葛根素对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧时脂质过氧化损伤的保护作用

目的 观察葛根素 (puerarin,Pue)对缺氧 -复氧损伤造成的大鼠乳鼠心肌细胞脂质过氧化反应的作用。方法 分别测定各个时点对照组、模型组及各给药组 (1,0 .1,0 .0 1g/L Pue)培养上清中 SOD活性和 MDA含量 ,细胞 MTT代谢率的变化。结果 缺氧及复氧都可造成 SOD活性下降、MDA含量升高及 MTT代谢率下降 ,复氧后 2h最为显著 (P<0 .0 1)。 3种剂量 Pue均能对抗这 3个指标的异常变化 ,但浓度越小 ,作用越弱。结论 Pue能减轻缺氧时产生的自由基损害 ,减少 SOD的消耗 ,并可能促进其合成 ,亦可保护心肌细胞的线粒体功能 。

葛根素对缺氧-复氧时乳鼠心肌细胞分泌细胞因子的作用

目的 观察葛根素 (Pue)对缺氧 -复氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞分泌的肿瘤坏死因子 α(TNF α)及白细胞介素 6(IL 6 )的作用。方法 采用生物学方法 ,测定对照组、模型组、及 1g·L-1、0 1g·L-1、0 0 1g·L-1Pue给药组在各个时间点时细胞培养上清液中TNF α、IL 6活性的变化。结果 受到缺氧、复氧刺激后TNF α、IL 6活性较对照组增加 (P <0 0 1)。各剂量在缺氧时均表现出降低TNF α活性的作用 ,1g·L-1Pue的作用最强 (P <0 0 1) ,而其它两个剂量在复氧时还能增加TNF α活性。Pue能降低IL 6活性的增加。结论 缺氧、复氧刺激能增加心肌细胞分泌TNF α、IL 6 ;Pue能抑制缺氧时TNF α的分泌 ,但在复氧后 ,除 1g·L-1外 ,其它剂量还表现出升高TNF α的作用 ;Pue可抑制IL 6的过度分泌 ,并呈剂量依赖趋势。

葛根素对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤时NO产量增加的抑制作用

目的 :观察葛根素对缺氧 复氧损伤诱导的大鼠乳鼠心肌细胞一氧化氮 (NO)产生的作用。方法 :采用硝酸还原酶法测定对照组、模型组、及 1,0 .1,0 .0 1g·L-1Pue给药组在各个时间点时细胞培养上清液中NO含量的变化。结果 :复氧开始后 ,模型组NO合成显著性地增加 (P <0 .0 1)。复氧后 6h ,NO合成激增 ,并一直保持。 3种剂量的Pue在复氧后 6h才表现显著性抑制 (P <0 .0 1)NO合成的作用 ,并保持至其后 2 4h。结论 :在NO合成量激增时Pue才表现出显著降低缺氧 复氧损伤时心肌细胞分泌的NO ,并呈剂量依赖趋势。

三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用的实验研究

目的观察三肽化合物酪丝缬肽(tyroservaltide,YSV)对体外培养人肝癌BEL7402细胞增殖的抑制作用。方法建立人肝癌BEL7402及Chang氏肝细胞体外培养体系,用BrdU法、MTT法及LDH法,观察YSV对体外培养的BEL7402细胞、Chang氏肝细胞DNA分裂指数、MTT代谢率、LDH释放量的影响,用琼脂糖凝胶电泳观察药物对体外培养BEL7402细胞DNA片段化的影响。结果YSV对BEL7402细胞作用48h、72h时药物浓度为1mg·L-1和0.1mg·L-1组与阴性对照组比较:①能显著抑制肿瘤细胞DNA的合成(P<0.01),抑制率最高为药物浓度1mg·L-1作用72h时可达32.53%,②能表现出明显抑制细胞代谢的作用(P<0.05)其中YSV0.1mg·L-1作用72h时抑制率最高为19.12%,③能增加胞浆内LDH的释放(P<0.05),YSV(1mg·L-1)作用72h时抑制率最高,为36.13%,④能诱导BEL7402肝癌细胞DNA片断化成低分子量DNA,经1%琼脂糖电泳后显示为DNALadder。对正常肝细胞系Chang氏肝仅0.1mg·L-1在48h表现出抑制DNA合成能力的作用。结论YSV抑制人肝癌BEL7402细胞的增殖,对正常肝细胞系Chang氏肝没有影响。

