CAMI-STEMI、GRACE评分及WMR与STEMI患者PCI治疗后短期预后的相关性分析

目的 探讨中国心肌梗死注册登记研究-ST段抬高型心肌梗死(Chinese myocardial infarction registration study-ST segment elevation myocardial infarction,CAMI-STEMI)、全球急性冠状动脉事件注册(global acute coronary event registration,GRACE)评分及白细胞/平均血小板体积(white blood cell/mean platelet volume,WMR)与急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗后短期预后间的相关性。方法 回顾性分析STEMI患者92例的临床资料。采用多因素Logistic回归分析,明确STEMI患者PCI术后短期预后不良的危险因素。结果 根据PCI术后院内主要不良心血管事件(major adverse cardiovascular events,MACE)发生情况分为预后良好组(n=60)和预后不良组(n=32)。预后不良组患者ST段下移占比、CAMI-STEMI评分、GRACE评分和WRM水平[14(43.75%)、(6.37±2.15)分、(193.15±20.13)分和(1 654.21±150.54)×10^(-6)/L^(2)]显著高于预后良好组[14(23.33%)、(3.14±1.04)分、(139.23±18.57)分和(1 413.35±118.76)×10^(-6)/L^(2)],差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作曲线(ROC)分析显示,CAMI-STEMI、GRACE评分及WMR预测STEMI患者PCI术后短期预后不良的曲线下面积分别为0.967、0.959、0.912(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,ST段下移、CAMI-STEMI评分≥4.720分、GRACE评分≥165.605分、WMR≥1 555.770×10^(-6)/L^(2)为STEMI患者PCI术后短期预后不良的危险因素(P<0.05)。结论 STEMI患者PCI术后短期预后不良受ST段下移、CAMI-STEMI和GRACE评分及WMR水平影响,且均对STEMI患者短期预后具有较高的预测价值。

玉米籽粒直链淀粉含量的近红外透射光谱无损检测

以214份玉米样品为材料,利用近红外谷物分析仪对样品进行光谱扫描,并测定直链淀粉含量的参比数据,借助于WinISI软件,采用多种数学处理方法和不同的回归统计方法进行定标曲线的开发,优化得到了玉米籽粒直链淀粉含量测定的近红外定标方程,其中直链淀粉占总淀粉含量及直链淀粉占样品干重两个定标方程的定标标准偏差(SEC)、定标相关系数(RSQ)、交叉验证标准误差(SECV)和检验工作标准误差(SEP)分别为2.3201和1.2064、0.8860和0.8856、2.5896和1.3769、3.368和2.133。通过内部交叉验证和外部交叉验证及对其它的231份自交系、杂交种和高直链淀粉自交系进行预测,结果表明,近红外分析技术具有较高的准确度,能代替常规化学分析方法应用于玉米育种的早代材料直链淀粉含量的筛选,可作为高直链淀粉玉米育种的一种简便快速的无损筛选技术。

植物激素对大岩桐愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响

以大岩桐(Sinningia specioca)的幼嫩茎、叶片为外植体,通过正交实验的方法探讨不同浓度和比例的植物激素对愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响。实验结果表明:大岩桐愈伤组织的形成最佳激素组合为2,4二-氯苯氧乙酸2.0 mg/L+6苄-基嘌呤0.1 mg/L+萘乙酸0.3 mg/L;芽分化的最佳激素组合为6苄-基嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.1 mg/L。

石斛干品基因组DNA的提取与RAPD分析

市场中药干品的药性差异一直是影响中药标准化的瓶颈,而检测技术相对落后是导致这一现象的主要原因。DNA分子水平检测的困难是药材干品的基因组DNA难以提取。本文以铁皮石斛(Dendrobiumcandidum)干茎为材料,采用了四种方法从干品石斛中提取基因组DNA。结果表明,采用改良的CTAB法可从石斛干品尤其是干茎皮中提取质量较高的基因组DNA,其分子量大于23kb,以此DNA为模板进行不同引物的PCR扩增可获得清晰的RAPD条带。该研究初步建立了石斛干品合适的RAPD技术体系。

