重组人生长激素对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制

目的探讨重组人生长激素(rhGH)对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制。方法以无血清培养液诱导肝癌细胞MHCC-97H凋亡,再以浓度为0μg/L(GH0组)、5μg/L(GH5组)、25μg/L(GH25组)、50μg/L(GH50组)、100μg/L(GH100组)和500μg/L(GH500组)的rhGH完全培养液进行培养,MTT法观察MHCC-97H细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期和细胞增殖指数,RT-PCR和Western blotting法分别检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达情况。结果与GH0组比较,GH25组、GH50组、GH100组和GH500组MHCC-97H细胞增殖明显,S期细胞百分比和细胞增殖指数显著增加(P<0.05);GH25组、GH50组和GH100组细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论 rhGH体外显著促进肝癌细胞MHCC-97H增殖,并通过调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达来抑制无血清培养液诱导的细胞凋亡。

构建RNA干扰真核表达载体抑制肝癌细胞IGF1R表达的研究

目的构建胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)RNA干扰真核表达载体,探讨人肝癌细胞株MHCC-97H在IGF1R基因抑制前后黏附和侵袭能力的变化及相关信号分子的变化。方法以pGCsi-U6-Neo-GFP为空白质粒载体,以IGF1R为靶基因,按GeneBank IGF1R基因核苷酸序列和Tusch1设计原则,选择5对2条互补的带发夹结构的核苷酸序列,连接到pGCsi-U6-Neo-GFP空载体中。转化大肠杆菌Stable3,扩增后提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。转染模型细胞(293T),进行RT-PCR及Westernblotting检测,筛选出沉默效果最好的质粒载体。用脂质体转染MHCC-97H肝癌细胞,G418筛选并建立IGF1R基因沉默的MHCC-97H肝癌细胞株。检测MHCC-97H细胞株黏附和侵袭能力及FAK蛋白的表达变化。结果构建的IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA,经酶切和DNA测序证实与设计完全一致;RT-PCR及Western blotting检测发现IGF1R沉默效率达88%。MHCC-97H细胞IGF1R被沉默后黏附和侵袭能力下降,FAK蛋白表达下降。结论IGF1R pGCsi-U6-Neo-GFP shRNA能够降低MHCC-97H细胞黏附和侵袭能力并抑制FAK蛋白的表达。

重组人生长激素对裸鼠肝癌移植瘤生长转移的实验研究

目的:研究重组人生长激素(recombinant hunman growth hormone,rhGH)对裸鼠肝癌移植瘤生长和转移能力的影响及相关信号转导通路的变化。方法:通过RNA干扰技术抑制MHCC-97H肝癌细胞中胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)的表达。建立裸鼠皮下和原位肝癌移植模型;研究IGF-1R基因沉默前后,rhGH对裸鼠肝癌移植瘤成瘤、生长和转移的影响,并用Western印迹法检测PI-3K信号转导通路中,信号分子AKT的蛋白表达和磷酸化水平。结果:注射rhGH可使荷瘤裸鼠体重明显增加,肝癌原位移植瘤体积显著增大(P<0.05);但肝癌在裸鼠体内的转移并未显著增加(P>0.05)。IGF-1R基因沉默后,裸鼠皮下移植瘤的成瘤率、原位肝癌接种模型中的肝癌移植瘤体积均显著减小(P<0.05)。同时,注射rhGH后,裸鼠肝癌移植瘤体积无明显增大(P>0.05)。对PI-3K信号通路的研究显示,rhGH能显著促进MHCC-97H肝癌细胞信号分子AKT磷酸化,IGF-1R沉默后AKT磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论:rhGH在体内具有显著促进荷瘤裸鼠体重增加及移植瘤生长的作用;但并不促进肝癌的转移。IGF-1R基因沉默后,rhGH对裸鼠移植瘤的成瘤和促生长作用明显减弱。而PI-3K信号通路在rhGH促肝癌生长中发挥重要的介导作用。

