石蒜组织培养和植株再生的研究

以石蒜的双鳞片为外植体,MS为培养基,对石蒜组织培养适宜条件进行筛选,并对石蒜的植株再生进行了研究。结果表明:MS+3mg/L6-BA+0.3mg/L NAA是不定芽增殖的最佳激素组合,诱导率可达73.99%;石蒜生长旺盛期的11月是芽诱导率最高的时期,同时,MS+0.5mg/L6-BA+0.8mg/L NAA是较好的生根培养基,生根率可达95.00%;幼苗移栽至蛭石30%营养土中移栽成活率最高达91.67%。

石蒜生物碱的双向薄层色谱分析及气质联用鉴定

建立双向薄层色谱分离石蒜多种生物碱组分的方法,并初步制备了生物碱单品。研究了石蒜生物碱各组分分离的单向及双向展开剂,结果表明:单向薄层色谱分离以氯仿∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2的展开剂分离效果最好,分离出的斑点数为13个。双向薄层色谱分离以乙酸乙酯∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2为第1向展开剂,氯仿∶甲醇∶氨水=9∶1∶0.2为第2向展开剂,分离石蒜生物碱效果最好,斑点数多达16个,且非常清晰。利用该方法对石蒜不同器官中生物碱进行了分析,结果显示:根中生物碱种类最多且含量最高,鳞茎其次,叶最低。经HPLC对分离得到的16个斑点进行检测,其中15个生物碱色谱峰明显,8种生物碱的纯度在90%以上,其中5种的纯度达93%以上,经气质联用鉴定,分别是石蒜碱、力克拉敏、加兰他敏、多花水仙碱和普鲁维因。此法适于石蒜生物碱组分的分析及微量制备。

诱导子对半夏细胞生长和总生物碱积累的影响

目的研究非生物、生物诱导子及两种诱导子协同作用对半夏细胞生长和总生物碱的积累。方法采用酸性染料比色法测定总生物碱的含量。结果添加1 mg/L Ag+、1 mg/L Cu2+和5 mg/L苯丙氨酸(Phe)总生物碱分别为:409,798和519μg/g,是对照的2.1倍,3.4倍和2.6倍;1 mg/L Ag+和10 mg/L Phe,1 mg/L Cu2+和5 mg/L Phe总生物碱含量是634和461μg/g,是对照的2.8倍和1.9倍;1 mg/L Cu2+诱导的愈伤组织半夏总生物碱含量最高。结论实验中的诱导子显著提高半夏总生物碱含量且不影响细胞生长。

石蒜愈伤组织的诱导及其继代培养

以石蒜鳞茎为外植体,研究了不同激素组合、鳞茎不同部位和不同生长时期等因素对石蒜愈伤组织诱导的影响及其继代培养。结果表明:MS+2,4-D 1 mg·L^(-1)+6-BA 1 mg·L^(-1)激素组合能较好的诱导出石蒜愈伤组织,诱导率达61.13%;外植体的选择是石蒜愈伤组织诱导的关键因素,内层鳞茎诱导愈伤组织的效果最好;在一个生长周期中,9、10月的鳞茎作为外植体诱导愈伤组织最佳;MS+2,4-D 0.5 mg·L^(-1)+KT 0.5 mg·L^(-1)是愈伤组织较好的继代培养基,继代周期为24～27 d。