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。

玉米花粉粒直接PCR技术研究

利用成熟花粉粒制成悬液作为玉米基因组DNA模板直接进行PCR扩增 ,研究了不同花粉悬液浓度、花粉上清液对RAPD -PCR的影响。结果表明 :花粉悬液浓度在 4μg 5 0 μl以上 ,用 10碱基随机引物均能扩增出较清晰的PCR条带 ,且与叶片按改良Guidet法提取的DNA模板扩增的RAPD带型无明显差异 ,利用花粉悬液能有效地进行基因组DNA变异的RAPD分析和基因SCAR标记的检测。玉米单株花粉量可用于数百次以上的PCR反应 ,较叶片等植物组织用常规法提取DNA快速、简便、廉价 ,可有效地应用于以PCR为基础的植物基因组DNA变异、农艺性状的RAPD标记和分子标记辅助育种的研究。

激光辐照对离体质粒DNA的断裂效应

利用低功率的Ｈｅ－ Ｎｅ 激光辐照离体质粒ＤＮＡ，并用离子束和紫外线为对照，分析了质粒ＤＮＡ的单双链断裂效应。结果表明：Ｈｅ－ Ｎｅ 激光辐照可诱发质粒ＤＮＡ 断裂，且断裂频率随辐照剂量增大而提高；Ｈｅ－ Ｎｅ 激光辐照后的质粒超螺旋双链ＤＮＡ存活率剂量曲线不同于紫外线和氮离子束。Ｈｅ－ Ｎｅ 激光诱发双链断裂的频率低于氮离子束和紫外线。

玉米淀粉分支酶基因启动子的克隆及生物信息学分析

[目的]为了研究不同淀粉含量的启动子之间是否有差异及对直链淀粉合成途径是否有影响。[方法]以常规玉米叶片基因组DNA为模板,利用NCBI网站公布的高直链玉米淀粉分支酶基因(Zea mays starch branching enzyme IIb,SBEIIb)序列设计引物,通过PCR反应扩增出常规玉米淀粉分支酶基因的启动子序列,将该扩增片段与T载体连接后测序,并与高直链玉米淀粉分支酶基因启动子的序列进行比较分析。[结果]结果表明:玉米淀粉分支酶基因启动子与公布的启动子序列同源性高达99.3%,序列差异Pi值为0.007 16,该差异主要是SN(P单核苷酸多态性)和Inde(l插入/缺失)造成的,推测该差异可能会影响到淀粉分支酶基因的表达,是造成玉米直链淀粉含量差异的因素之一。[结论]该研究为深入了解玉米直链淀粉合成机理提供了重要依据。

He-Ne激光辐照对离体质粒DNA损伤及诱发lacZ基因突变的研究

利用低功率ＨｅＮｅ激光辐照离体质粒ＤＮＡ，分析了质粒ＤＮＡ的损伤效应和ｌａｃＺ基因的突变。结果表明ＨｅＮｅ激光低剂量辐照可提高质粒转化活性，随着剂量增加可引起ＤＮＡ结构显著损伤，导致质粒失活，同时可诱发ｌａｃＺ基因突变，其最高突变率可达１０．５８×１０－４，且突变率的剂量效应曲线可用Ｙ＝ａ＋ｂｘ＋ｃｘ２来描述。与紫外线辐照相比，ＨｅＮｅ激光对ｌａｃＺ基因的诱变效率低于紫外线。

脉冲电泳不同参数对介导GFP基因转化玉米种胚效果的研究

利用脉冲电泳介导绿色荧光蛋白(GFP)基因导入玉米种胚;以GFP基因在种胚中瞬时表达作为外源基因导入种胚细胞的标记,分析了外源DNA浓度、电泳时间、电压、电流转换时间等脉冲电泳转化参数对种胚发芽率和外源基因导入率的影响。结果表明:脉冲电泳时间对种胚发芽率和外源GFP基因导入率影响最大;通过脉冲电泳可将外源基因导入胚芽细胞,其GFP基因导入种子的频率与各电泳参数均呈二次曲线关系,300μg ml外源DNA浓度、120min电泳时间、5V电压、2s电流转换时间可作为脉冲电泳介导玉米种胚转化较适宜的参数。

