十全大补汤通过调节突触功能对阿尔兹海默病小鼠认知损伤的改善作用

目的探究十全大补汤对阿尔兹海默病(AD)小鼠突触功能及认知损伤的改善作用。方法60只小鼠随机分为对照组、模型组、美金刚组(5 mg/kg)和十全大补汤高、中、低剂量组(6.24、3.12、1.56 g/kg),每组10只,除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射D-半乳糖并灌胃AlCl370 d建立AD模型,造模第29天开始,各组灌胃给予相应剂量药物42 d。通过Morris水迷宫实验和条件恐惧实验检测空间学习记忆及联想记忆,HE染色观察海马神经元形态改变情况,试剂盒检测血清SOD活性、MDA水平及海马组织SOD、AChE活性,MDA、ACh、TNF-α、IL-1β水平,Western blot法检测海马组织PSD-95、Shank3、NR1、NR2A、NR2B、AMPK、p-AMPK蛋白表达。结果与模型组比较,十全大补汤高剂量组小鼠空间学习记忆能力与联想记忆提升(P<0.05,P<0.01),海马神经元病理损伤减轻,氧化应激及炎症水平下降(P<0.05,P<0.01),胆碱能传递增强(P<0.05,P<0.01),海马组织PSD-95、Shank3、NR1、NR2A、NR2B、p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论十全大补汤可改善AD小鼠认知损伤,其机制可能与激活AMPK,恢复突触功能有关。

四物汤对糖尿病小鼠学习记忆能力的影响

目的观察四物汤对尾静脉注射链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠学习记忆能力的影响,探讨其改善学习记忆损伤的作用机制。方法55只ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、四物汤低剂量组和四物汤高剂量组,除空白对照组外,采用尾静脉注射链脲佐菌素(180 mg/kg)建立糖尿病小鼠模型。造模成功后开始给药,四物汤低剂量组给药剂量2.5 g/kg,四物汤高剂量组给药剂量5 g/kg,空白对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水,连续40 d。给药第7、21、35、40日检测小鼠体质量和血糖,第40日进行糖耐量实验;Morris水迷宫实验评价小鼠学习记忆能力;ELISA检测海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)含量;HE染色和尼氏染色观察海马CA1区神经元形态;Western blot检测海马组织突触相关蛋白PSD95、Shank3、NR1和NR2B表达。结果与空白对照组比较,模型组小鼠给药第21、35、40日血糖明显升高,血糖曲线下面积(AUC)明显增加(P<0.001),Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P<0.05),海马组织BDNF含量有降低趋势,但差异无计学意义(P>0.05),海马CA1区神经元核固缩,细胞排列散乱、间隙增大,尼氏体小且数量少,海马组织PSD95、Shank3、NR1和NR2B表达明显降低(P<0.01,P<0.001);与模型组比较,四物汤低剂量组给药第35、40日及四物汤高剂量组给药第21、35日血糖明显降低(P<0.05,P<0.001),四物汤低剂量组AUC明显降低(P<0.05),2组Morris水迷宫实验逃避潜伏期明显缩短(P<0.001,P<0.01),海马组织BDNF含量有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),海马CA1区神经损伤改善,细胞排列紧密,尼氏体数量增加,四物汤低剂量组NR1和NR2B蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05),四物汤高剂量组Shank3、NR1和NR2B蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),PSD95蛋白表达有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论四物汤可改善链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠学习记忆损伤,其作用机制与提高海马组织突触相关蛋白Shank3、NR1和NR2B表达,保护突触功能有关。

黄芪甲苷对记忆损伤小鼠行为学及海马体的影响

目的:研究黄芪甲苷对于单侧脑室注射链脲佐菌素小鼠的行为学以及海马体影响。方法:将链脲佐菌素(STZ)注射于单侧脑室的小鼠随机分为模型组、黄芪甲苷高剂量组、黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷低剂量组、多奈哌齐组,另设对照组、假手术组。灌胃给药30 d后,行为学实验检测小鼠空间学习记忆能力。试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶抑制率,海马体中丙二醛以及乙酰胆碱酯酶活力。苏木精-伊红染色法检测小鼠大脑海马CA1区病理状态。蛋白印迹法检测小鼠海马体中NR2A、NR2B、Shank3、Psd95、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达情况。结果:黄芪甲苷高剂量组逃避潜伏期短于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。黄芪甲苷高剂量组血清超氧化物歧化酶抑制率、海马体中乙酰胆碱酯酶、丙二醛活力下降低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.01)。黄芪甲苷高剂量组海马体Psd95、PI3K、NR2A、p-Akt、Shank3、NR2B表达高于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:黄芪甲苷可上调单侧脑室注射STZ小鼠海马体中NR2A、NR2B、Shank3、Psd95、PI3K、p-Akt表达,减轻海马体中氧化应激损伤,改善小鼠行为学。