三肽化合物酪丝缬肽对人肝癌裸鼠移植瘤基因表达谱的影响

目的：观察小分子三肽化合物酪丝缬肽(tyroservatide,YSV)的抗肿瘤作用,分析YSV对肿瘤细胞基因表达情况的影响。方法：建立人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤模型,应用基因芯片技术分析YSV对人肝癌BEL-7402裸鼠移植瘤肿瘤组织基因表达的影响,应用RT-PCR方法验证相关基因的表达情况。结果：给药剂量为320μg·kg^(-1)·d^(-1)时,YSV能显著抑制裸鼠人肝癌BEL-7402移植瘤的生长,抑瘤率为52.37%,与生理盐水组比较均有统计学意义(P＜0.05)。YSV组与生理盐水组比较有781个基因存在统计学差异,其中52个基因与抑瘤效果密切相关,37个促进肿瘤增殖的基因表达下调,15个抑制肿瘤增殖的基因表达上调。RT-PCR检测证实YSV能够明显抑制肿瘤细胞癌基因Akt与上调抑癌基因PTEN的表达。结论：YSV具有显著的抗肿瘤活性,可以抑制肿瘤增殖相关基因的表达,增强抑制肿瘤生长相关基因的表达水平,以恢复它们之间的平衡关系,达到抗肿瘤细胞效应。

肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞的影响

目的 :观察肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞(RPAECs)DNA合成、损伤、一氧化氮(NO)合成、内皮素(ET)分泌的影响。方法 :用胶原酶I消化分离获得兔肺动脉内皮细胞 ,在含不同浓度肺心病患者或正常人血清的培养基孵育12h ,应用MTT比色法检测细胞增殖情况 ;应用单细胞电泳法检测细胞DNA的损伤 ;通过检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶 (LDH)、ET、NO等指标观察RPAECs分泌功能的变化。结果 :高浓度肺心病患者血清对RPAECs细胞增殖有明显抑制作用 ,其中部分细胞脱落死亡 ;肺心病患者血清浓度为10 %、15 %、20%时LDH释放量显著高于正常对照组 ;随着肺心病患者血清浓度的升高 ,NO较正常对照合成量下降 ,而ET分泌量显著升高 ,且两者有显著相关性。结论 :高浓度肺心病患者血清对RPAECs有毒性作用 ,损伤DNA ,且抑制DNA合成。

肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞分泌NO和ET的影响

目的:观察肺心病患者血清对兔肺动脉内皮细胞分泌一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的影响,以进一步探讨肺心病患者内皮细胞功能的变化。方法:用胶原酶-I消化分离获得兔肺动脉内皮细胞(RPAECs),取生长稳定的4～6代细胞与含不同浓度肺心病患者或正常人血清的培养基共同孵育12h,弃掉更换为一般培养液,继续培养4h后收集细胞培养上清,测定细胞培养上清中的ET和NO。结果:当培养基中含10%、15%、20%肺心病患者血清时,细胞培养上清中的ET水平高于正常对照组,而NO水平低于正常对照组,两者的变化与培养基中患者血清的浓度相关。结论:高浓度肺心病患者血清抑制体外培养的兔内皮细胞分泌NO,同时促进ET的合成。

抗凝血酶Ⅲ防治内毒素血症致多器官功能不全的实验研究

目的 :探讨抗凝血酶 (AT )对内毒素血症致多器官功能不全综合征 (MODS)的防治作用。方法 :以内毒素注射建立鼠 MODS模型 ,随机分为空白对照组、阳性对照组和治疗组。治疗组于内毒素注入 1小时后静注 AT 2 5 U/kg,观察血生化、凝血指标和病理组织学变化 ,并与对照组比较。结果 :治疗组与阳性对照组比较 ,血小板计数、纤维蛋白原、部分凝血活酶生成时间、D 二聚体、凝血酶原时间、AT 、血糖、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等均有显著性差异。病理组织学 (肺、肾、肝等 )治疗组也有明显改善。结论 :AT 对内毒素致

大鼠主动脉血管内皮细胞受刺激后IL-8的产生

为了研究内毒素及炎症因子对血管内皮细胞分泌IL - 8的影响 ,分别用内毒素、IL - 1、TNFα刺激体外培养的Wister大鼠主动脉内皮细胞 ,并用放射免疫分析检测IL - 8的含量。经内毒素、IL- 1、TNFα刺激后 ,内皮细胞体外培养液内IL - 8的分泌量分别为 :3.1± 0 .6,6.8± 1.2 ,5.8± 1.6;空白对照为 0 .6± 0 .3,单位为ng/mL。内毒素、IL - 1、TNFα能促进内皮细胞分泌IL - 8,内皮细胞在机体炎症过程中起重要作用。