阴虚肠燥证便秘大鼠模型的建立及其评价

目的采用“汗下复合法”复制阴虚肠燥证便秘大鼠模型,并从动物宏观表征、微观指征两个方面进行疾病模型和“以方测证”证候模型评价,为阴虚肠燥证便秘大鼠模型研究提供实验依据。方法筛选80只大鼠随机分为空白组、模型组、模型对照组、气虚方证组、血虚方证组、阴虚方证组、阳虚方证组、热秘方证组,每组10只。模型组和5个方证组大鼠采用汗下复合法(毛果芸香碱注射+大黄酸灌胃),模型对照组采用洛哌丁胺灌胃,连续造模14天。造模结束后,各方证组采用相应经典方剂进行干预治疗,即气虚方证组-黄芪汤、血虚方证组-润肠丸、阴虚方证组-增液汤、阳虚方证组-济川煎、热秘方证组-麻子仁丸,持续治疗4天。观察大鼠一般情况、24 h粪便颗粒数、5 h粪便含水量、结肠内粪便颗粒数、结肠黏液分泌变化,采用ELISA法检测血清VIP含量、比色法检测血清NO含量、免疫组织化学法检测结肠AQP3、AQP8表达。结果(1)疾病模型评价:模型组大鼠的被毛稀疏湿润,耳、鼻、唇、尾光泽暗淡,造模前期粪便稀溏而后期干硬,5 h粪便含水量、24 h粪便颗粒数明显低于空白组和模型对照组(P<0.05),结肠内粪便颗粒数明显高于空白组和模型对照组(P<0.01)。在微观指征方面,模型组大鼠的结肠组织杯状细胞数和阳性细胞表达面积都明显低于空白组和模型对照组(P<0.01),血清神经递质(NO、VIP)含量、结肠水通道蛋白(AQP3、AQP8)表达明显高于空白组(P<0.05);(2)证候模型的“以方测证”评价:阴虚方证组对5 h粪便含水量、24 h粪便颗粒数、肠内粪便颗粒数、结肠组织杯状细胞数和阳性细胞表达面积、血清神经递质(NO、VIP)含量、结肠水通道蛋白(AQP3、AQP8)表达的整体干预效果优于其它方证组。结论持续14天毛果芸香碱注射复合大黄酸灌胃的“汗下复合法”造模方法可以建立便秘阴虚肠燥证大鼠模型。