天然药物五倍子与氟化钠对釉质脱矿的影响比较研究

目的 :比较天然药物五倍子和化学制剂氟化钠对釉质脱矿的影响 ,为天然防龋药物的开发提供理论依据。方法 :利用连续培养系统建立牙齿龋病模型 ,经五倍子和氟化钠处理后 ,利用偏光显微镜和扫描电镜观察比较二者对牛牙釉质龋形成的影响。结果 :偏光显微镜和扫描电镜观察发现 :五倍子和氟化钠都能抑制釉质早期龋的形成 ,表现为釉质表面的破坏程度较轻 ,釉质表层连续完整 ,并在表层脱矿区观察到有再矿化区域的存在。但本实验浓度下五倍子的功效弱于氟化钠。结论 :在龋病模型中 ,本实验浓度的五倍子能够有效抑制釉质早期龋的形成 ,提示五倍子是一种具有防龋效果的天然药物。

五倍子对牙根面脱矿影响的研究

目的:评估五倍子的矿化调节作用,了解五倍子防根龋的药理机制。方法:在pH循环模型中测试五倍子的防龋效能。以4g.L-1五倍子为模型药物,1g.L-1氟化钠和去离子水为对照,制备人根部牙体组织块,暴露于由药物处理液、酸性缓冲液、中性缓冲液组成的pH循环模型中,循环12次,每天2次。循环结束后,采用原子吸收光谱检测酸性脱矿液钙释出量,采用激光共聚焦显微镜分析脱矿效果。结果:五倍子组钙释出率降低、荧光总量减少,表明五倍子具有抑制根面牙体组织脱矿的作用,作用虽然弱于氟化物,但是差异无统计学意义。结论:在化学条件下五倍子具有抑制根部组织脱矿的作用,再次显示了五倍子具有阻止龋病发生的作用。

口腔生物膜动态研究模型的建立和应用评价

目的:模拟口腔菌斑生态环境,建立能够对生物膜形成过程连续观察的动态研究模型。方法:自制发酵罐和多出口连续培养室。以变形链球菌、血链球菌、乳酸杆菌、内氏放线菌为实验菌株,将羟磷灰石片、玻片等置于连续培养室中,通过调节温度、氧分压、pH值、清除率、循环流速及代谢底物等参数建立模型。以25mM蔗糖和蒸馏水进行系统测试。观察系统中实验菌CFU计数、pH动态变化等各项反应及不同环境下所形成生物膜的微结构变化。所得数据采用SPSS10.0软件包进行统计学分析,选用单因素方差分析的Dunnet t双侧检验,在α=0.05的情况下比较蔗糖加入组与对照组之间的差异。结果:随着蔗糖的给予,连续培养室中pH表现出相似于天然口腔的致龋环境,蒸馏水组pH值始终维持在7.5左右。而蔗糖组pH值呈明显的周期性波动,最低在4.5以下,但4～5h后,其pH值仍能逐步恢复到6.5左右。观察到细菌计数、生物膜形态的时间依赖性。随着处理液的加入,2组生物膜的活菌计数均明显增加,约72h趋于稳定。对120h生物膜,蔗糖组变形链球菌、乳酸杆菌的细菌计数显著高于蒸馏水组(P<0.05);蔗糖组变形链球菌计数最高,而蒸馏水组血链球菌计数最高。荧光显微镜观察发现,蔗糖组大量的胞外多糖基质和细菌成团、成片分布;蒸馏水组虽然也存在细菌和基质增多的时间依赖性,但膜细菌基质团块仍清晰可见。结论:本研究建立的体外模型能稳定控制有关参数,各观察指标均具有良好的重复性。模型的建立,实现了生物膜形成过程的动态观察。

非免疫性唾液凝集素的研究进展

唾液中存在有许多物质可以凝集细菌,其中包括了非免疫性唾液凝集素,在口腔细菌的选择性清除与定植中起了重要的作用,近年来,对非免疫性凝集素的分子结构、在涎腺中的分布、生物学作用进行了较为深入的研究,本文就此进行综述。

层次分析法用于中药防龋药效综合评价的多指标权重研究

龋病，是人类最常见的口腔疾病。由于其危害的严重性，世界卫生组织已经将龋病列为人类重点防治的3大非传染性疾病。国内外学者研究发现，某些中药具有多重作用机制，不仅能够抑制致龋菌生长及致龋相关毒力因子，也具有抑制牙齿脱矿和促进再矿化的作用。作者依据中药防龋作用的机制，设计了中药防龋药效综合评价的多指标体系，并采用层次分析法确定了药效评价体系中各指标的权重。

