口服型重组草鱼生长激素基因的创建及其原核表达最佳条件研究

生长激素是脊椎动物分泌的一种多肽激素,具有调节鱼类生长发育和代谢等作用.本研究通过将反式转录激活因子(TAT,Trans-activating transcriptional activator)、草鱼生长激素(GH,growth hormone)和细胞穿透环肽(CP,cyclic peptides)等三个基因片段,柔性拼接成一种新型口服型渔用生长激素基因(TGC)并构建其原核表达载体,再将其转化至表达菌株Escherichia coli BL21(DE3)中,获得基因工程菌(TGC-DE3),并对该基因工程菌原核表达条件进行优化.结果表明,柔性拼接后得到的TGC基因片段完整并正向整合到表达载体,TGC-DE3基因工程菌能诱导表达得到分子质量约34.0 kDa的目的蛋白.当IPTG浓度为0.05 mmol/L,诱导温度为37℃,诱导转速为100 rpm,诱导表达到最佳时间1.5 h时,目的蛋白表达量最高.本研究为渔用生长激素的使用从注射走向口服提供了可能,也为口服型草鱼生长激素蛋白的规模化原核表达生产提供了技术支持.

黄伞和杨树菇发酵液对鱼类病原菌的抑菌活性分析

水生动物的细菌性病害防治急需要新型抗菌物质,而大型真菌,如黄伞和杨树菇的液态发酵液具有较好的抑菌活性.本研究采用管碟法,以嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌等四种常见水生病原菌为指示菌株,测定了黄伞与杨树菇发酵液及其加热处理后的发酵液的抑菌活性.结果表明,黄伞与杨树菇发酵液对四种病原菌均具有较强的抑菌活性,且这种抑菌活性具有较好的热稳定性;这两种真菌发酵液等量混合后对鳗弧菌和溶藻弧菌抑菌活性较单一发酵液明显增强.真菌发酵液对水产病原菌的抑菌作用,应结合具体病原菌,有针对性地应用,做到科学精准地使用.本研究结果将为水生动物的细菌性病害防治提供新的途径和方法.