杂交对猪肉蛋白质品质的影响

本文对皖南花猪、东北民猪、长白猪、长白Ｘ民猪和长白Ｘ皖南花猪商品肥育猪鲜肉蛋白质品质进行了测试和分析。结果表明，皖南花猪蛋白质构成与民猪有较大的差异；杂交使中国地方猪种蛋白质品质下降，尤其皖南花猪和长白猪杂交后蛋白质中必需氨基酸的比例明显下降（Ｐ＜０．０５）；杂种猪蛋白质品质更趋向于长白猪而不是地方猪种。

HKT1定位缺失突变体转化对受体酵母Na^+耐受性影响的研究

通过重叠延伸 PCR ( overlop extension PCR)技术对来自小麦根系的高亲和力的 K+运输载体HKT1的 c DNA进行定位缺失突变 ,分析了 HKT1及其缺失突变体 L1 4 9-E1 80和 E1 5 0 -L1 66转化酵母对受体Na+耐受性的影响。结果表明 ,HKT1缺失区段越大其对酵母的转化频率越高 ,缺失突变降低了 HKT1对 Na+的亲和性 ,显著提高了受体对 Na+ 的耐受性 ,且 L1 4 9-E1 80突变体对 Na+ 亲和性低于 E1 5 0 -L1 66,这表明 L1 4 9-E1 80区段在 HKT1中对

玉米对生性状两个显性基因SCAR分子标记

把与玉米对生叶突变体对生性状两个显性位点紧密连锁的RAPD标记S312 3 77与S36 0 60 2 成功地转化成SCAR标记CBJ1与CBJ2。对RAPD片段的纯化、T A克隆、SCARPCR引物的设计等SCAR标记转化进行了探讨 ,并对CBJ1与CBJ2进行了验证 ,为对生玉米的分子标记辅助选择与定位克隆奠定了基础。

微波预处理对水稻秸秆糖化率与成分和结构的影响

利用微波辐照对水稻秸秆进行预处理,研究了优化条件下以水为媒介的微波辐照对秸秆酶解糖化率及酶吸附能力的影响。通过预处理前后秸秆主要化学成分的变化,以及FTIR、XRD和AFM对其表面形貌结构的表征,研究了微波促进水稻秸秆酶解的机制。结果表明:微波辐照可以破坏水稻秸秆表面特殊的'角质-双硅层'结构和木质素-半纤维素复合体,去除部分硅和木质素含量,因此能有效减少秸秆对酶的吸附,同时提高纤维素酶的酶解效率。

苜蓿全基因组WRKY转录因子基因的分析

蒺藜苜蓿的基因组较小,遗传转化相对容易,是国际上广泛用于研究豆科植物的模式植物,其全基因组测序已经完成。WRKY转录因子是近年来在植物中发现的N-端含有WRKYGQK高度保守氨基酸序列的新型转录调控因子,调节启动子中含W-box元件的调节基因和(/或)功能基因的表达,从而参与植物的各种防卫反应。本研究以苜蓿基因组序列(Mt2.0)为材料,利用生物信息学方法分析苜蓿全基因组WRKY转录因子基因的数目、种类、系统发生学、保守基序,结果表明,苜蓿中共有28个WRKY基因,其中5个基因含有2个WRKY结构域,共含有33个WRKY结构域,根据其结构域特点可以分为3个大类,同时与水稻WRKY基因进行了比较研究,发现基因数目远少于拟南芥和水稻,同时研究证实苜蓿与水稻WRKY基因的起源和进化关系存在较大差异,显示出苜蓿WRKY进化有其独特的特点,此外分析苜蓿WRKY基因的保守motif共有46个,筛选得到WRKY结构域的5个保守motif。该研究对苜蓿WRKY基因功能的研究及进化具有重要的意义。

RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响

为探讨RNA干扰水稻SBE3基因的表达对籽粒淀粉合成及其关键酶活性的影响,以水稻品种中花11及以其为受体的转基因株系为材料,分别检测水稻SBE3基因的表达、籽粒发育各时期淀粉合成关键酶活性变化及直链、支链淀粉相对含量。结果表明,导入的SBE3基因RNA干扰结构成功地降低了目的基因的表达,并使其酶活性在籽粒发育各时期均显著降低并提前3d达高峰期,且不同株系间具有差异。同时也使不同发育时期籽粒的ADPG-PPase和SSS及DBE活性均不同程度地显著降低,尤其以SSS和ADPG-PPase活性峰值降幅最大。此外,两个转基因水稻株系各时期籽粒直链淀粉含量均显著高于对照,而其成熟籽粒千粒重却显著降低,直链淀粉含量越高,千粒重越低。

