急性呼吸窘迫综合征中肺水肿液产生机制的基础研究进展

急性呼吸窘迫综合征（acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS）是临床面临的普遍难题，也是基础研究的热点，但其发病机制至今仍未完全阐明。研究证实，肺血管内皮细胞损伤导致的肺水肿液生成增多和肺上皮细胞损伤导致的肺水清除障碍是引起ARDS低氧血症的重要原因之一。对此，本文主要综述了近几年文献报道与ARDS肺水肿液产生机制有关的信号通路及其靶点，以期为ARDS新药研发和救治提供理论支持。

环状RNA在肺部疾病中的研究进展

肺部疾病是临床常见病,其发病率逐年升高且治疗难度日益增大,严重威胁人类的生命健康。高通量测序和基因芯片技术的长足发展使得被学术界忽略已久的环状RNA(circRNA)再度成为研究热点。CircRNA在生物体内均有广泛表达,对生物功能发挥着重要的调控作用,并具有高度的特异性、稳定性和保守性,在疾病的诊疗方面潜力巨大。本文总结了circRNA在肺部疾病中的研究进展,为肺部疾病的诊治提供一定的理论依据。

临床医学专业学位研究生科研能力培养的思考

临床医学专业学位研究生由于侧重于临床能力的锻炼,易忽视科研能力的培养,存在“临床强,科研弱”的现象。然而,科研能力是研究生必不可少的基本科学素养,是影响研究生未来发展的重要因素。文章针对导致专业学位研究生科研弱的潜在因素进行分析,结合多年的各个类型研究生的培养经历,从具体实施方式上对临床专业学位研究生科研能力培养提出几点建议。

类器官肺损伤疾病模型构建及应用的研究进展

肺类器官是由成体干细胞或多能干细胞在3D培养条件下形成的具有一定空间结构的组织类似物,能够在一定程度上模拟人体组织的结构和功能。目前,肺类器官已开始应用于肺损伤疾病模型的构建,特别是在吸入性肺损伤和由感染性疾病导致的肺损伤中成为研究热点。本文对近年来类器官肺损伤疾病模型构建和应用的研究进展进行综述,以期为更多肺损伤模型的构建提供启发。

肺类器官模型检测方法研究进展

肺类器官是由成体干细胞或多能干细胞在三维培养条件下形成的具有一定空间结构的组织类似物,正逐渐成为研究肺发育和肺部疾病的新工具。肺类器官是近年来生物医学研究领域的重大突破之一,目前已成功地在体外重现了肺部细胞及其微环境的复杂性。作为一种新型模型,肺类器官在肺发育和肺疾病研究中具有巨大的潜在应用价值。然而,肺类器官检测方法并不完善和统一,这有可能对肺类器官技术的广泛应用带来一定的障碍。因此,本文对近年来肺类器官常用的结构与功能有关检测方法进行了综述,以期为肺类器官应用提供参考。

