重组真核质粒pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)的构建及表达

目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain(1～5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法:以重组质粒pEGFP-C1-G3BP为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目的片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况。结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达。结论:重组pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)质粒成功构建并表达。

婴幼儿仙台病毒天津株感染的IgM抗体检测及意义

目的:通过对婴幼儿仙台病毒天津株感染的IgM抗体检测,了解人兽共患病原体——仙台病毒对婴幼儿急性下呼吸道的致病情况。方法:观察组为2006年冬季天津市儿童医院0～7岁首诊呼吸道感染患儿83例血清标本,通过间接免疫荧光检测法(IFA)排除了7种常见呼吸道病毒的感染,用自建的酶联免疫吸附法(ELISA)对仙台病毒的IgM抗体进行检测,同时设20例正常儿童血清标本为阴性对照组。结果:观察组16例为阳性,阳性率19.28%。与2004年同期数据44.59%(33/74)相比,本组阳性率有所降低,差异有统计学意义(P<0.01)。IgM抗体检测阳性率1岁内最高,1～3岁和3～7岁组阳性率基本接近,但3组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:仙台病毒在儿科急性呼吸道感染的病原体中占有一定的比例,不可忽视。应对其感染状况进行深入研究。

促甲状腺激素对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的 探讨促甲状腺激素（TSH）对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法体外诱导3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞。以不同浓度牛TSH（0．01IU／L、0．1IU／L、1IU／L）刺激成熟脂肪细胞，蛋白质印迹法分别检测48h后成熟脂肪细胞GLUT4蛋白表达水平，ELISA方法检测细胞培养液中白细胞介素6（IL-6）水平。结果与空白对照组相比，以不同浓度（0．01、0．1、1IU／L）牛TSH刺激成熟脂肪细胞48h后GLUT4蛋白表达呈下降趋势，分别下降约23％、44％、74％（均P〈0．05），细胞培养液中IL-6水平明显增加[（101．9300±6．8396）、（104．1533±5．9619）、（129．01674-6．4232）μg／L比（93．2500±2．6695）μg／L，P〈0．05]。结论TSH可下调3T3-L1脂肪细胞GLUT4蛋白的表达。

糖尿病大鼠甲状腺组织RAGE mRNA和蛋白表达的变化

目的:探讨糖尿病(DM)大鼠甲状腺组织终末糖基化产物受体(RAGE)mRNA和蛋白的表达水平及其与血糖的关系。方法:经高脂饲料喂养联合注射小剂量链脲佐菌素制备DM大鼠49只,随机分为DM组(17只)、胰岛素干预组(DI组,16只)、氨基胍干预组(DA组,16只),另设正常对照组(NC组,9只)。成模12周末测空腹血糖后,经股动脉放血处死大鼠。取甲状腺组织,分别以GAPDH和β-actin作为内对照,用半定量RT-PCR和WesternBlot方法测定各组RAGEmRNA和蛋白的表达。结果:DM组大鼠血糖为(31.72±9.29)mmol/L、甲状腺组织RAGE mRNA与GAPDH mRNA表达比为0.90±0.30,RAGE蛋白与β-actin蛋白表达比为0.88±0.23,均高于NC组的(4.87±0.75)mmol/L、0.27±0.17和0.44±0.21,差别有统计学意义(均P<0.05),DI组与DA组大鼠甲状腺组织RAGEmRNA和蛋白表达分别为0.60±0.22、0.67±0.27和0.38±0.20、0.45±0.17,均低于DM组(均P<0.05)。结论:DM大鼠甲状腺组织RAGE mRNA和蛋白表达增高;积极地控制血糖、阻断终末糖基化产物的形成有利于抑制甲状腺组织RAGE高表达。