高粱生长素反应因子(ARF)基因的全基因组分析与进化研究

生长素在植物发育中的各个阶段都起着重要作用,而生长素反应因子(auxin response factors,ARF)特异性的调节生长素反应基因的表达,是植物细胞中重要的一类转录因子家族。在拟南芥、玉米、水稻等模式作物中先后克隆了一些ARF基因,但是高粱作为一种重要的经济作物,这方面的研究未见报道。随着高粱全基因组序列的公布,利用基因组序列分析ARF基因的数目、结构、进化具有重要的意义。利用公布的高粱全基因组数据,利用DNATOOLS、BLAST、MEGA4.0以及Genomepixelizer等生物信息学软件对高粱(Sorghum bicolor)生长素反应因子ARF基因的数量、物理位置、系统进化树、氨基酸序列及保守基序(motif)的保守性等进行分析。结果表明,在高粱全基因组中共有26个ARF基因,26个ARF基因根据其进化关系分为A、B、C 3类;通过对全基因组内ARF基因进行物理位置和基因家族分析,发现高粱基因组中ARF基因存在明显的基因复制现象,基因的复制对高粱基因组中ARF基因数量扩张起到了重要的作用。

玉米自交系B73全基因组NBS类型抗病基因分析

核苷酸结合位点(NBS)类型抗病基因是植物抗病基因中最大的一个类别,也是近年来植物抗病分子育种研究的一大热点。本研究对玉米自交系B73全基因组中含有NBS结构的候选抗病基因进行了基因总数、类型、系统进化关系等分析。在B73全基因组中含有165个NBS结构的基因,远远少于水稻中的同类基因,按照N-端结构和亮氨酸富集区(LRR)结构,将其分为153个标准结构和12个非标准结构NBS基因。其中,标准结构基因又分为CC-NBS-LRR、CC-NBS、NBS、NBS-NBS、NBS-LRR、NBS-NBS-LRR、NBS-X、X-NBS等8个类型。系统进化树分析表明,NBS类型抗病基因存在明显的两大分支,与水稻的星状发散型分布有很大差异。通过基因家族分析,还发现了玉米NBS类型基因的复制现象,但发生复制的基因比例低于水稻,可能是造成玉米NBS抗病基因数目较少的原因之一。

外源细胞分裂素对玉米叶原基分化类型的调控

以互生玉米自交系H4d、8701d为材料,取自交授粉12d的幼胚,分别在含不同浓度6-BA的脱分化培养基上诱导愈伤组织,筛选II型愈伤组织,分别转入0～3mgL-16-BA浓度梯度的分化培养基上诱导出芽。芽点出现时,在解剖镜下剥离顶端分生组织,电镜扫描观察叶原基形态,并用ELISA反应测定顶端分生组织细胞分裂素6-BA、ZRs、DHZRs、iPAS和生长素IAA、NAA含量。结果表明,外源细胞分裂素6-BA可调控互生基因型玉米材料幼苗叶原基转换为对生甚至畸形叶原基类型,6-BA浓度越高、处理越早,出现对生叶原基、畸形叶原基的频率越高。ELISA反应显示,生长点激素含量的改变是外源激素的吸收累积造成的,内源细胞分裂素的含量并未明显改变,在互生基因型下通过增加外源细胞分裂素6-BA提高细胞分裂素/生长素值可导致叶原基分化类型向对生、畸形类型转换,解除外源激素作用后,生长点细胞分裂素/生长素值的恢复导致叶原基分化类型返回原始基因型类型。这进一步证实生长点细胞分裂素/生长素是决定玉米叶原基分化类型的关键因素。

玉米种子基因组DNA提取及RAPD分析

采用了两种不同DNA提取方法(常规法及改进法)从玉米Zeamays种子的胚和胚乳中分别提取基因组。结果表明,在两种不同的提取方法中,改进法比常规法有提取的DNA纯度高、RNA含量少、DNA降解少等优点。无论从胚和胚乳中提取的DNA都可以满足RAPD的要求。为玉米RAPD,分子标记,品质鉴定等研究提供可行的依据。