热消融技术治疗甲状腺良、恶性肿瘤的现状与展望

近年来热消融术在甲状腺良、恶性肿瘤治疗中的应用受到普遍关注。研究显示与传统手术相比,甲状腺热消融术具有微创和美容的优势。目前热消融技术在甲状腺良性肿瘤治疗中的安全性和有效性已经得到普遍证实,但在甲状腺微小乳头状癌中还存在争议。本文进行文献回顾,就不同热消融技术作用原理、治疗甲状腺良恶性肿瘤的适应证与禁忌证、安全性和有效性,以及与传统外科手术比较的优缺点进行比较和概述。

Sulf2促进淋巴管生成的实验研究

目的研究硫酸酯酶2(Heparan sulfate 2,Sulf2)在淋巴管生成中的作用。方法根据Sulf2 cDNA序列,设计并构建pCDH-Flag-Sulf2真核表达载体,慢病毒转染293FT细胞,获得合成纯化的rSulf2。通过流式分析、成管试验、裸鼠耳部淋巴管生成模型等实验,研究rSulf2对于淋巴管内皮细胞(Lymphatic endothelial cells,LECs)细胞周期、凋亡、成管能力和淋巴管生成的影响。结果构建的pCDH-Flag-Sulf2真核表达载体,经酶切和测序证明构建完全正确。Western blot检测证明293FT细胞转染pCDH-Flag-Sulf2真核表达载体后,rSulf2表达增高。合成纯化的rSulf2可以减少无血清培养液诱导的LECs细胞的凋亡,增加活细胞的比例,但对细胞周期无显著影响,rSulf2还可以增加淋巴管内皮细胞的体外成管能力及增加裸鼠耳部淋巴管的数量。结论 Sulf2可以抑制LECs细胞的凋亡,对淋巴管生成起到促进作用。

医学临床专业本科生外科临床实训交叉模拟课程的建设

通过建立外科临床实训交叉模拟课程,提高医学临床专业本科生外科临床操作技能,培养学生临床思维能力。使学生亲身体验临床实践思维的特点,贯彻外科临床诊疗思维方式,将外科医学理论知识在医疗实践中得到综合应用。

浆乳方联合乳房成形术及持续负压灌洗技术治疗难治性浆细胞性乳腺炎

目的评价浆乳方联合乳房成形术及持续负压灌流技术治疗难治性浆细胞性乳腺炎的疗效。方法回顾性分析2016年1月至2018年12月期间收治的42例难治性浆细胞性乳腺炎患者。所有患者术前1个月至术后1个月口服浆乳方,每日一帖;手术彻底清除病灶,一期乳房成形修复,术后持续负压灌洗。观察该方法对于难治性浆细胞性乳腺炎的疗效、不良反应和满意度。结果治愈率100%(42/42),总有效率为100%(42/42),复发率0%(0/42)。平均术后伤口愈合时间8.29d,平均痊愈时间42.29d,无药物过敏及不良反应。总体满意度评分:5分(n=28,67%)、4分(n=12,29%)、3分(n=2,5%)。结论浆乳方联合乳房成形术及持续负压灌洗技术可有效治疗难治性浆细胞性乳腺炎。

微创小切口腋下大汗腺切除术治疗腋臭的临床研究

腋臭（bromhidrosis）俗称狐臭,是臭汗症（fetid sweat）的一种,腋窝部可发出特殊的异味。目前临床上治疗腋臭症的方法很多,但均不理想。保守治疗主要包括外用药物疗法、局部硬化剂注射疗法和物理疗法,其中物理疗法又包括激光、高频电刀、冷冻和微波治疗等。

