小片段干扰RNA抑制人肝癌细胞株中YAP基因表达的研究

目的:研究用小片段干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制肝癌细胞株中YAP(yes-associated protein)表达后肝癌细胞株对阿霉素(adriamycin,ADM)的敏感性变化。方法:设计YAP基因的siRNA序列,用脂质体LipofectamineTM2000将siRNA转染至4株肝癌细胞株PLC/PRF/5、Huh-7、MHCC97H、MHCC97L中,在荧光显微镜下观察并采用蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测肝癌细胞株中YAP的表达。将细胞以不同浓度的ADM处理后,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thialzolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞的存活率。结果:成功构建针对YAP的siRNA表达载体。Western blotting结果显示,肝癌细胞株经特异性siRNA转染后,YAP蛋白的表达受到抑制,表明RNA干扰(RNA interference,RNAi)能特异、有效地抑制肝癌细胞株中YAP的表达。MTT结果显示,转染YAP siRNA后肝癌细胞株的存活率受到明显抑制。结论:siRNA抑制肝癌细胞株中YAP的表达可增强肝癌细胞株对ADM的敏感性。

新辅助化疗对相关肺癌基因Bcl-2和Beclin-1表达影响

目的：探讨Ⅱ-Ⅲ期肺腺癌（lung adenocarcinoma）患者体内Bcl-2和Beclin-1基因、蛋白表达与新辅助化疗间关系。方法：经免疫组织化学法检测Ⅱ-Ⅲ期肺腺癌80例患者组织中Bcl-2和Beclin-1蛋白表达水平,利用实时定量聚合酶链反应法检测治疗后Ⅱ~Ⅲ期肺腺癌患者组织中Bcl-2和Beclin-1基因表达水平,并研究2种基因表达与新辅助化疗疗效间关系。结果：治疗前两组之间Bcl-2和Beclin-1的蛋白表达水平差异无统计学意义,且Beclin1与Bcl-2在肺腺癌中表达呈负相关,其相关性具有统计学意义（r=-0.43,P〈0.01）。实时定量聚合酶链反应法检测结果显示经新辅助化疗后,化疗组Beclin-1 m RNA水平明显高于对照组,而Bcl-2水平明显低于对照组,治疗前恰恰相反,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：利用新辅助顺铂和多西他赛方案术前化疗,可影响肺腺癌组织中Bcl-2和Beclin-1的表达水平,为研究抑制Bcl-2的表达提高临床参考。

FOXM1与Ki67共表达对三阴性乳腺癌患者预后的影响

目的探讨癌基因叉头框蛋白M1(FOXM1)与增殖细胞Ki67抗原表达对三阴性乳腺癌(TNBC)患者预后的影响。方法免疫组化分析FOXM1和Ki67在60例TNBC组织中的表达,分析其表达量的相关性及其对TNBC患者预后的影响。结果 TNBC组织中FOXM1和Ki67共表达与肿瘤的大小、分化程度、TNM分期、腋窝淋巴结转移和血管神经侵犯密切相关(P<0.05或P<0.01)。FOXM1与Ki67表达呈正相关(r=0.4635,P<0.01)。FOXM1和Ki67高表达以及腋窝淋巴结转移情况可以作为判断TNBC预后的独立因素。结论TNBC组织高表达FOXM1和Ki67,有望成为TNBC患者预后判断的新指标,也为探索TNBC治疗新靶点提供思路。