过表达膜联蛋白A1的人脂肪间充质干细胞治疗急性呼吸窘迫综合征小鼠的效果及其机制

目的探索过表达膜联蛋白A1(ANXA1)的人脂肪间充质干细胞(AMSC)治疗急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠的效果及其机制。方法采用实验研究方法。采用流式细胞术鉴定成人AMSC后,取第3代细胞进行后续实验。采用随机数字表法(分组方法下同),将细胞分为转染含ANXA1基因RNA序列的质粒的过表达ANXA1组、转染对应空载质粒的空载对照组,另取细胞分为转染含ANXA1基因小干扰RNA序列的质粒的敲减ANXA1组、转染对应空载质粒的空载对照组,转染后72 h,于荧光显微镜成像系统下观察荧光表达情况,分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测ANXA1的蛋白和mRNA表达(样本数均为3)。取50只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,分为假伤组、单纯ARDS组、正常细胞组、过表达ANXA1组、敲减ANXA1组,每组10只。将后4组小鼠均用内毒素/脂多糖制成ARDS肺损伤模型,假伤组小鼠模拟致假伤。伤后即刻,假伤组、单纯ARDS组小鼠均经尾静脉注射生理盐水,正常细胞组、过表达ANXA1组、敲减ANXA1组小鼠对应注射正常AMSC、过表达ANXA1的AMSC、敲减ANXA1的AMSC。注射后24 h,取每组5只小鼠,行伊文思蓝染色观察右肺组织大体染色情况,采用酶标仪检测左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液的吸光度值,了解肺血管通透性。注射后3 d,取各组剩余5只小鼠,取右肺组织,行苏木精-伊红染色观察病理学变化,行免疫组织化学染色观察CD11b和F4/80阳性巨噬细胞情况;采用酶联免疫吸附测定法检测左肺BALF上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平。对数据行配对样本t检验、单因素方差分析与LSD检验。结果转染后72 h,过表达ANXA1组与敲减ANXA1组AMSC均分别较对应空载对照组AMSC表达更高强度的荧光。转染后72 h,与对应空载对照组比较,过表达ANXA1组AMSC中ANXA1蛋白与mRNA表达均明显增多(t值分别为249.80、6.56,P<0.05),敲减ANXA1组AMSC中ANXA1蛋白与mRNA表达均明显减少(t值分别为176.50、18.18,P<0.05)。注射后24 h,与假伤组(BALF上清液的吸光度值为0.041±0.009)比较,单纯ARDS组小鼠肺组织明显蓝染且BALF上清液的吸光度值(0.126±0.022)明显升高(P<0.05);与单纯ARDS组比较,正常细胞组、过表达ANXA1组小鼠肺组织蓝染程度明显减轻且BALF上清液的吸光度值(0.095±0.020、0.069±0.015)明显降低(P<0.05),敲减ANXA1组小鼠肺组织蓝染程度与BALF上清液的吸光度值(0.109±0.016,P>0.05)无明显变化;与正常细胞组比较,过表达ANXA1组小鼠BALF上清液的吸光度值明显降低(P<0.05)。注射后3 d,单纯ARDS组小鼠肺组织结构较假伤组明显损伤;与单纯ARDS组比较,正常细胞组和过表达ANXA1组小鼠肺组织出血、炎症细胞浸润、肺泡萎陷及间质增宽程度等改变均明显减轻,敲减ANXA1组小鼠前述肺组织表现未明显改善。注射后3 d,单纯ARDS组小鼠肺组织中CD11b和F4/80阳性巨噬细胞数量均较假伤组明显增多;与单纯ARDS组比较,正常细胞组、过表达ANXA1组、敲减ANXA1组小鼠肺组织中CD11b和F4/80阳性巨噬细胞数量均减少,以过表达ANXA1组减少最明显。注射后3 d,与假伤组比较,单纯ARDS组小鼠BALF上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著升高(P<0.05);与单纯ARDS组比较,正常细胞组、过表达ANXA1组小鼠BALF上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平以及敲减ANXA1组小鼠BALF上清液中IL-1β水平均明显降低(P<0.05);与正常细胞组比较,过表达ANXA1组小鼠BALF上清液中TNF-α水平明显降低(P<0.05),敲减ANXA1组小鼠BALF上清液中TNF-α水平明显升高(P<0.05)。结论过表达ANXA1可以优化AMSC在ARDS治疗中的效果,增强该类细胞抑制炎症反应和改善肺血管通透性的作用,进而缓解ARDS小鼠的肺损伤。

微小RNA对急性肺损伤或急性呼吸窘迫综合征病理作用的研究进展

急性肺损伤(ALI)或急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是肺内外多种原因引起的,以顽固性低氧血症为特征的临床综合征。其发病机制复杂,是危重症治疗的难题。研究证实ARDS的病理改变以肺泡血管通透性增加,间质水肿,肺泡炎性细胞浸润为主。微小RNA(micro RNA)是一种非编码RNA,在多个信号通路和细胞过程中发挥重要调控作用。目前微小RNA在ARDS的发病过程中作用的研究尚处于起步阶段。本文对micro RNAs在ARDS发病中肺泡上皮屏障改变、血管通透性变化和炎症改变的影响进行综述,为进一步研究ARDS的早期诊断和预后判断提供新的思路。

