乙肝病毒携带产妇血清标志物模式与血清及乳汁HBV-DNA相关性研究

目的通过检测分析乙肝病毒携带产妇血清学标志物与血清、乳汁HBV-DNA阳性率的关系,以及产妇血清与乳汁中HBV-DNA含量之间的相关性,旨在指导母乳喂养。方法选取96例乙肝病毒携带产妇,将其分为大三阳组(54例)、小三阳组(25例)、HbsAg和HbeAg均阳性组(8例)及HbsAg和HbcAb均阳性组(9例)。另选取12例乙肝两对半全阴的产妇作为对照组。ELISA法检测乙肝病毒携带产妇乙肝免疫血清学标志物,实时荧光定量PCR法分别检测产妇血清与乳汁中HBV-DNA含量,并对所有检测指标进行相关性分析。结果大三阳组产妇血清和乳汁HBV-DNA阳性率明显高于其他三组(P<0.05)。乳汁HBV-DNA在各组中检出的阳性率均小于血清HBV-DNA,但两者差异无统计学意义(P>0.05)。根据乙型肝炎血清学标志物HBeAg是否阳性将96例产妇分为HBeAg阳性组(62例)和HBeAg阴性组(34例),血清HBeAg阳性产妇的血清和乳汁中HBV-DNA阳性率均明显高于HBeAg阴性产妇,差异具有统计学意义(P<0.01)。但一部分血清HBeAg阴性产妇血清和乳汁中HBV-DNA亦为阳性。产妇血清与乳汁中HBV-DNA含量呈正相关(r=0.891,P<0.05)。结论乙肝病毒携带产妇乳汁HBV-DNA检出的阳性率低于血清HBV-DNA,且乳汁HBV-DNA含量随血清HBV-DNA含量的升高而增大,因此定量双重检测产妇血清、乳汁中HBV-DNA来确定母婴乙肝病毒传播的风险性更为可靠,这将有利于阻断乙肝传播,确定哺乳方式,指导母乳喂养,从而降低乙肝新生儿感染率。

CHC患者HCV-RNA与自身抗体检测

目的研究对慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C,CHC)患者的自身抗体和丙型肝炎病毒(hepatitis virus C,HCV)进行检测,进而分析两者的相关性。方法选取2018年12月—2019年12月在我院治疗的144例CHC患者作为研究对象。对所有CHC患者进行自身抗体检测,包括抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)、抗可溶性肝抗原抗体(anti-soluble liver antigen antibody,SLA)、抗肝肾微粒体抗体-1(anti-hepatorenal microsomal antibody-1,LKMA-1)、抗肝细胞胞质1型抗体(anti-hepatocyte cytoplasmic type 1 antibody,LC-1)等,再检测患者的HCV-RNA,根据检测结果分析其相关性。结果在这144例CHC患者中,98例患者的自身抗体检测结果为阳性,阳性率为68.06%(98/144);HCV-RNA检测结果中,112例患者的自身抗体检测呈阳性,阳性率为77.78%(112/144);在HCV-RNA阳性患者中,ANA阳性率高于HCV-RNA检测呈阴性的患者(P<0.05)。结论HCV-RNA检测阳性CHC患者中,其ANA的阳性率更高,提示慢性丙肝患者的自身免疫反应和丙肝病毒复制能力具有一定相关性。

乙型肝炎患者不同突变谱的乙肝表面抗原水平变化

目的本研究旨在探讨乙肝表面抗原(HBsAg)滴度、HBV DNA水平与乙肝基因突变位点的相关性,确定耐药突变是否会影响HBsAg水平。方法本研究共纳入2843例患者。所有患者首先分为突变组和非突变组,然后根据突变位点将突变组分为M204I/V、L180M+M204V、L180M+M204I、A181T、N236T、A181T+N236T等组别。同时收集患者HBsAg、HBV DNA、肝功能和HBV基因分型等资料,采用t检验对正态分布数据进行组间比较,χ2检验用于分类数据的比较,pearson相关分析描述两个变量之间的相关性。结果耐药突变组与非突变组间HBV DNA水平差异有统计学意义(t=7.675,P<0.001)。非突变组和各突变组血清HBsAg滴度与HBV DNA水平呈正相关(非突变组:r=0.413,P<0.001;rtM204I/V:r=0.380,P<0.001;L180M+M204V:r=0.300,P<0.001;rtA181V:r=0.258,P=0.008;rtN236T:r=0.369,P=0.004),但rtL180M+rtM204I突变组和rtA181V+rtN236T突变组血清HBsAg滴度与HBV DNA水平无相关性。L180M+M204I突变组HBV DNA水平显著高于M204I/V和L180M+M204V突变组(t=-4.362,P<0.001;t=-3.763,P<0.001)。rtA181T+rtN236T突变组血清HBsAg滴度明显低于N236T单位点突变组(t=2.005,P=0.038)。结论HBV RT区不同变异影响HBsAg水平及其和HBV DNA的相关性。