中药影响变形链球菌对唾液获得性膜粘附的研究

目的 研究不同传统中药提取物对变形链球菌在唾液获得性膜粘附的影响 ,进一步探讨中药防龋的可能机制。方法 采用唾液包被羟磷灰石 (S- HA )形成实验性获得性膜的体外模式 ,以变形链球菌作为试验菌株 ,用不同的药物提取物分别处理 S- HA和菌细胞 ,观察细菌对 S- HA的粘附情况。结果 两组试验中大部分试验药物均能抑制菌细胞对 S- HA的粘附 ,且随药物浓度的升高而逐渐增强。这些药物中 ,以五倍子的抑制作用表现更为显著 ,其在 1、2、4 mg/ ml时的抑制率可达 10 0 %。

五倍子不同组分对口腔细菌生物膜的清除效应

目的:研究五倍子不同提取组分对5种主要与致龋密切相关的生物膜细菌生长抑制及清除的作用,为临床试验提供药物作用的浓度范围。方法:选择与龋病发生密切相关的5种口腔细菌,五倍子不同提取组分为五倍子多酚性化合物(GCE)、五倍子B(GCE-B,300ml/L乙醇提取物1.80g/L)、五倍子C(GCE-C,500ml/L丙酮提取物4.67g/L)、五倍子D(GCE-D,1000ml/L丙酮提取物0.80g/L)、没食子酸、没食子酸甲酯。扫描电镜观察观察口腔细菌在MBECTM-Device上形成细菌生物膜的能力和形成情况;测定五倍子不同组分对5种口腔细菌的最小抑菌浓度MIC(minimalinhibitoryconcentration)和对5种细菌生物膜的最小生物膜清除浓度(minimalbiofilmeradicationconcentration,MBEC)。结果:在MBECTM-Device提供的桩钉表面上口腔细菌能形成良好的生物膜结构,不同时段取出的样本可以观察到细菌从定植黏附到生物膜形成以及成熟生物膜结构。五倍子不同提取组分对5种口腔浮游细菌均有良好的抑制作用。五倍子多酚性化合物、五倍子B对5种口腔生物膜细菌抑制作用的效果最好,其次为五倍子C和五倍子D,没食子酸和没食子酸甲酯对口腔生物膜细菌的抑制作用较差。五倍子不同提取组分对5种口腔细菌生物膜的MBEC是MIC的2～16倍左右。结论:中药五倍子不同提取组分中五倍子多酚性化合物和五倍子B对口腔生物膜细菌有很好的抑制和清除效应,MBEC比MIC能更客观的反映药物作用的浓度范围。

口腔多菌种生物膜对防龋中药敏感性的实验研究

目的采用MBECTM-Device研究防龋中药五倍子多酚性化合物(GCE)、五倍子B(GCE-B)、蜂房95%组分(NVE1)对多菌种生物膜细菌的生长抑制作用,建立防龋中药药效学的药物敏感实验方法,为临床实验提供客观的药物作用的浓度范围。方法选择与龋病发生密切相关的4种口腔细菌形成多菌种生物膜,药物为GCE、GCE-B、NVE1,扫描电镜观察口腔细菌在MBECTM-Device上形成细菌生物膜的能力和形成情况;采用MBECTM-HTP-Assay测定药物对口腔细菌的最小抑菌浓度(MIC)和对细菌生物膜的最小生物膜清除浓度(MBEC)。结果在MBECTM-Device提供的桩钉表面上口腔细菌能形成良好的生物膜结构,从不同时段取出的样本可以观察到细菌从定植粘附到生物膜形成以及生物膜成熟结构。GCE、GCE-B、NVE1对口腔细菌均有良好的抑制作用。GCE、GCE-B对口腔生物膜细菌有很好的抑制作用,但是NVE1对口腔生物膜细菌的抑制作用较差。药物对口腔生物膜细菌的MBEC是MIC的2～16倍。结论中药五倍子多酚性化合物和五倍子B对口腔生物膜细菌有很好的抑制和清除效应,MBEC比MIC能更客观地反映药物作用的浓度范围。

不同清洗方式对义齿白色假丝酵母菌生物膜清除效果的影响

目的比较不同清洁方式对义齿白色假丝酵母菌生物膜的清除能力。方法制作并消毒树脂片,在其表面培养白色假丝酵母菌生物膜,分别以化学(浸泡)、机械(刷洗)和复合(浸泡与刷洗并用)等方式处理覆有白色假丝酵母菌生物膜的树脂片,再将其浸入新鲜培养液进行残留生物膜的恢复培养,分别在0、6、24h后利用菌落计数进行效果评价。结果机械清除效果与牙膏种类密切相关,单纯的化学处理没有明显的清除作用,保丽净义齿清洁片复合处理清除白色假丝酵母菌生物膜的效果最佳,其处理后的树脂片培养24h仍未检出白色假丝酵母菌。结论不同的义齿清洗方法对附着在义齿表面的白色假丝酵母菌生物膜的清除能力有差异。其中,以保丽净义齿清洁片复合效果最好且能够持续地发挥抑菌作用。

