双酚A诱导斑马鱼P53基因CDS突变的RT-PCR及序列分析

目的:研究双酚A(bisphenol A,BPA)对斑马鱼肝脏p53基因编码序列(CDS)的致突变作用。方法:试验设空白对照组与BPA暴露组,连续染毒30 d后,从斑马鱼肝脏组织中提取RNA,通过RT-PCR方法扩增得到有完整编码区序列的p53基因,并进行测序分析。结果:序列分析表明,斑马鱼P53基因编码区序列长1122 bp,编码373个氨基酸,与网上已经登陆的斑马鱼p53序列有99.9%的相似系数,而与其他生物的P53序列存在一定的差异。在0.6 mg/L浓度下染毒30 d后,BPA暴露组斑马鱼p53基因序列发生了突变。直接测序证明,它们分别在135位、311位密码子发生GAG→GGG、AGG→CGG转变,使其编码的p53蛋白发生Glu→Gly变异。结论:试验结果表明BPA对斑马鱼p53基因CDS有致突变作用,采用RT-PCR技术检测BPA诱导p53基因突变是可行的。