溶磷性大豆根瘤内生菌的筛选、抗性及系统发育和促生

对采自河南省不同地区的大豆根瘤进行内生菌分离纯化、溶磷性筛选试验。根据能否产生溶磷圈及溶磷圈直径(D)、菌落直径(d)和D/d值大小确定菌株溶磷能力,采用钼锑抗比色法测定培养液中有效磷含量;平板筛选法对筛选菌株进行耐盐性、耐酸碱、重金属等抗性测定,并对筛选菌株进行理化特性、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析。结果表明,从分离纯化的324株内生菌中筛选出36株具有溶磷特性,其中20株有较强溶磷性。菌株DD291发酵液中可溶性磷含量最高(452 mg/L),发酵液p H与对照相比均有不同程度下降,最大降幅达2.92。大部分溶磷性内生菌具有较强耐盐碱性,对Pb2+、Cr6+和Cu2+有较高耐受性,对Ni2+和Hg2+抗性较弱。结合细胞形态、生理生化、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析结果,菌株确定为Bacillus cereus,Enterobacter cancerogenus,E.cloacae和Pseudomonas putida。部分溶磷菌株对大豆的生长有促进作用,显示出潜在的应用前景。

拟南芥RPT2与RIP1互作调节下胚轴向光弯曲的功能鉴定

拟南芥突变体rpt2-2表型类似于蓝光受体双突变体phot1phot2,缺失强蓝光诱导的下胚轴向光弯曲,不同于双突变体phot1rpt2-2下胚轴向光性正常,表明在RPT2上游存在受PHOT1抑制的旁路调节途径。本文以RPT2为诱饵蛋白进行酵母文库筛选,成功筛选到包括JAC1和PHOT1在内的6个与RPT2互作的蛋白(RIPs,RPT2InteractingProteins)。酵母互作验证显示,其中有4个蛋白可以与RPT2相互作用。表型分析显示基因RIP1对应的2个突变体rip1-1和rip1-2,发现rip1-1和rip1-2单突变体下胚轴向光弯曲正常,而rpt2-2 rip1-1和rpt2-2 rip1-2双突变体表型类似于phot1 rpt2-2双突变体,恢复拟南芥下胚轴向光弯曲反应,暗示RIP1蛋白可能调节PHOT1介导强蓝光抑制反应,分析鉴定蛋白RIP1的生物学功能将有助于揭示PHOT1介导强蓝光抑制反应的机制。

拟南芥子叶发育调节子SDM4的分离与鉴定

拟南芥种子储存的能源物质维持萌发后幼苗从异养到光合自养过渡起关键作用。目前关于种子萌发和幼苗建成时期储存物质的利用机理仍不清楚。本文通过EMS处理诱变拟南芥(Arabidopsis thaliana)种子,在无蔗糖培养基中筛选无法完成幼苗建成的疑似突变体,并将其转移到含蔗糖的培养基上进行恢复培养3 d移到营养土中培养,观察这些幼苗生长发育过程中出现的表型,并通过单株收种子进行表型遗传稳定验证。我们成功筛选并克隆到基因SDM4 (sucrose dependent mutant 4),测序证明是SCO1的等位基因突变。SDM4/SCO1基因的突变可导致拟南芥在无蔗糖培养基出现子叶白化和根生长抑制表型。在sdm4突变体中超表达SDM4/SCO1基因明显恢复突变体子叶变绿和根生长表型,表明SDM4/SCO1调节拟南芥种子萌发后子叶发育和幼苗根生长。