糖尿病大鼠甲状腺组织超微结构的病理变化及胰岛素、氨基胍的干预作用

目的探讨糖尿病(DM)大鼠甲状腺组织超微结构的病理变化及胰岛素、氨基胍的干预作用。方法链脲佐菌素制备DM模型大鼠87只,随机分为DM组27只、胰岛素干预组32只、氨基胍干预组28只,成模12周、20周末杀检,取甲状腺组织行超微病理检查。另取25只正常Wistar大鼠作正常对照。结果DM大鼠甲状腺滤泡上皮细胞呈扁平状,微绒毛缺失,粗面内质网扩张呈不规则囊泡状,未见胞饮泡,偶见初级和次级溶酶体。滤泡腔扩大,腔内类胶质电子密度较高。间质水肿,微血管基底板阶段性增厚,可见蛋白样物质沉积,呈细颗粒状、云絮状或均质状。甲状腺滤泡旁细胞增多,胞质内含内分泌颗粒较少。胰岛素和氨基胍干预组甲状腺组织超微结构较DM组有不同程度的减轻。结论DM大鼠甲状腺滤泡上皮细胞呈功能低下的表现,滤泡腔间质有大量蛋白样物质沉积,甲状腺滤泡旁细胞增多可能与高血糖毒性的作用有关。胰岛素和氨基胍干预有一定的治疗作用。

糖尿病大鼠甲状腺组织NISmRNA表达的变化

目的:探讨糖尿病(DM)大鼠甲状腺组织钠/碘转运体(NIS)mRNA表达的变化及胰岛素、氨基胍对其的干预作用。方法:高脂饲料喂养联合链脲佐菌素制备DM大鼠49只,随机分为DM组17只、胰岛素干预组(DI)16只、氨基胍干预组(DA)16只,设正常对照组(NC)9只,成模12周末处死,取甲状腺组织,以半定量RT-PCR方法测定NISmRNA的表达。结果:DM组大鼠甲状腺组织NISmRNA与GAPDH mRNA表达水平比为0.17±0.09显著低于NC组的0.47±0.16(P<0.05),经胰岛素或氨基胍干预后DI组与DA组大鼠甲状腺组织NIS mRNA与GAPDH mRNA表达水平比分别为0.45±0.20、0.40±0.17显著高于DM组(P<0.05)。结论:高糖毒性可能通过非酶糖基化途径导致DM大鼠甲状腺组织NISmRNA表达下降。

罗格列酮对OLETF大鼠肺组织TGF-β1／Smad信号转导途径的影响

目的探讨罗格列酮对自发性2型糖尿病Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty(OLETF)大鼠肺组织转化生长因子(TGF)-β1/Smad信号转导途径的影响。方法 OLETF大鼠16只,分为未治疗的OLETF组和接受罗格列酮治疗组(OLETF/L组)各8只,设Long Evans Tokushima Otsuka(LETO)大鼠8只为对照组。免疫组织化学分析各组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、纤维连接蛋白(FN)和Ⅲ型胶原表达。结果与LETO组大鼠相比,OLETF组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、FN和Ⅲ型胶原表达均显著增加(P<0.01),Smad7表达显著减少(P<0.01);OLETF/L组比OLETF组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3、FN和Ⅲ型胶原表达均显著减少(P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01)。结论罗格列酮可能通过调控TGF-β1/Smad信号转导途径抗糖尿病肺纤维化。

糖尿病大鼠甲状腺组织钠／碘转运体与促甲状腺激素受体mRNA及蛋白表达的变化

目的观察糖尿病大鼠甲状腺组织钠／碘转运体（NIS）、促甲状腺激素受体（TSHR）mRNA和蛋白表达的变化及氨基胍、胰岛素的干预作用，探讨高糖毒性致甲状腺组织损伤及其可能机制。方法高脂饲料喂养联合链脲佐菌素制备糖尿病大鼠49只，完全随机分为糖尿病组17只、氨基胍组16只，胰岛素组16只，设对照组9只，成模12周末称重并测血糖后处死，取甲状腺组织，以RT-PCR方法测定NIS、TSHRmRNA表达，Westem印迹方法检测NIS、TSHR蛋白表达。结果糖尿病组大鼠甲状腺组织NISmRNA和蛋白表达显著低于对照组（0．17±0．09VS0．47±0．16；0．42±0．28vs1．44±0．46；P〈0．05），TSHRmRNA和蛋白表达显著高于对照组（0．49±0．25vs0．17±0．18；1．48±0．65VS0．51±0．35；P〈0．05）；氨基胍组与胰岛素组糖尿病大鼠甲状腺组织TSHRmRNA和蛋白表达显著低于糖尿病组（0．29±0．28与0．30±0．15vs0．49±0．25；0．63±0．27与0．96±0．29vs1．48±0．65；P〈0．05），NISmRNA和蛋白表达显著高于糖尿病组（0．40±0．17与0．45±0．20vs0．17±0．09；0．76±0．36与0．75±0．28vs0．42±0．28；P〈0．05）。结论高糖毒性可能通过蛋白非酶糖基化途径致糖尿病大鼠甲状腺组织NIS表达下降、TSHR表达增高。