唾液污染对自酸蚀粘结剂树脂充填后边缘微渗漏的影响

目的通过对人离体前磨牙复合树脂充填体的边缘微渗漏研究,探讨在粘结过程中唾液污染对牙齿和光固化型复合树脂之间密合度的影响。方法将88颗人离体前磨牙备洞后用光固化复合树脂充填,根据充填过程中是否受唾液污染及污染后不同的处理方法分为4组,A组未受唾液污染;B组处理后受唾液污染并立即清水冲洗干净再涂粘结剂;C组处理后受唾液污染仅以气枪吹干再涂粘结剂;D组处理粘结后受唾液污染。用染色法对4组充填后的牙齿进行染色,剖开后测量充填体边缘染色线长度,并进行统计学分析。结果①边缘微渗漏深度测量,A组染色线为0·038±0·08mm,B组为0·126±0·19mm、C组为1·471±0·77mm、D组为1·761±0·46mm,B、C、D组充填体边缘微渗漏均高于A组,分别与A组比较,经F检验,B组与A组相比无显著差异(P>0·05),C、D组与A组之间有显著性差异(P<0·05)。②边缘微渗漏分级法统计,经秩和检验,B组与A组差异无统计学意义(P>0·05);C、D组与A组差异有统计学意义(P<0·05)。结论在窝洞涂粘结剂之前受唾液污染并用水冲洗对自酸蚀粘结效果影响不明显,如果处理后受唾液污染仅以气枪吹干再涂粘结剂或者在粘结后受唾液污染则对粘结效果有明显影响。

五倍子与氟化钠对人工口腔生物膜细菌生长代谢的影响

目的探讨天然药物五倍子替代氟化物防龋的可能性.方法以变形链球菌、血液链球菌、唾液链球菌和内氏放线菌为实验菌株,建立细菌生物膜模型.经五倍子和氟化钠作用后,通过对羟磷灰石片(HA)表面细菌计数,连续pH监测,生物膜超微结构观察,比较2种药物对生物膜细菌生长、产酸和生物膜表面形态的影响.结果五倍子和氟化钠对生物膜中实验细菌的生长均有不同程度的抑制作用.五倍子和氟化钠均能抑制实验细菌产酸,减少pH的下降,使终末pH值高于临界pH值,但五倍子的作用弱于氟化钠.扫描电镜下五倍子组和氟化钠组HA表面均能形成典型的生物膜,细菌间界限清晰,细胞外基质形成减少,两组间差异无统计学意义.结论天然药物五倍子能够有效抑制口腔生物膜细菌的生长代谢,其防龋效果可以肯定,值得进一步的研究开发.

不同培养条件对口腔细菌生物膜生长的影响

目的：研究5种口腔细菌在体外形成生物膜的能力、形成过程及不同培养条件对生物膜形成的影响，并通过激光共聚焦扫描显微镜（CISM）观察细菌生物膜的形成及结构特征。方法：选择与龋病发生关系密切的5种口腔细菌，分别接种在含牛心脑浸液培养基（BHI）、人工唾液（BM5）以及人唾液培养基的标准96孔板中，在培养6h、8h、12h、24h、36h、48h和60h后取出相应的微孔板，11％Crystal Violet染色生物膜，95％乙醇复吸Crystal Violet，HTS7000PLUS多孔板高效分析仪测定各时段细菌生物膜的生长情况，并绘制生长曲线。CLSM观察细菌生物膜形成的结构变化。结果：在BHI及BM5中5种口腔细菌均能形成生物膜，在人唾液中没有形成生物膜。细菌生物膜形成表现为缓慢的非线性生长，出现了一个相对的生长停滞期，这个时期出现在36～48h之间，不同细菌略有差别。激光共聚焦扫描显微镜（asM）观察发现在培养6h后仅有少量细菌粘附形成散在微菌落，24h后出现生物膜的基本结构，48h形成成熟的生物膜。结论：研究发现在体外细菌形成生物膜的能力与培养基条件密切相关，细菌生物膜形成缓慢，其间有一个相对生长停滞期。细菌定植，粘附，共集聚是生物膜形成的重要步骤。