人羊膜间充质干细胞对松木屑烟雾溶液染毒大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖、凋亡及炎症因子影响的研究

背景烟雾吸入性肺损伤在烧伤患者中较为常见,吸入的有毒气体、颗粒等易引起急性肺损伤(acute lung injury,ALI),目前无特异性治疗方法。目的研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对松木屑烟雾溶液染毒大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells,AT-Ⅱ)增殖、凋亡及炎症因子的影响。方法采用酶消化法分离培养hAMSCs和AT-Ⅱ,采用流式细胞术和免疫荧光分别鉴定hAMSCs和AT-Ⅱ;松木屑烟雾溶液染毒AT-Ⅱ复制烟雾诱导的细胞损伤。实验细胞分为对照组(无血清DMEM/F12)、致伤组(0.75‰松木屑烟雾溶液染毒)和治疗组(0.75‰松木屑烟雾溶液染毒,hAMSCs与AT-Ⅱ共培养)。采用CCK-8检测细胞的增殖活性;Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡;Elisa检测炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6和IL-10的表达。结果与对照组比较,致伤组AT-Ⅱ的活性降低(P<0.01),经hAMSCs治疗后,与致伤组比较,AT-Ⅱ细胞活性增加(P<0.01);致伤组细胞的凋亡率在12 h和24 h均增加(P<0.01),hAMSCs治疗后细胞凋亡率降低(P<0.01);细胞致伤后炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10的含量增加(P<0.05),经hAMSCs共培养12 h和24 h后,促炎因子TNF-α和IL-6的表达均下调(P<0.05),IL-10含量增加(P<0.05)。结论hAMSCs可以促进松木屑烟雾溶液诱导的AT-Ⅱ增殖和抑制细胞凋亡,可能与调节炎症因子的表达有关,为探究hAMSCs治疗烟雾引起的急性肺损伤提供理论依据。

Rhopaladins类似物RPDPRO的绿色合成及抗肝癌活性研究

以3-对氯苯基丙烯醛、Z-2-溴甲基-3-苯基丙烯酸、对氟苯胺、环己基异腈为原料,以绿色、安全的乙醇/水作为混合溶剂,在pH值为4~6的条件下,通过Ugi 4C/S_(N)关环串联一锅法得到Rhopaladins类似物(2E,4E)-N-环己基-2-对氯苯乙烯基-1-对氟苯基-4-苄叉基-5-吡咯烷酮-2-酰胺(简称RPDPRO),其结构经^(1)H NMR、^(13)C NMR、EI-MS表征。并用MTT法检测了其对正常肝细胞和肝癌细胞的细胞毒性,流式细胞术检测了其对肝癌细胞凋亡的影响,结果表明Rhopaladins类似物RPDPRO对正常肝细胞的毒性较低,并且可以显著抑制肝癌细胞增殖并诱导其凋亡。

人羊膜间充质干细胞对松木屑烟雾诱导大鼠急性肺损伤的保护作用

目的探究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)对松木屑烟雾诱导大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法30只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组(大鼠在充满空气的自制烟雾实验设备中自由呼吸空气),模型组(大鼠在自制烟雾实验设备中吸入烟雾5 min/3次,建立大鼠ALI模型),治疗组(大鼠吸烟后,尾静脉注射1×10~6个hAMSCs),每组10只大鼠。3天后通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织病理变化,计算肺组织湿干重比(W/D),检测大鼠动脉血氧分压(arterial partial pressure of oxygen,PaO2)和二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO_(2))变化,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠肺组织中白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)含量,Western bolt检测剪切的半胱天冬酶3(Cleaved caspase-3)和B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织结构紊乱,出现水肿、出血和炎细胞浸润等病理变化,经hAMSCs治疗后,大鼠肺组织病理学变化明显减轻。模型组大鼠动脉血氧含量和Bcl-2的表达相较于对照组均显著降低(P<0.01),PaCO_(2)、W/D、IL-6、TNF-α和Cleaved caspase-3表达相较于对照组均显著升高(P均<0.01)。与模型组相比,治疗组大鼠PaO2显著增高(P<0.01),PaCO_(2)、W/D、IL-6、TNF-α和Cleaved caspase-3表达均显著降低(P均<0.05),但Bcl-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论hAMSCs可能通过抑制肺组织炎症反应和细胞凋亡减轻松木屑烟雾诱导的大鼠ALI。