浅谈校园建筑的场所精神

校园建筑是学生学习和生活的主要场所,使用时间也很长,因此,在设计中不仅要具有建筑设计必备的功能性和审美性,更要融入历史和中华优秀传统文化。学校不仅要坚持把立德树人作为根本任务,培养“德智体美劳”全面发展的“时代新人”,还要关注校园建筑的设计和校园建筑展现出的场所精神。学生在校园建筑中学习和生活时,要有认同感,不仅要有对学校场所的认同感,还要有对城市、家乡、国家的认同感。

老年2型糖尿病患者血清内生肌酐清除率与代谢综合征的相关性探讨

目的 探讨老年2型糖尿病患者血清内生肌酐清除率（Ccr）与代谢综合征（MS）及其主要组成成分的相关性.方法 选择我院住院的老年2型糖尿病患者329例,根据有无MS分为不伴MS组（144例）和伴MS组（185例）,比较2组血清肌酐清除率,分析其与代谢综合征及其主要组成成分的相关性.结果 329例老年2型糖尿病患者中代谢综合征患病率达56.23%（185例）;与不伴MS组相比,伴MS组患者BMI、血清TG、收缩压、舒张压明显增高,HDL-C、Ccr[（105.2±28.1）比（93.1±29.1）ml/（min·1.73 m2）]明显降低（均P＜0.05）;Ccr与BMI、TG、SBP、DBP及代谢异常集聚数目呈显著负相关;调整了年龄、性别、糖尿病病程、糖化血红蛋白后,Ccr与代谢综合征及其主要组成成分中的TG、B MI、DBP呈显著负相关.结论 老年2型糖尿病患者代谢综合征患病率高,积极多因素干预治疗可能有助于糖尿病肾病的防治.

Tudor-SN蛋白TSN结构域亚结构片段重组质粒的构建与表达

目的：研究人类Tudor-SN蛋白TSN结构域4个亚片段的功能，构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN（Ⅰ一Ⅳ）。方法：以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增出目的基因，将双酶切后带有粘性末端的目的片段和pEGFP-C2载体连接，从而构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN（I-IV）。将构建成功的重组质粒用脂质体法转染HeLa细胞，并在荧光显微镜下观察融合蛋白的荧光表达情况，Western印迹检测融合蛋白的表达。结果：对重组质粒进行双酶切鉴定可见Tudor-SN-TSN（Ⅰ～Ⅳ）的cDNA片段；脂质体转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。Western印迹后可在相应位置检测到融合蛋白pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN（Ⅰ～Ⅳ）。结论：真核pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN（Ⅰ～Ⅳ）重组质粒构建及表达成功。

基于认知无线电的频谱检测算法

认知无线电技术能够解决当前无线频谱资源匮乏而频谱利用率却非常低这一矛盾。无线频谱检测是认知无线电的关键技术。文章对匹配滤波检测、能量检测等单节点频谱检测方法进行了研究,并通过仿真对比分析了各检测算法的检测性能。在此基础上引入了合作检测方法,通过与单节点检测算法的对比仿真得出合作检测方式在性能上的优势。

1+X证书制度下高职国际邮轮乘务管理专业教师职业能力提升探索——以武汉交通职业学院为例

“1+X”证书制度下,优良的师资队伍是人才培养质量提高的重要保障。随着“1+X”邮轮运营服务职业技能等级证书考试的推进,提升国际邮轮乘务管理专业教师的邮轮运营服务职业能力至关重要。通过对武汉交通职业学院国际邮轮乘务管理专业教师职业能力培养现状进行分析,结合“1+X”证书制度对该专业教师职业能力的新要求,从教师培训规划、专业群平台师资交流和激励制度保障三个方面提出未来邮轮专业师资职业能力提升的改进方向,以期更好地完成“1+X”邮轮运营服务管理等级证书考核试点工作,拓宽邮轮乘务管理专业毕业生的就业渠道。

