PCV2-ORF2去信号肽基因的克隆与原核表达及对小鼠免疫效力的评价

目的通过基因工程的方法表达猪圆环病毒2型的ORF2蛋白,并对表达蛋白进行小鼠免疫效力评价,为猪圆环病毒病疫苗的研制提供技术支持。方法根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列,设计了1对引物。从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的死亡仔猪病料中提取基因组DNA,用PCR方法扩增出ORF2去信号肽基因,将该基因克隆至原核表达载体pET32a,获得重组质粒,经PCR﹑酶切以及序列分析鉴定,表明插入的片段为目的基因,插入的位置、大小和阅读框均正确,成功构建了重组质粒pet32a-ORF2,阳性重组质粒转化大肠杆菌Blgold(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达的最佳条件,表达产物经纯化后,以每只小鼠0.2mg免疫5周龄的雌性小鼠,然后用ELISA检测免疫小鼠血清中抗体的产生情况。结果纯化的重组蛋白能使小鼠产生了抗猪圆环病毒的特异性抗体,从第7d开始产生抗体,第28d抗体水平达到最高,抗体可维持7周以上,并具有良好的安全性。结论表达目的蛋白能在小鼠体内产生特异性抗体,为进一步研究猪圆环病毒亚单位疫苗奠定了基础。

干骺软骨发育异常21例分析

干骺软骨发育异常,是一种少见的以短肢体和骨关节畸形为特征的体质性骨病。本文对有典型临床和 X 线表现的21例进行了回顾性分析.讨论了有关本病的分型、典型表现和鉴别诊断等。着重分析了其基本类型如 Schmid、MeKusick 和 Jansen 等型的临床和 X 线表现。三型中以 Schmid 型最常见.最好侵犯股骨颈干骺软骨,并引起髋内翻畸形。

伪狂犬病病毒gE基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

以质粒pBV222/gE为模板,经PCR扩增出750 bp的伪狂犬病病毒(PRV)gE基因片段,克隆入pET-41b质粒中并转化大肠埃希菌TG1。经PCR、酶切鉴定,筛选出阳性重组质粒pET41b/gE后,转化表达菌Balgold,IPTG诱导,目的蛋白经镍柱亲和层析纯化,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot分析检测。以纯化后的目的蛋白作包被原,建立间接gE-ELISA检测方法。结果表明,目的基因在30℃,0.025mmol/LIPTG诱导条件下,可在Balgold中高效表达,目的蛋白大部分以可溶性形式存在,并能被PRV阳性血清所识别,方阵滴定法确定了间接ELISA方法的抗血清最佳稀释度(800倍)和包被抗原的最佳工作浓度(1 mg/L)。

浅谈热网远程计量监控系统

主要对热网远程计量监控系统的组成,流量计的选择进行了原理分析,并对现场安装及运行中的维护提出了具体要求。

血液紫外线照射回输法免疫及血象变化观察

血液充氧自血回输疗法,又称血液量子疗法,它广泛应用于各种疾病,尤其对治疗神经内科疾病,提高机体免疫能力,防止感染方面更有独特之处.我们应用xzy—A血液治疗机治疗26例病人后的血象和免疫进行了观察,现将结果报告如下:本组脑血管病12例、皮肤病9例,其它神经内科病5例.男21例,女5例.年龄19～76岁,平均43.6岁.以上病例在常规药物加血疗治疗前和治疗后第4周分别取病人血作Hb、RBC（用高铁氰化法）、WBC（试管法）、Pt（许汝和氏法）、C3Ig（琼脂扩散法）、CH50（meyer法）、LTT（微量全血法）以自身对照进行观察,现将结果报告如下:26例血疗前C3（mg/dl）121±50.9、CH50（u/ml）59.96±12.6、LTT（%）62.8±14.8、IgG（g/L）8.77±2.21、IgA（g/L）1.21±0.53、IgM（g/L）0.47±0.20;治疗后C3117±51.1、CH5060.2±23.3、LTT71.7±9.3、IgG9.09±3.08、IgA1.06±0.35;18M0.43±0.12.经统计学处理C3,t值0.29,P】0.05;CH50,t值1,P】0.05;LTT,t值3.3。

环保产业 亟待整顿

环保产业存在政策不完善、结构不合理、市场混乱、技术含量不高、企业规模效益低下等诸多问题。环保产业健康发展应结合市场经济体制改革,制定和完善产业政策,合理布局产业结构,培育和调控环保产业市场,提高环保产业技术水平和企业规模经济效益,以利于健康、协调、持续和稳定发展。

环保产业亟待整顿

环保产业存在政策不完善、结构不合理、市场混乱、技术含量不高、企业规模效益低下等诸多问题。环保产业健康发展应结合市场经济体制改革，制定和完善产业政策，合理布局产业结构，培育和调控环保产业市场，提高环保产业技术水平和企业规模经济效益，以利于健康，协调，持续和稳定发展。

硬膜外阻滞下中晚期消化道癌肿患者手术期间免疫功能观察

麻醉和手术的免疫抑制作用可能使肿瘤容易在术后扩散,而且肿瘤病人免疫抑制的程度和时间比非肿瘤病人更大些。为了探讨硬膜外阻滞下中晚期消化道癌肿患者免疫功能变化,我们在手术期间观察了体液免疫和细胞免疫的6项指标,其中包括免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、补体（C3、C4）和淋巴细胞转化率（LTR）。并与一般上腹部手术患者进行对比。 1

释放孩子情感的天地——浅谈在语文教学中如何引发情感体验

在体验教学中创设情境，儿童会情不自禁地用眼睛去看，用耳朵去听，用脑子去想，这样主客观一致，使整个情境成为一个多折射的心理场所。