环状RNA在急性肺损伤发病机制中的研究进展

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是各种直接和间接致伤因素导致的肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞损伤,造成弥漫性肺间质及肺泡水肿,导致的急性低氧性呼吸功能不全。临床上ALI的严重阶段常发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),患者常以顽固性低氧血症、高碳酸血症、通气血流比例失调为临床特征。

266例合并烧伤总面积小于30%体表总面积的吸入性损伤患者的流行病学特征及结局分析

目的探讨合并烧伤总面积<30%体表总面积(TBSA)的吸入性损伤患者的流行病学特征及治疗结局。方法对2008年1月—2016年12月海军军医大学第一附属医院收治的符合入选标准的266例合并烧伤总面积<30%TBSA的吸入性损伤患者的病历资料进行回顾性观察性研究。统计患者的性别、年龄、受伤地点、吸入性损伤致伤因素、吸入性损伤严重程度、合并烧伤总面积、气管切开情况、气管切开时间、机械通气情况、是否入住重症监护病房(ICU)、支气管肺泡灌洗液微生物培养结果、总住院天数、住ICU天数、机械通气天数、呼吸道感染情况。采用单因素和多因素线性回归分析筛选影响患者住ICU天数、总住院天数、机械通气天数的危险因素。采用单因素和多因素logistic回归分析筛选影响患者呼吸道感染的危险因素。结果266例患者中男190例、女76例,年龄主要集中在≥21岁且<65岁(217例),常见的受伤地点是密闭空间,吸入性损伤最常见致伤因素是热空气,轻度和中度吸入性损伤较为常见,合并烧伤总面积为9.00%(3.25%,18.00%)TBSA。在111例接受气管切开术的患者中,大部分患者在被送至海军军医大学第一附属医院前接受了气管切开术。本组患者总住院天数为27(10,55)d,160例入住ICU患者住ICU天数为15.5(6.0,40.0)d,109例行机械通气患者机械通气天数为6.0(1.3,11.5)d。119例患者在住院期间发生过呼吸道感染,检出了548株共35种病原体,以革兰阴性菌为主。单因素线性回归分析显示,年龄、吸入性损伤致伤因素、合并烧伤总面积、吸入性损伤严重程度(中度和重度)、气管切开情况、机械通气情况和呼吸道感染情况是患者总住院天数的影响因素(β=-0.198、-0.224、0.021、0.127、0.164、-0.298、0.357、0.447,95%置信区间=-0.397~-0.001、-0.395~-0.053、0.015~0.028、0.009~0.263、0.008~0.319、-0.419~-0.176、0.242~0.471、0.340~0.555,P<0.1)。多因素线性回归分析显示,行机械通气、有呼吸道感染是影响患者总住院天数的独立危险因素(β=0.146、0.383,95%置信区间=0.022~0.271、0.261~0.506,P<0.05或P<0.01)。单因素线性回归分析显示,吸入性损伤致伤因素、合并烧伤总面积、吸入性损伤严重程度(中度和重度)、气管切开情况(未行气管切开术、预防性气管切开术)、机械通气情况、呼吸道感染情况是患者住ICU天数的影响因素(β=0.225、0.008、0.237、0.203、-0.408、-0.334、0.309、0.523,95%置信区间=0.053~0.502、0.006~0.010、-0.018~0.457、-0.022~0.428、-0.575~-0.241、-0.687~-0.018、0.132~0.486、0.369~0.678,P<0.1)。多因素线性回归分析显示,有呼吸道感染是影响患者住ICU天数的独立危险因素(β=0.440,95%置信区间=0.278~0.601,P<0.01)。单因素线性回归分析显示,受伤地点、吸入性损伤致伤因素(烟雾、化学气体)、合并烧伤总面积、吸入性损伤严重程度(中度和重度)、气管切开情况(未行气管切开术、预防性气管切开术)、呼吸道感染情况是患者机械通气天数的影响因素(β=-0.300、0.545、0.163、0.005、0.487、0.799、-0.791、-0.736、0.300,95%置信区间=-0.565~-0.034、0.145~0.946、0.051~1.188、0.001~0.009、0.127~0.847、0.436~1.162、-1.075~-0.508、-1.243~-0.229、0.005~0.605,P<0.1)。多因素线性回归分析显示,吸入烟雾、重度吸入性损伤、有呼吸道感染是影响患者机械通气天数的独立危险因素(β=0.210、0.495、0.263,95%置信区间=0.138~0.560、0.143~0.848、0.007~0.519,P<0.05或P<0.01)。单因素logistic回归分析显示,年龄、受伤地点、合并烧伤总面积(10%~19%TBSA、20%~29%TBSA)、吸入性损伤严重程度(中度和重度)、气管切开情况(预防性气管切开术、未行气管切开术)、机械通气情况是患者呼吸道感染的影响因素(比值比=1.079、0.815、1.400、1.331、1.803、1.958、0.990、0.320、3.094,95%置信区间=0.840~1.362、0.641~1.044、1.122~1.526、1.028~1.661、1.344~2.405、1.460~2.612、0.744~1.320、0.241~0.424、2.331~4.090,P<0.1)。多因素logistic回归分析显示,行机械通气是影响患者呼吸道感染的独立危险因素(比值比=4.300,95%置信区间=2.152~8.624,P<0.01)。结论合并<30%TBSA烧伤总面积的吸入性损伤人群以中青年男性为主。影响合并烧伤总面积<30%TBSA的吸入性损伤患者院内结局的因素包括吸入烟雾、吸入性损伤严重程度、行机械通气、有呼吸道感染。此外,预防性气管切开术在降低中度或重度吸入性损伤患者呼吸道感染中有潜在价值。