抗病毒治疗对慢性HBV感染者外周血中PD-1和PD-L1的影响及其与血清HBV-DNA的关系

目的：探讨两种给药方案对慢性HBV感染者外周血中T淋巴细胞表面PD－1及其主要配体PD－L1的影响，以及其与血清HBV－DNA的关系。方法71例慢性HBV感染者按HBV－DNA载量不同分为＜3 lgIU／mL、3～6 lgIU／mL和＞6 lgIU／mL 3组，进入疗程后按照给药不同分为：拉米夫定组（LAM组）23例，拉米夫定＋阿德福韦酯联合治疗组（LAM＋ADV组）48例，分别于治疗的0、12和24周时，采用流式细胞仪检测患者外周血中CD4＋和CD8＋T细胞表面PD－1、PD－L1的表达，ELISA法检测外周血中γ－干扰素（ IFN－γ）的表达，同时检测HBV－DNA、肝功能、HBV血清学标志物等，并设立正常对照组26例。结果不同HBV－DNA载量患者的外周血中CD4＋和CD8＋T细胞表面PD－1、PD－L1的表达均明显高于正常对照组（ P＜0．05），且与HBV－DNA载量呈正相关（P＜0．05），而IFN－γ水平均明显低于正常对照组（P＜0．05）；抗病毒治疗后，两种治疗方案组患者的PD－1、PD－L1表达均有明显下降，除LAM组的CD4＋PD－L1＋外其他CD4＋和CD8＋T细胞表面的PD－1、PD－L1在治疗前与治疗12周和治疗24周均差异有统计学意义（ P＜0．05），其中LAM＋ADV组在降低的速度和幅度上均明显优于LAM组（P＜0．05）；IFN－γ的表达逐渐升高，至治疗24周时升至（24．55＆#177;5．81）pg／mL，明显高于治疗前（13．97＆#177;4．13）pg／mL（P＜0．05），但两治疗组间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论慢性乙型肝炎患者外周血中CD4＋和CD8＋T细胞表面PD－1、PD－L1的表达与HBV－DNA载量呈正相关，抑制HBV的复制可以有效地降低负性调控因子PD－1、PD－L1的表达；LAM＋ADV联合治疗方案对PD－1、PD－L1降低的速度和幅度明显优于LAM的单一用药，更易提高T淋巴细胞的活性。

慢性乙型肝炎肝衰竭患者外周血Th22细胞和IL-22的变化

目的:探讨Th22细胞和IL-22在慢性乙型肝炎肝衰竭患者外周血中的变化及其意义。方法:应用流式细胞术和ELISA分别检测20例慢性乙型肝炎肝衰竭患者、20例慢性乙型肝炎患者和20名健康体检者外周血中Th22细胞频数和IL-22浓度。结果:肝衰竭患者外周血Th22细胞频数和IL-22浓度均显著高于慢性乙型肝炎患者和健康对照组(均P <0.01); IL-22在慢性乙型肝炎患者中预测肝衰竭发生的ROC曲线下面积为0.753(95%CI:0.598～0.907),当临界值为32.80 pg/m L时,其诊断敏感性和特异性分别为80.0%和65.0%;肝衰竭患者外周血Th22细胞频数和IL-22浓度呈正相关(P <0.01),Th22细胞频数和IL-22浓度与肝衰竭患者总胆红素水平呈正相关(均P <0.05)。结论:IL-22可作为慢性乙型肝炎患者发生肝衰竭的一个预测指标,监测肝衰竭患者外周血中Th22细胞频数和IL-22浓度对肝脏损伤程度的判断具有一定意义。

