阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响

为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的ENaCα亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaCα亚基基因,构建克隆质粒pMD19-T-ENaCα,对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮(aldosterone)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ),实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaCα亚基基因的表达情况,以确定ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性。结果显示,PCR扩增得到2.2kb的特异性条带,SmaⅠ和PstⅠ双酶切得到2.2和2.7kb的条带,表明重组质粒pMD19-T-ENaCα构建成功。实时荧光定量PCR结果显示,1×10^(-9) mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理的双峰驼肾皮质细胞的ENaCα表达量显著高于对照组(P<0.05);1×10^(-6)、1×10^(-7)和1×10^(-8) mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ表达量显著低于对照组(P<0.05)。本研究结果为揭示双峰驼水盐代谢的生理机制提供了试验依据。

涡虫肌肉系统再生研究进展

涡虫结构简单,具有极强的再生能力。再生,是指机体受损后,细胞、组织和器官的修复,并重建适当的组织极性、结构。在同一动物的不同组织中可以采用多种模式。当受到创伤后,涡虫的任意部位均可以再生出完整的个体。这种强大的再生能力是由neoblast介导的,neoblast是一种含有多能干细胞的增殖细胞群,具有异质性。涡虫具有明显的极性,受损后,严格按照前后轴、背腹轴、左右轴进行再生。涡虫有发达的体壁肌肉组织,在整个有机体内形成复杂的肌肉网络。涡虫的体壁肌肉细胞产生的位置信息基因(position control genes, PCGs),在再生过程中控制前后模式,对干细胞介导的组织替换和再生起着重要的指导作用。文章讨论了涡虫肌肉再生以及肌肉与极性基因之间的联系。