基于比较蛋白质组学研究参志苓片(开心散方)治疗抑郁症的分子调控机制

目的参志苓是经典抗抑郁古方开心散的中药成药制剂,本研究旨在从临床水平筛选参与抑郁和参志苓抗抑郁的作用靶点,进一步阐明相关分子作用机制。方法基于"参志苓片随机、双盲双模拟、阳性药平行对照治疗轻/中度抑郁症的有效性和安全性临床试验",采用非标记定量结合LC-MS/MS的方法,检测健康对照组、抑郁症组和参志苓治疗8周显效患者的血清样本,通过生物信息学分析和分子生物学方法,筛选并验证相关差异靶蛋白。基于蛋白谱提示,采用比浊法原理对参志苓体外抗血小板聚集活性进行评价,采用荧光分光光度法测定参志苓对凝血酶诱导的血小板Ca2+含量的影响。结果与健康对照组相比,抑郁患者组有31种蛋白质呈显著性差异表达(>1.5或<0.67倍,P<0.05),其中有12种蛋白质在参志苓给药8周后表现出反转表达趋势,组间差异具有显著性,其通路富集于血小板活化、补体和凝血级联等,VWF,SERPINA1,APOC3和A2M表达水平经验证与蛋白质谱一致。参志苓对多种诱导剂引起血小板聚集的抑制作用依次为凝血酶>ADP>胶原>花生四烯酸,参志苓150 mg·L^(-1)可显著降低凝血酶诱导血小板胞浆内Ca2+水平。结论参志苓抗抑郁的生物学途径与血小板活化、脂质代谢和免疫应答有关。基于临床水平蛋白质组学的发现,初步探讨了参志苓发挥抗抑郁作用的另一种可能机制—抑制凝血酶诱导的血小板活化,提示其参与了对抑郁患者心血管功能的调节作用,可能成为治疗双心疾病的潜在优选药物。

微小RNA在抑郁症及其临床药物治疗中的研究进展

抑郁症是一种以情绪低落、快感缺乏、认知和睡眠障碍为主要特征的情感性精神障碍。近年来研究显示具有调控功能的内源性非编码小RNA在动物模型和抑郁患者的组织及体液中表达异常,并在药物治疗应答、突触可塑性、神经元生成、认知和学习记忆功能等方面均起到关键作用,提示其可能在抑郁症的发生、发展和治疗中扮演着重要角色。基于microRNAs的转录组学研究在发现临床抑郁症生物标记物和潜在的药物靶标方面已取得进展,本文就此主题进行综述,以期为抗抑郁治疗药物研究提供参考。

定志小丸调控氧化还原系统干预5-羟色胺水平的研究

目的:研究抗抑郁中药定志小丸在抑郁动物模型和细胞模型上是否通过调控氧化还原系统干预5-羟色胺水平,进而发挥抗抑郁作用。方法:建立过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞、C6细胞和原代大鼠海马神经细胞模型,观察不同浓度定志小丸对细胞内MDA、ROS、SOD、CAT等水平的影响;建立慢性不可预知性应激大鼠模型,观察定志小丸对慢性不可预知性应激模型大鼠海马中5-HT的影响,及其对海马和血清中SOD和MDA水平的影响。结果:研究发现,100μg·m L^(-1)、200μg·m L^(-1)和500μg·m L^(-1)的定志小丸可显著升高SY5Y细胞和原代大鼠海马神经元细胞中SOD和CAT的活性,降低ROS水平和MDA含量(P<0.05);显著升高C6细胞中SOD活力,降低ROS和MDA的水平(P<0.05);定志小丸中剂量和高剂量可显著升高模型大鼠海马内5-HT水平及血清和海马中SOD活性,降低MDA含量(P<0.01)。结论:定志小丸对氧化还原系统有较强的调控作用,可能是其发挥抗抑郁作用的作用机制之一。

开心散类方对慢性应激大鼠行为学及中枢单胺类神经递质的影响

开心散类方治疗抑郁症的疗效已得到多项研究证实,为研究组方相同、配比不同的6个开心散类方对慢性应激大鼠大脑单胺类神经递质的影响,并结合类方的入血成分差异,比较其抗抑郁作用,探讨药效-配伍的关系及可能的药效机制。利用经典孤养结合慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁模型,并建立HPLC和UPLC-Q-TOF-MSE检测方法,研究大鼠海马和皮层单胺类神经递质(NE,DA,5-HT)的含量变化和部分类方的入血成分。结果显示,《备急千金要方》之定志小丸显著增加了模型大鼠的行为学得分,并且明显增加了模型大鼠海马NE,5-HT的含量以及皮层NE,DA,5-HT的含量,抗抑郁作用最显著;《古今录验》之定志丸明显增加了模型大鼠的糖水偏嗜度和旷场得分,显著增加了模型大鼠海马NE的含量以及皮层NE,DA,5-HT的含量,显示了一定的抗抑郁作用;《医心方》之开心散显著增加了模型大鼠的体重,明显增加了模型大鼠海马NE和皮层DA的含量;《千金翼》之补心汤明显增加了模型大鼠海马5-HT和皮层DA的含量;《医门方》之开心丸只显著增加了模型大鼠皮层DA的含量;《千金要方》之开心散未见抗抑郁作用。结果表明,类方抗抑郁作用的不同可能与入血成分的差异有关。

定志小丸对miR-16及5-HT重摄取的影响

该研究观察抗抑郁中药古方定志小丸（DZ）在体内外对miR-16表达水平的影响,从转录后调控的角度探索定志小丸升高5-羟色胺（5-HT）水平的机制。首先建立慢性不可预知中等强度温和刺激（CUMS）结合孤养抑郁大鼠模型,观察不同剂量定志小丸（600,300,150 mg·kg-1）给药3周后对抑郁大鼠行为学指标的影响,高效液相色谱法（HPLC）观察对海马5-羟色胺（5-HT）含量的影响,PCR和Western blot法观察定志小丸对CUMS大鼠海马miR-16及SERT表达水平的影响。并在体外培养的大鼠原代海马神经元细胞中观察定志小丸（10,100,200,500 mg·L-1）作用48 h后对miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤导致的细胞模型中miR-16及SERT mRNA表达水平的影响。结果显示,300,600 mg·kg-1定志小丸可显著改善CUMS大鼠行为学评分,升高大鼠海马内5-HT的水平,同时能够升高大鼠海马区miR-16的表达,降低SERT的表达。同时,在大鼠原代海马神经元细胞中,100,200,500 mg·L-1定志小丸可显著升高miR-16沉默和皮质酮/谷氨酸损伤模型细胞中miR-16的表达水平,并显著降低上述造模引起的细胞内SERT表达水平的升高。综上,笔者认为定志小丸可能通过上调miR-16表达水平,释放其对靶基因SERT的抑制作用,抑制5-HT的重摄取,进而升高脑内5-HT的水平,发挥抗抑郁作用。