAH原位凝聚制备得到了分散良好且完整的聚电解质复合物微胶囊.在所研究的范围内,模板微粒中PSS的含量对微胶囊的形态结构和性能没有明显影响.与传统的层层组装微胶囊相比,聚电解质复合物微胶囊有较好的热稳定性,但在高盐浓度下尺寸收缩程度较大.由于和层层组装微胶囊相比缺乏结合紧密的有序结构,原位凝聚法制备的微胶囊囊壁的截留分子量较大.

模拟酸雨对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响

【目的】探讨酸雨胁迫对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响。【方法】以p H值5.6为对照,采用p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨对1 a(年)生‘琯溪蜜柚’进行胁迫,研究酸雨对蜜柚叶片氧化伤害、抗氧化酶系统、气体交换参数和叶片结构的影响。【结果】p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨胁迫处理3个月,没有造成叶片可见伤害,叶片上表皮细胞排列整齐紧密,但p H 2.5模拟酸雨胁迫处理显著降低了叶肉中栅栏组织发育;p H 2.5模拟酸雨胁迫处理1 d后,叶片SOD和CAT活性的升高减少O2-和H2O2的积累,降低过氧化伤害,p H 2.5模拟酸雨胁迫处理3 d之后引起叶片膜脂过氧化;p H 4.5模拟酸雨胁迫处理6 d后虽然3种抗氧化系统酶活性显著高于对照,但不足以清除酸雨胁迫引起的活性氧,引起膜脂过氧化;模拟酸雨胁迫处理初期,2种处理均显著抑制光合速率,酸雨处理90 d后,p H 2.5酸雨显著抑制‘琯溪蜜柚’叶片光合速率,推测是由于氧化胁迫、栅栏组织发育等非气孔调节因素引起的,p H 4.5酸雨处理下叶片具有较强自我修复能力,其光合速率没有受到显著抑制。【结论】‘琯溪蜜柚’具有较强的酸雨抗性,p H 4.5中度酸雨胁迫对植株生长影响不显著,p H 2.5重度酸雨胁迫显著抑制叶片光合作用。

平和典型蜜柚果园土壤铜分布及与果树铜累积关系

对福建省漳州市平和县琯溪蜜柚13个典型果园土壤剖面样品铜含量进行研究,结果表明平和蜜柚典型果园土壤上层铜全量空间变异性较强,变异程度高于中层和下层铜全量;土壤上层铜全量平均值高于土壤中层和下层,分别为35.28、15.60和13.85mg·kg^(-1);土壤上层铜全量平均值高于福建省土壤平均背景值(21.6mg·kg^(-1)),23.1%样地果园土壤铜全量超过《土壤环境质量标准》二级标准(50mg·kg^(-1))。大多果园土壤剖面铜赋存形态主要是残渣态,而在含量较高的样地,上层土壤残渣态铜比例明显低于中层和下层土壤。土壤铜全量对铜形态分布影响最大,全量越高,活性最高的弱酸可提取态越高。土壤3个剖面铜全量与叶片和枝条铜含量均显著正相关,各剖面土壤弱酸可提取态铜含量与叶片和枝条铜含量间亦呈现显著正相关关系。由此表明平和蜜柚果园土壤铜上层出现富集,部分果园铜污染严重,应引起足够重视。

中国水仙SRAP-PCR反应体系的建立及应用

中国水仙Narcissus tazetta var.chinensis为多年生球根花卉,主要栽培品种有‘金盏银台’和‘玉玲珑’。通过正交试验建立适合中国水仙的SRAP-PCR体系:dNTPs 0.1 mmol/L,模板DNA 80 ng,Mg2+1.875 mmol/L,引物各0.15 mmol/L,Taq pol 2.5 U。100对引物对中有20对引物扩增出35条多态性条带,多态性比率为16.06%。二者亲缘关系分析结果遗传距离为0.185,遗传相似系数为0.835。说明SRAP分子标记技术可以用于近缘种的遗传关系分析。

765-80t门机电气线路的改进

765—80t门机是应用广泛的大型安装起重机。但在使用中,重载(我厂约在50-60t左右)起升时,经常吊不动。驾驶员按常规0.8秒一档力口速将手柄拉至3、4加速档,想切除加速电阻提高起动力矩,但加速接触器不动作,加速电阻无法切除,重载仍然起吊不动。此时,只能将手柄回零。

模拟酸雨对琯溪蜜柚土壤微生物和酶活性的影响

为探讨酸雨对琯溪蜜柚土壤微生物和酶活性的影响,以琯溪蜜柚根际和非根际土壤为材料,采用对照(pH 5.6)、轻度酸雨(pH 4.5)、中度酸雨(pH 3.5)和重度酸雨(pH 2.5)4种处理,测定长时间(90d)处理后土壤三大类群微生物和土壤酶活性变化.结果表明:3种强度酸雨处理对根际和非根际土壤细菌的抑制效果有统计学意义(P<0.05),随着酸雨强度增加,抑制程度也增加;pH 4.5酸雨对根际真菌数量的影响没有统计学意义(P>0.05),而促进非根际土壤真菌生长,中度酸雨(pH 3.5)和重度酸雨(pH 2.5)胁迫对根际和非根际真菌数量抑制效果有统计学意义(P<0.05);pH 4.5处理对根际土壤放线菌数量的抑制效果没有统计学意义(P>0.05),而对非根际土壤放线菌的抑制效果有统计学意义(P<0.05),中重度酸雨胁迫显著抑制根际和非根际土壤放线菌数量;由于根系活动影响,酸雨对非根际土壤微生物影响与根际相比更为明显;根际和非根际土壤蔗糖酶活性随酸雨强度增加而逐渐降低;酸雨处理对根际土壤脲酶活性的抑制有统计学意义(P<0.05);高强度酸雨对琯溪蜜柚根际和非根际土壤多酚氧化酶活性的抑制有统计学意义(P<0.05).由此可知,酸雨对土壤微生物和土壤酶活性影响较为复杂,与胁迫强度、根际效应和微生物种类有关,重度酸雨对微生物和土壤酶活性抑制效应最为显著.

用于软骨修复的水凝胶

在软骨组织修复与再生中,水凝胶支架能够为细胞的增殖与分化提供更接近于天然软骨细胞外基质的微环境,是软骨组织修复的一种理想材料。除了在软骨修复中得到广泛应用的传统水凝胶外,本文还介绍了近年发展起来的一些具有新结构和新性能的水凝胶,包括高强度水凝胶以及结构中包含功能蛋白和多肽的水凝胶。重点介绍了对温度、pH值及对生物分子产生响应的刺激响应型水凝胶和自组装水凝胶。具有α-螺旋结构和自组装水凝胶通过两个或多个卷曲螺旋结构聚集形成水凝胶,而通过多肽自组装形成的具有纤维结构的水凝胶在微观的结构上更接近软骨细胞外基质。此外,DNA的分子和序列也用来设计基于DNA的新型水凝胶。本文最后介绍了能在力学、生物学和可注射性等多方面更好地满足软骨修复需要的复合型水凝胶支架、干细胞与水凝胶的复合以及生长因子、基因和一些力学刺激对软骨再生的促进作用。