保元汤对于记忆损伤小鼠的行为学以及海马体蛋白的影响

目的:研究保元汤对于单侧脑室注射链脲佐菌素小鼠的行为学以及海马体蛋白的影响。方法:对单侧脑室注射链脲佐菌素的小鼠随机分为模型组,保元汤高剂量组(1.456 g·mL^(-1)),保元汤中剂量组(0.728 g·mL^(-1)),保元汤低剂量组(0.364 g·mL^(-1)),多奈哌齐组(1 mg·kg^(-1)),另设对照组以及假手术组。对各组小鼠灌胃给药30天后,水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,条件恐惧实验检测小鼠恐惧记忆能力。苏木精-伊红染色法检测小鼠大脑海马CA1区病理状态。试剂盒检测甘油三酯,丙二醛的变化情况。蛋白免疫印迹实验检测小鼠海马体中NR2A、NR2B、NR1、Shank3、Psd95蛋白的表达情况,并检测mTOR、PI3K、Akt信号通路的表达情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠潜伏期显著延长(P<0.001),恐惧僵直时间减少,大脑海马体中细胞核固缩严重,血清中甘油三酯含量下降明显(P<0.01),海马体中丙二醛含量上升(P<0.05),海马体中NR2B、NR1、Shank3、PI3K、p-mTOR表达水平下降(P<0.05),NR2A、p-Akt表达显著下降(P<0.01),Psd95表达水平下降(P<0.001)。与模型组相比,低剂量组的潜伏期显著下降(P<0.05),恐惧僵直时间增加,大脑海马体中细胞死亡减轻,血清中甘油三酯含量上升,海马体中丙二醛含量下降,海马体中Shank3、p-MTOR表达上升,PI3K表达上升显著(P<0.05),NR1、NR2A、Psd95表达水平上升(P<0.01),NR2B表达水平上升(P<0.001),p-Akt表达显著上升(P<0.0001)。结论:保元汤上调记忆损伤小鼠海马体中PI3K/p-Akt/p-mTOR信号通路的表达,上调突触蛋白Psd95、Shank3、NR1、NR2A、NR2B的表达,改善了海马CA1区组织病理状态,可以延长恐惧僵直时间,降低逃避潜伏期。

人参养荣汤改善阿尔兹海默症小鼠学习记忆损伤的作用

目的探究人参养荣汤对阿尔兹海默症小鼠学习记忆损伤的改善作用及其机制。方法72只小鼠随机分为空白组,模型组,多奈哌齐组(0.1 mg/kg),人参养荣汤低、中、高剂量组(1.56、3.12、6.24 g/kg),每组12只。除空白组外,其余各组小鼠每天腹腔注射100 mg/kg D-半乳糖,灌胃10 mg/kg AlCl_(3),2 h后灌胃给予治疗药物。造模后90 d,行为学实验检测小鼠学习记忆能力,采用试剂盒检测小鼠血清、脑组织生化指标,HE染色评估海马组织损伤情况,蛋白免疫印迹法检测海马组织PSD95/NR2B通路蛋白的表达。结果人参养荣汤及多奈哌齐均对小鼠空间学习记忆有明显改善作用,可以缓解小鼠体内氧化应激,升高脑组织乙酰胆碱(Ach)水平,降低乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,减轻海马组织损伤,同时上调PSD95、NR2B的蛋白表达。结论人参养荣汤可明显改善阿尔兹海默症小鼠的学习记忆损伤,缓解氧化应激,恢复小鼠脑组织乙酰胆碱系统,其机制可能与调节PSD95/NR2B信号通路有关。

雷帕霉素对STZ诱导的HT22细胞损伤的保护作用

该研究探究雷帕霉素对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的HT22细胞损伤的神经保护作用。利用STZ诱导HT22细胞建立神经细胞损伤模型,给予HT22细胞不同浓度的雷帕霉素进行预保护,采用MTT法筛选STZ造模浓度和雷帕霉素最佳保护浓度;将HT22细胞分为对照组(con)、模型组(STZ)和雷帕霉素组(Rap),HE染色观察神经细胞形态及突触结构;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡情况;相应的商品试剂盒检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot法检测细胞p-AMPK/AMPK、p-m TOR/m TOR、NR2B、NR1、PSD 95蛋白表达情况。实验结果显示,与对照组相比,STZ可明显导致HT22细胞损伤,1.0μmol/L雷帕霉素对STZ诱导的神经损伤具有最佳保护效果;与对照组相比,模型组细胞突触结构损伤严重,STZ诱导HT22细胞凋亡,SOD活性显著下降(P<0.05),LDH活性(P<0.001)、MDA含量显著上升(P<0.001),p-AMPK/AMPK(P<0.001)、NR2B(P<0.001)、NR1(P<0.05)、PSD 95(P<0.001)蛋白表达水平显著下降,p-mTOR/m TOR蛋白表达水平显著上升(P<0.001)。与模型组相比,雷帕霉素能保护神经细胞形态和突触结构,抑制细胞凋亡,提高SOD活性(P<0.05),降低LDH活性(P<0.001)、MDA含量(P<0.01),上调p-AMPK/AMPK(P<0.001)、NR2B(P<0.05)、NR1(P<0.05)、PSD 95(P<0.01)蛋白表达水平,下调p-m TOR/m TOR蛋白表达水平(P<0.01)。总之,雷帕霉素能减轻STZ诱导的HT22细胞氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,保护神经细胞突触结构,其机制可能与AMPK/m TOR通路调控突触蛋白PSD 95和NMDA受体活性有关。

二甲双胍对N-甲基-D-天冬氨酸诱导的HT22细胞损伤的保护作用

该文探究二甲双胍(metformin,Met)对N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)诱导的HT22细胞损伤的神经保护作用。体外培养HT22细胞,建立NMDA诱导HT22细胞神经损伤模型,给予不同浓度的Met预保护,检测细胞存活率,确定Met预保护最佳浓度;Hoechst33342染色拍照观察细胞凋亡;相应试剂盒检测培养基上清中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)的含量;Western blot检测突触蛋白PSD95、NR2B以及AMPK、p-AMPK的表达情况。结果显示,与对照组相比,NMDA可明显导致HT22细胞损伤,4 mmol/L Met,对其诱导的细胞神经损伤有最大保护作用;模型组中,NMDA损伤导致HT22细胞凋亡,LDH活性升高,SOD活性降低,MDA含量升高,Met预保护均能逆转以上变化;Met还能上调PSD95、NR2B、p-AMPK的表达。总之,Met可能是通过激活AMPK,调节PSD95/NR2B信号通路并发挥神经保护作用的。