Genistein抑制肝细胞肝癌侵袭性生长的体外研究

目的 研究genistein对肝癌细胞侵袭性生长的抑制作用及其作用机制。方法 以体外培养的Bel 7402肝癌细胞株为研究对象,分别给予5μg/mL和10μg/mL genistein干预,绘制细胞生长曲线,测定细胞活力和不同时间点细胞体外黏附能力变化,以Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力,同时行局部黏着斑激酶(FAK)表达、细胞DNA含量的双参数流式细胞仪检测和细胞凋亡的流式细胞仪检测。结果genistein显著抑制Bel 7402肝癌细胞株的生长,其细胞活力显著下降,肿瘤细胞抑制率在G5组平均为26.71％,在G10组平均为42.64％;细胞体外黏附能力受到显著抑制,在genistein作用的前40 min内最为明显,40 min时的黏附抑制率在G5组为43.52％,G10组为84.18％;细胞体外侵袭能力显著下降,G10组的侵袭抑制率可达28％;细胞凋亡显著增加;细胞周期分析显示S期细胞比率显著降低,细胞生长主要阻滞在G2/M期;信号转导分子FAK表达在G10组(12.89±0.36)％显著低于对照组(19.75±1.12)％(P<0.05)。结论 genistein可以显著抑制Bel 7402肝癌细胞株的体外侵袭性生长,FAK表达改变与genistein抑制作用的发挥相关。

乙醛脱氢酶1A1表达与乳腺癌淋巴结转移及预后关系研究

目的:研究乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase,ALDH1)亚型ALDH1A1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌淋巴结转移和临床预后的关系。方法:采用免疫组化方法检测72例原发性乳腺癌组织中ALDH1A1的表达,分析其表达与乳腺癌病人淋巴结转移、肿瘤分化、TNM分期及病人总生存期等临床因素间的关系。结果:72例乳腺癌病人中,淋巴结转移组(n=37)ALDH1A1阳性表达21例,占56.8%;非淋巴结转移组(n=35)ALDH1A1阳性表达8例,占22.9%,两组具有统计学差异(P<0.01)。ALDH1A1在伴淋巴结转移乳腺癌病人的表达显著高于不伴淋巴结转移者(P<0.01);但与病人的年龄、病理类型、肿瘤分级、TNM分期、分化程度和受体状态不相关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1A1高表达组病人的总生存期、无病生存期、5年生存率和5年无病生存率均显著低于ALDH1A1低表达组,两组具有统计学差异(P<0.05)。单因素及多因素统计分析显示,ALDH1A1表达、淋巴结转移和TNM分期是与乳腺癌预后相关的重要独立因素,ALDH1A1高表达组病人预后显著差于ALDH1A1低表达组(P<0.05)。结论:乳腺癌ALDH1A1表达与淋巴结转移及预后显著相关,可作为预测乳腺癌淋巴结转移以及判断病人临床预后的重要指标。

乳腺癌术后肌皮瓣重建术44例分析

目的:探讨乳腺癌术后一期乳房重建不同术式的疗效对比。方法:回顾分析本院2005年1月至2007年12月乳腺癌术后一期乳房再造44例。其中一期行背阔肌肌皮瓣移植者27例,横向腹直肌肌皮瓣移植者17例。结果:中位随访时间22.5个月,两种重建方式在客观效果评价、术后并发症和复发率方面均无统计学差异,但腹直肌肌皮瓣组的主观效果评价优于背阔肌肌皮瓣组(P=0.0462)。结论:背阔肌肌皮瓣和腹直肌肌皮瓣移植仍是目前乳房重建的常用术式。而腹直肌肌皮瓣重建与背阔肌皮瓣相比具有一定的优势。

构建RNA干扰真核表达载体靶向抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231内的VEGF-C表达之研究

目的:通过构建RNA干扰真核表达载体人乳腺癌细胞株MDA-MB-231内VEGF-C后的生物学变化。方法:构建pGCsi-VEGF-C真核表达载体,建立VEGF-C稳定低表达的MDA-MB-231人乳腺癌细胞株,检测该细胞株的体外增殖和侵袭能力及体内移植瘤生长和淋巴结转移的变化。结果:成功构建了pGCsi-VEGF-C真核表达载体,沉默效率达90%;筛选并获得VEGF-C稳定低表达的MDA-MB-231细胞株,该细胞株的体外增殖及侵袭能力,分别下降40%和35%,体内移植瘤的生长减慢和癌细胞淋巴结转移数量明显下降(P<0.05)。结论:VEGF-C的表达量下降可显著降低MDA-MB-231细胞株的增殖、侵袭及淋巴结转移能力。

