发菜胞外多糖硫酸化条件的优化及红外光谱分析

液体培养发菜细胞,发菜细胞经去藻体、浓缩、透析、脱蛋白、醇沉、DEAE-52离子交换柱层析分级、Sephadex-100葡聚糖凝胶柱分级处理得到发菜胞外精多糖。以硫酸根的取代度为指标,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken设计进行响应面试验,建立因素与响应值之间的数学模型,确定适宜的发菜胞外多糖硫酸化条件。结果表明,发菜胞外多糖硫酸化修饰最佳条件为反应温度71℃、反应时间3 h、氯磺酸-吡啶体积比1∶7,在此条件下,硫酸化取代度为5.05。红外光谱检测表明,硫酸基团已与多糖分子结合。

人工液体培养发菜与野生发菜营养成分比较

为了合理开发利用人工培养发菜,比较分析了人工液体培养发菜和野生发菜的营养成分。通过高效液相色谱(HPLC)、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)、苯酚硫酸、凯氏定氮和索氏抽提法测定了2种发菜的Ca、Mg、Cu、Zn、Sr、Fe、Se元素、氨基酸、粗多糖、蛋白质、脂肪的含量。结果表明:人工液体培养发菜中粗蛋白、脂肪含量分别为26.17%、0.23%,而野生发菜中为23.05%、0.31%;人工培养发菜的胞外多糖含量为36.95 mg/L,人工培养发菜与野生发菜的荚膜多糖含量分别为15.03 mg/kg和13.84 mg/kg,氨基酸总量分别为21.99 mg/g和21.20 mg/g,其中必需氨基酸含量分别为11.73 mg/g和7.97 mg/g。人工培养发菜的Mg、Cu、Zn、Se含量优于野生发菜,分别是野生发菜的2.9、3.4、3.8、1.6倍。综合分析认为,人工液体培养发菜能分离较多的胞外多糖;粗蛋白、脂肪、荚膜多糖、氨基酸和Ca、Sr、Fe元素含量与野生发菜相近。

悬浮培养发状念珠蓝细菌对盐碱胁迫的生理应答研究

天然发状念珠蓝细菌是荒漠化土壤中的"先锋生物",具有极强的耐旱、耐碱、耐高温等能力。本研究旨在揭示悬浮培养发状念珠蓝细菌的抗盐碱能力,为发状念珠蓝细菌的人工培养提供基础。25℃,80μmol/(m2·s)光照下,BG-11培养液培养发状念珠蓝细菌,利用不同浓度(0、60、120、180、240 mmol/L)混合的Na2SO4和Na2CO3胁迫发状念珠蓝细菌细胞,处理时间分别为24 h和72 h,测定其质膜透性、超氧化物歧化酶活性、丙二醛、脯氨酸、可溶性蛋白以及可溶性多糖含量,分析发状念珠蓝细菌细胞对盐碱胁迫的响应。盐碱胁迫下,随着胁迫程度的加重,发状念珠蓝细菌细胞的质膜相对透性增加,丙二醛含量上升;超氧化物歧化酶活性和脯氨酸含量先上升后下降;可溶性蛋白含量逐渐下降;可溶性多糖含量不断升高。悬浮培养的发状念珠蓝细菌细胞对盐碱胁迫产生结构和生理的应激响应,增强了发状念珠蓝细菌抗盐碱能力。