肿瘤组织中Tim-3表达的特征及其在肿瘤免疫耐受中的作用

目的:研究小鼠肿瘤发生早期两型含T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域的分子3(Tim3)的表达特点,以及与免疫调节相关基因表达的时空关系,并探讨其在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法:建立小鼠实体瘤模型,采用RTPCR法检测肿瘤组织中可溶型Tim3(sTim3)和膜型Tim3(flTim3),以及叉头盒P3(forkheadboxP3,Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关受体(GITR)、TGFβ、IL10和IFNγ等在不同时相的表达及相应时相肿瘤的生长情况。结果:在早期的肿瘤组织中,sTim3的表达先于flTim3,其后flTim3大量表达,而sTim3的表达则下调直至消失。Foxp3和GITR随flTim3同时表达并逐步上调。CTLA4的表达先于flTim3,并随着时间的推移表达上调。flTim3同Foxp3的表达具有空间位置的一致性。flTim3、Foxp3和CTLA4的表达水平同肿瘤的生长呈正相关。结论:随着肿瘤不断的生长,肿瘤局部的免疫应答逐渐趋向于负调节。flTim3在诱导肿瘤免疫耐受的过程中发挥着重要作用,而sTim3可能起着不同的作用。

sPD-1封闭PD-L促进抗瘤免疫的机制研究

目的研究本室构建的可溶性PD-1(sPD-1)真核表达质粒pPD-1A的抑瘤机理。方法用转染了pPD-1A的BHK细胞分泌产物去封闭树突状细胞上的PD-1配体(PD-L),并用MTT法检测树突状细胞(DC)对小鼠脾细胞的增殖激活作用。BALB/c小鼠接种H22肝癌细胞后次日开始接受质粒pPD-1A的注射。用RT-PCR法分析小鼠脾细胞的细胞因子和共刺激分子的mRNA表达水平,用流式细胞术测定肿瘤内T淋巴细胞的数量。结果在淋巴细胞活化的早期sPD-1对IL-10-DC激活淋巴细胞的作用有一定的促进,但作用并不十分显著(P>0.05)。注射了质粒pPD-1A的小鼠产生了较强的抗瘤免疫反应,H22肝癌细胞的生长明显受到抑制(P<0.01)。脾脏淋巴细胞的4-1BB、B7.1、IFN-γ和TNF-α表达均上调,以IFN-γ的增加最明显;OX40、IL-10表达下调。肿瘤内TIL数量明显增多(75.86%)。结论sPD-1通过对PD-L的封闭,不仅增加了肿瘤内部CD3+T细胞的数量,而且可以调节细胞因子和共刺激分子的表达,从而促进抗瘤免疫。

表观遗传修饰在糖尿病代谢记忆中的作用

糖尿病患者在血糖得到控制后，糖尿病并发症仍然持续发展的现象提示了以前暴露于高血糖导致的“代谢记忆”。近来的研究提示“代谢记忆”可能归因于靶细胞的表观遗传改变。许多实验证据显示：组蛋白乙酰基转移酶（HATs）、组蛋白去乙酰化酶（HDACs）、组蛋白甲基转移酶（HMTs）、组蛋白赖氨酸去甲基化酶（KDMs）以及microRNA在调节几种与糖尿病并发症相关的关键基因表观遗传修饰中发挥了重要作用。进一步阐明表观遗传修饰在糖尿病“代谢记忆”中的作用机制以及明确相应的细胞信号通路，对于糖尿病及其并发症的防治有重要意义。