重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1～4)的构建和表达

目的:将人类Tudor-SN蛋白SN(1～4)基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目的片段连接到pERFP-C1载体上,再将构建成功的pERFP-C1-Tudor-SN-SN(1～4)重组质粒转染入HeLa细胞内,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白的表达。结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜下观察到红色融合蛋白的表达。结论:重组pERFP-C1-h Tudor-SN-SN(1～4)质粒构建及表达成功。

多载波OFDM与单载波QAM传输系统性能比较

为了研究多载波正交频分复用(OFDM)与传统单载波正交幅度调制(QAM)系统传输性能,文章基于无线局域网IEEE 802.11a标准,分别在高斯白噪声(AWGN)信道和存在码间干扰两种情况下,利用MATLAB比较多载波OFDM和单载波QAM系统的可靠性与计算复杂度.结果表明,在两种信道环境下,多载波OFDM系统的传输可靠性能均优于单载波QAM,但增加了计算复杂度.

工匠精神融入国际邮轮乘务管理专业教学的实践探索--以武汉交通职业学院为例

基于现阶段高职院校对“工匠精神”融入国际邮轮乘务管理专业教学中的“工匠精神”培育存在问题,从两个方面对国际邮轮乘务管理专业教学中“工匠精神”的内涵进行剖析,结合武汉交通职业学院在专业教学资源库建设、技能大赛初探、实训室更新和师资建设方面的实践成果,提出“工匠精神”融入专业教学的优化建议。

基于吉登斯现代性理论的校园空间设计研究

社会学是研究人的行为与社会群体的社会科学,大学生也属于社会群体,因此在研究大学校园的人与空间关系时,引入社会学概念是很有必要的,这也是一种创新。英国社会学家安东尼·吉登斯认为时空分离、脱域、反思性和全球化是现代性的重要特征,在大学校园户外空间设计研究中,对这些概念进行研究,可以应对现代性,提出更好的空间设计方法。

营销审计在通信行业的应用探索——以中国电信HS分公司为例

随着营销管理在各行各业的深入发展,一些大型企业从长远出发,已经将单纯的财务审计工作逐步细化并且开始重视营销审计在企业营销活动中的功能。基于此,文章首先阐述了营销审计的概念及其作用,其次介绍了目前国有通信企业“三足鼎立”的现状,再次探讨了5G时代下营销审计在通信企业应用的必要性及紧迫性,最后以中国电信HS分公司为例,通过分析其近两年的营销现状,提出了结合营销审计的相应改进对策。

茶文化旅游背景下邮轮二次消费策略探究

邮轮旅游是起源于国外的现代旅游方式,具有休闲度假、海洋观光等多种功能,在众多国家和地区获得了充分发展。茶文化旅游是近年来在中国市场上广受推崇的一种新型旅游模式,其目的就是让游客在旅游的过程中学习更多关于茶文化相关的东西,是一种旅游和文化结合的方式。随着邮轮上茶元素的逐渐增多,茶文化也成为了邮轮旅游过程中不可或缺的一部分。所以本文基于茶文化旅游的背景,在分析邮轮茶文化旅游的发展现状基础上,对邮轮二次消费的策略进行探究,以期为促进邮轮二次消费提供有效的建议。

旅游淡季情势下酒店业的营销与转型策略

很多企业产品都会因为受到季节的变化、消费周期还有时间分配等方面的影响,从而在一定的时期和阶段内出现销售量明显下降甚至是停滞的现象。人们会将这一时期称之为销售淡季。对于很多的行业还有行业的产品而言都会存在着销售淡季的情况,短的可能是三个月,长的可能达到了半年甚至是三个季度。酒店行业是旅游业中重要的产业,在旅游淡季作为酒店行业需要转变观念,从而实现行业在旅游淡季能够继续保持正常销售量的目标。本文针对旅游淡季情况下酒店营销和转型策略进行解析,实现酒店在旅游淡季创造辉煌的目标,希望可以开辟出全新的酒店发展的天地。