不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法建立小鼠焦虑模型及比较

目的通过比较不确定性空瓶饮水刺激法和束缚应激法诱发小鼠产生焦虑样情绪,筛选一种重复性好、刺激性小且易于操作的方法建立小鼠焦虑模型,为寻找合适的抗焦虑药物的药效学评价模型提供实验依据。方法 SPF级雄性C57BL/6J小鼠采用不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型,实验分为自由饮水组、定时饮水组、生理应激组和空瓶刺激组,每组8只。自由饮水组小鼠全天自由进食饮水;定时饮水组小鼠每天固定2个时间点、间隔12 h,每次饮水10 min;在相同的时间点,生理应激组小鼠每天确保1次饮水10 min,另一次既不给水也不给空瓶;空瓶刺激组小鼠每天饮水时间随机给予1次或2次空瓶进行刺激,共计饮水12次,空瓶16次;实验持续14 d。采用束缚应激法建立小鼠焦虑模型,实验分为正常对照组和束缚应激组,每组8只。正常对照组小鼠正常饲养,束缚应激组小鼠于每天早上9∶00头朝离心管的底部束缚在管内,第1天束缚2 h,随后每天束缚时间延长2 h,直至每天8 h,连续21 d。小鼠在空瓶刺激7和14 d后或束缚应激7,14和21 d后观察体质量的变化。造模结束后,通过旷场实验检测小鼠自主活动和探索行为,高架十字迷宫实验检测小鼠进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间;采用ELISA测定束缚应激21 d后小鼠血浆皮质酮(CORT)水平和海马组织中5-羟色胺(5-HT)含量。结果不确定性空瓶饮水刺激法:与自由饮水组相比,定时饮水组小鼠在开放臂内停留时间显著下降(P<0.05);与定时饮水组相比,空瓶刺激7 d后,小鼠体质量显著下降(P<0.05),其他各项行为学指标无明显变化。束缚应激法:与正常对照组相比,束缚应激14 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),小鼠的自主活动和探索行为无明显变化,进入开放臂的次数和在开放臂内停留时间均显著下降(P<0.05);束缚应激21 d后,小鼠体质量显著降低(P<0.05),血浆CORT含量和海马组织中5-HT含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论不确定性空瓶饮水刺激法建立小鼠焦虑模型的稳定性和敏感性欠佳,不可控因素较多,刺激14 d未成功建立小鼠焦虑模型。束缚应激14 d可成功建立小鼠焦虑模型,其机制可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱和5-HT代谢异常相关。

钩藤源活性化合物297和315对慢性不可预知温和应激模型小鼠的影响

目的考察钩藤源活性化合物297和315对慢性不可预知温和应激(CUMS)小鼠的影响。方法应用雄性C57BL/6J小鼠,采用CUMS造模,20 mg·kg^-1的297和315分别伴随灌胃给药28 d;采用糖水消耗实验评价小鼠的抑郁样行为,采用高架十字迷宫实验评价小鼠的焦虑样行为,采用水迷宫实验评价小鼠的认知功能。结果CUMS小鼠与正常小鼠相比,在高架十字迷宫实验中进入开臂时间及次数显著降低(P<0.01),在糖水消耗实验中糖水偏好指数显著降低(P<0.01),在水迷宫实验中进入目标象限的潜伏期显著延长(P<0.05);而化合物297可显著增加CUMS小鼠进入开臂时间及次数(P<0.05)和CUMS小鼠的糖水偏好指数(P<0.05),同时显著缩短CUMS小鼠进入目标象限潜伏期(P<0.05);化合物315对CUMS小鼠焦虑、抑郁样行为和空间学习记忆功能均无显著改善作用。结论CUMS可造成小鼠的焦虑和抑郁样行为,同时损伤小鼠的空间学习记忆功能;化合物297可显著改善CUMS小鼠的焦虑和抑郁样行为,同时可改善CUMS小鼠的空间学习记忆功能,提示化合物297可能具有抗应激作用。

六味地黄苷糖对睡眠剥夺小鼠所致焦虑抑郁样行为的作用及其机制研究

目的观察六味地黄苷糖(LW-AFC)对睡眠剥夺小鼠所致焦虑抑郁样行为的作用及其机制。方法雄性C57小鼠依据小鼠体质量和自主活动性随机分为正常对照组、睡眠剥夺模型组、LW-AFC 0.8 g/kg、1.6 g/kg和3.2 g/kg组。应用72 h多平台水环境法建立失眠动物模型。给药组预防给药7 d后进行睡眠剥夺72 h,同时给予LW-AFC至建模后第14天。采用旷场实验评价小鼠的焦虑样行为,采用悬尾和强迫游泳实验评价小鼠的抑郁样行为,应用液相芯片分析技术检测小鼠海马组织中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α以及抗炎因子IL-4的含量。采用Pearson相关性分析LW-AFC对睡眠剥夺小鼠细胞因子的影响与焦虑抑郁样行为的相关性。采用Western印迹法检测小鼠海马星形胶质细胞激活标志物胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的变化。结果与正常对照组相比,睡眠剥夺模型组小鼠在旷场中央的探索时间显著缩短(P<0.05),悬尾和强迫游泳的不动时间显著延长(P<0.05),小鼠海马组织中GFAP表达显著升高(P<0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著增加(P<0.01),IL-4含量显著降低(P<0.01);与睡眠剥夺模型组相比,LW-AFC 1.6和3.2 g/kg组小鼠旷场实验的中央探索时间显著延长(P<0.05),GFAP表达量显著降低(P<0.05)。LW-AFC 3个剂量组小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间显著缩短(P<0.05,P<0.01),海马组织中IL-1β和IL-6含量均显著降低(P<0.05,P<0.01);LW-AFC 1.6和3.2 g/kg组小鼠海马组织中TNF-α含量均显著降低(P<0.01),IL-4含量显著增加(P<0.05,P<0.01)。Pearson相关性分析结果提示,LW-AFC改善小鼠的焦虑抑郁样行为与促炎细胞因子(IL-1β、TNF-α)密切相关(P<0.05,P<0.01)。结论 LW-AFC能改善睡眠剥夺导致的小鼠焦虑和抑郁样行为改变,其机制可能与其调节细胞因子的失衡以及抑制星形胶质细胞活化有关。

天下第一庄

我们这个班,堪称"天下第一庄",什么"天下第一恶人","天下第一笑神","天下第一书迷","天下第一……"等各类高人均汇聚于此。"天下第一恶人"要说到"天下第一恶人",这个桂冠非她莫属——卫生委员熊文英。开学第一天,不少人就领教过她的泼辣。卷起袖子,一句"老虎不发威,你当我是病猫"脱口而出,