常规外科联合中医辨论治及整形修复技术治疗复杂浆细胞性乳腺炎

目的探讨常规外科联合中医辨论治与整形修复技术,治疗复杂浆细胞性乳腺炎的临床疗效.方法选取2013年11月至2018年10月收治的浆细胞性乳腺炎患者60例,分为3组,分别给予常规外科治疗(A组,n=21)、常规外科联合中医辨论治(B组,n=20)和常规外科联合中医辨论治与整形修复技术治疗(C组,n=19).比较3组患者治愈时间、治愈率和愈后满意率的差异.结果C组患者术后痊愈时间为(48.8±1.8)d,治愈率100%,患者对术后乳房形态满意率94.74%,其治愈率和愈后满意率均优于其他两组(P<0.05).结论复杂浆细胞性乳腺炎采用常规外科联合中医辨论治与整形修复技术进行治疗,疗程较短,疗效显著,患者满意度高,值得临床推广应用.

IGF-1调控乳腺癌VEGF-C表达的实验研究

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)表达的调控及其相关信号传导通路。方法:应用实时定量PCR和Western印迹技术检测IGF-1刺激前后目的基因VEGF-C mRNA及其蛋白在乳腺癌细胞中表达的变化,检测细胞内相关信号传导分子Akt、ERK1/2蛋白及其磷酸化表达改变。结果:IGF-1显著促进乳腺癌细胞株的VEGF-C表达(P<0.05);VEGF-C表达与IGF-1间呈浓度依赖关系;在IGF-1作用下,p-Akt及p-ERK1/2表达显著增加(P<0.05)。结论:IGF-1能显著促进乳腺癌MDA-MB-231细胞株的VEGF-C表达,信号传导分子p-Akt与p-ERK1/2可能在其中起着重要的介导作用。

甲状腺癌术后不适,怎么办

手术是治疗甲状腺癌的重要手段,但是,术后有些患者,特别是做了颈部淋巴清扫的患者,可能会出现颈部紧绷感、麻木感和肿胀感,甚至会出现术后颈肩部活动受限、上肢感觉和运动障碍,这该怎么办呢?

乳房整形,重塑女性之美

近年来越来越多的女性开始关注自身乳房的形态,她们希望通过隆胸让身形看起来更“完美”,但选择哪种隆胸方式往往让人很困惑;已经完成隆胸的女性会担心隆胸是否会导致乳腺癌,而乳腺癌患者又很关心如上海社区健康大学堂何选择乳腺再造。本期“专家门诊”我们就来说说乳房整形那些事。

术中B超定位下经乳晕边缘小切口切除乳腺多发微小腺瘤的临床研究

目的:探讨术中B超定位下经乳晕边缘小切口切除乳腺多发微小腺瘤手术的可行性。方法:术中在B超定位下于乳晕边缘做一弧形小切口,锐性分离形成皮下隧道,在B超导引下将血管钳沿此皮下隧道至B超定位下的低回声处,钳夹病变周围腺体组织牵拉至切口旁,牵引直视下切开部分腺体完整切除微小腺瘤。结果:应用此方法可一次切除多个乳房微小腺瘤,术后伤口隐蔽,乳房形态与外观正常,乳晕旁瘢痕线不明显。结论:术中B超定位下经乳晕边缘小切口行乳腺多发微小腺瘤切除是一种新的技术手段,弥补了传统手术缺点,安全可行,既达到了治疗目的,又符合美学要求。

浅谈甲状腺热消融术——甲状腺结节治疗的新微创技术

2019年2月4日世界第20个世界癌症日,上海市卫健委公布的最新癌症监测数据显示:上海女性最常见的癌症依次是肺癌、甲状腺癌和乳腺癌。甲状腺癌的发病率首次超过乳腺癌。