血清免疫学检测在原发性胆汁性肝硬化诊断中的临床意义

目的探讨肝脏免疫学血清检测在原发性胆汁性肝硬化诊断中的临床意义。方法按照不同疾病分类,选取2017年6月至2019年7月我院收治的40例PBC患者为研究组,另选择慢性病毒性肝炎40例为对照组,所选患者均做血清免疫学及肝功能检测,并对所选患者的肝纤四项、血清免疫球蛋白等临床意义进行分析。结果研究组PBC患者的平均年龄、性别及并发症与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经血清免疫学原发性胆汁性肝硬化及肝功能指标情况分析,研究组的ALT、IgM、Ⅳ-c、HA、PCⅢ明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而AST、IgA、IgG、LN两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论探讨肝脏免疫学血清检测在PBC鉴别诊断中的临床意义,对患者早期风险评估及预后诊断有着重要的临床参考价值,值得进一步推广。

结核分枝杆菌耐药基因检测及临床应用

全球约有三分之一的人感染过结核分枝杆菌（TB），每年因结核分枝杆菌感染死亡的病例达100多万[1]。我国是结核病高负担国家，肺结核病患者达500万，占全球总数的1／4。耐多药结核分枝杆菌（MDR-TB）和广泛耐药结核分枝杆菌（XDR—TB）感染已经对结核病防控工作构成严峻挑战，全球每年880多万新发结核分枝杆菌感染病例中，约有65万感染MDR-TB，我国高达9．3％[2-3]。结核分枝杆菌耐药可以通过药物敏感试验和基因突变检测，前者检测表型耐药，后者检测基因型耐药。

肺结核患者外周血结核特异性TNF-α检测及意义

目的探讨肺结核患者外周血结核特异性CD4+和CD8+T淋巴细胞TNF-α表达及意义。方法分离活动性和潜伏性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs),分别与RPMI 1640(空白对照组)及结核分枝杆菌特异性抗原(重组蛋白组)共培养,应用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T淋巴细胞上的TNF-α和培养上清液中Th1/Th2类细胞因子的表达。结果活动性结核患者外周血结核特异性TNF-α+CD4+T细胞及TNF-α+CD8+T细胞的表达分别为(0.93±0.63)%和(0.46±0.36)%,与潜伏性结核患者的(0.67±0.48)%和(0.49±0.42)%相仿(P>0.05);Th1/Th2类细胞因子分泌结果检测显示,经结核特异性抗原刺激后,活动性与潜伏性结核感染患者IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10的分泌均较空白对照组增加(P<0.05),活动性结核患者TNF-α的分泌高于潜伏性结核感染(P<0.05)。结论肺结核患者外周血结核特异性TNF-α的表达对结核感染状态的判断具有一定价值。

慢性乙型肝炎病毒感染者血清IL-27表达水平的检测及意义

目的探讨IL-27在慢性乙型肝炎感染者外周血中的表达及临床意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)对61例慢性乙型肝炎(CHB)患者、51例肝硬化(LC)患者、29例肝细胞癌(HCC)患者及50例正常对照者血清IL-27表达水平进行检测。结果 CHB组、LC组及HCC组血清IL-27表达水平均显著高于正常对照组(P<0.001);LC组IL-27表达水平显著高于CHB组及HCC组(P<0.001);HBV感染者IL-27表达水平与TBil呈正相关;CHB组IL-27表达水平与ALT呈正相关;LC组IL-27表达水平与AST及TBil均呈正相关。结论 IL-27在慢性HBV感染者外周血中呈高表达,且在慢性HBV感染进程中与肝脏炎症损伤相关。

应用扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测HBV基因型

目的建立扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型方法，并对慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV基因型进行分析。方法通过对HBV全基因组序列比对分析，设计ARMS特异性引物和探针体系，建立检测HBVB和C基因型方法，对50例临床标本进行检测。结果50例临床样本中，B型的检出率为26％（13例），C型为74％（37例），其实验结果与测序结果完全一致。常州及周边地区乙型肝炎病毒C基因型HBV为优势株。C基因型患者A1762T／G1764A突变率为62％，明显高于B型。结论ARMS检测HBV基因型，快速、准确；常州及周边地区HBV基因型主要为B、C型，且C型携带A1762T／G1764A双突变率较高，与较为严重的肝病相关。