肺类器官在肺上皮细胞修复和再生医学中的研究进展

肺的上皮细胞组成肺内机械屏障并参与气体交换。其中,部分上皮细胞具有干细胞潜能,被认为是肺上皮干细胞,在维持肺内稳态和修复受损上皮细胞中发挥重要作用。类器官由多能干细胞或成体干细胞体外三维培养而来,其结构和功能与来源组织或器官高度相似,并且能自我更新和增殖分化。其中,肺类器官能体外模拟肺的上皮细胞结构和功能,为研究肺上皮干细胞修复上皮细胞提供理想模型,也为肺的再生医学领域提供理想移植物。本文围绕肺类器官,归纳肺上皮干细胞修复上皮细胞所涉及的机制,同时概括肺类器官在再生医学中的应用,以期为肺部疾病的治疗提供相关参考。

单细胞测序技术在肺部疾病中的研究进展

肺部疾病是中国常见疾病,根据中国肺健康研究结果,中国慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)发病率逐年上升,20岁以上的COPD患者已接近1亿人^([1]);哮喘发病率也呈上升趋势,根据中国肺健康研究并按照2015年全国人口普查数据推算,哮喘总体患病率达4.2%,患者总数达45700万人^([2])。

间充质干细胞治疗吸入性损伤的动物实验研究进展

吸入性损伤是由热力及吸入化学物质引起的呼吸道和肺实质的损伤,作为烧伤三大主要死亡原因之一,病死率较高,临床上尚无特异有效的治疗方法。间充质干细胞具有归巢、促进增殖、抗细胞凋亡、自分泌与旁分泌、抗炎与免疫调节等作用。文章主要综述了不同组织来源的间充质干细胞治疗吸入性损伤的动物实验研究,表明间充质干细胞可以通过多种途径减轻吸入性损伤,提高治疗效果,改善疾病预后,是具有较好临床应用前景的治疗选择。