高校研究生实验室安全员机制的构建

研究生是高校研究型实验室、机构、研究所里最重要的成员,他们不仅是研究项目最主要的实施者和执行者,也是这些实验场所里最前线的工作人员。研究生中的传帮带教学和指导一直是一种优良传统。结合这些因素,教师应发挥研究生的优点,设计、建立合理有效的研究生实验室安全员机制和工作流程,完善实验室安全管理架构,在锻炼他们能力的同时,也让他们成为守护实验室安全的一分子,为完善和提高实验室安全管理的整体水平提供更有力的支撑。

组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制

目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P<0.05)。PAα细胞株的tTG、EGFR转录水平为A549细胞株的650.68(P<0.05)和34.4(P<0.001)倍。PAα细胞株的tTG、p-EGFR表达水平高于A549细胞株,MMP-2的转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。

白细胞介素-1β在获得性耐肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的肺癌H460迁移中的作用

目的:探讨高水平IL-1β和获得性耐肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的肺癌H460细胞迁移的相互作用。方法:通过RT-PCR,Western Blot和酶联免疫吸附试验检测H460-TR和野生型H4608(H460-WT)中IL-1β的水平;通过细胞迁移实验检测细胞迁移能力;通过对H460细胞施加或不施加IL-1或者IL-1R的拮抗剂检测人重组磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)的迁徙范围和活性。结果:在条件培养基中的H460-TR细胞的迁徙能力和其IL-1β水平高于H460-WT细胞。肺癌H460细胞的迁徙徙能力和Akt活性和IL-1β水平一致。结论:癌症细胞中IL-1β的显著升高与H460-TR的高迁徙能力以及Akt活性是相互关联的。Akt信号是IL-1β的下游通路,IL-1β可能可以作为转移性肺癌的药物作用靶点。

日本血吸虫TGF-β1成熟肽编码序列的克隆、表达及其转录水平

目的获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)成熟肽基因的DNA,进行原核克隆和表达,并比较它与Sj26kd的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)在成虫和虫卵期的转录水平。方法根据美国国立生物信息学中心(NCBI)上登录的小鼠TGF-β1基因的全长序列,设计两条位于保守区的寡核苷酸作为引物,利用RT-PCR从日本血吸虫成虫的mRNA中扩增SjTGF-β1基因的部分序列,并利用生物信息学进行分析和鉴定。克隆SjTGF-β1成熟肽基因的cDNA到原核表达载体pGEX-6p-3,将重组载体转化大肠杆菌BL21株并诱导表达。利用RT-PCR半定量分析SjTGF-β1基因与Sj26GST基因在成虫和虫卵期的转录水平。结果成功获得并构建了SjTGF-β1成熟肽基因的原核表达载体。融合表达后的重组融合蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为35000,与目的基因编码蛋白的预测分子量相符。SjTGF-β1在成虫与虫卵期的转录水平都低于Sj26GST基因,但虫卵期的转录水平比成虫高。结论SjTGF-β1成熟肽基因的获得为其编码序列全长的获得奠定了基础;重组融合蛋白的成功表达为进一步的功能研究提供保障;虫卵期该基因的转录水平高提示该基因在血吸虫虫卵与宿主的相互作用中可能具有一定的作用。

脂蛋白脂酶PvuⅡ位点多态性与老年人群血脂的相关分析

目的:探索脂蛋白脂酶的PvuⅡ位点基因多态性与老年人群血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测119名来我院体检的退休干部的脂蛋白脂酶基因内含子6上的PvuⅡ多态性,并分析其与血脂的相关性。结果:P+/P+基因型与三酰甘油正相关,P+/P-基因型与高密度脂蛋白正相关,P-/P-与低密度脂蛋白正相关。结论:LPL-PvuⅡ基因多态性与老年人群血脂有一定的关联。

广州管圆线虫在长爪沙鼠体内的发育及其引起的病理损害

目的观察广州管圆线虫在长爪沙鼠体内的发育及其引起的病理损害。方法以广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫经腹腔注射感染成年长爪沙鼠（10条幼虫／鼠），感染后不同时间检查脑、心肺组织内的虫体，肉眼观察和病理切片检查脑、肺组织，于感染后第46d采用直接涂片法检查粪便。结果从感染的长爪沙鼠脑和心肺组织共检获虫体127条（♀62／♂65），平均虫数为（3．63±1．46）／鼠，感染后第23－30d，检获虫体数最多；虫体在感染后30d内主要分布在脑，30d后主要分布在肺；幸存的长爪沙鼠大多数广州管圆线虫能在其肺中发育至成虫并产卵，同时在部分沙鼠粪便中检查到Ⅰ期幼虫；病理结果显示蛛网膜下腔可见虫体，肺内有虫卵，广州管圆线虫从脑移行至肺导致嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和肉芽肿性肺炎。结论广州管圆线虫可在长爪沙鼠体内发育成熟并造成脑和肺组织的损害。

日本血吸虫感染小鼠肝脏Toll样受体2和6的表达变化

目的探讨日本血吸虫感染小鼠肝内Toll样受体1(Toll-like receptor 1,TLR1)、TLR2和TLR6的表达变化。方法 50只BALB/c小鼠经腹部皮肤贴片法感染日本血吸虫尾蚴(20±3)条,分别于感染后5、6、8和12周各剖杀10只,收集小鼠肝脏。另10只鼠感染后6周经灌胃法给予吡喹酮治疗[250μg/(g·d)×3 d],于感染后8周剖杀收集小鼠肝脏。同时设未感染吡喹酮治疗组和健康对照组,每组10只小鼠。以肝脏总RNA为模板逆转录PCR检测感染不同时期TLR1、TLR2、TLR6的mRNA水平。应用免疫组化法检测各时期小鼠肝TLR2和TLR6的蛋白水平。结果感染后5、6、8、12周,小鼠肝组织中的TLR1、TLR2、TLR6 mRNA转录水平均升高。感染后6周,吡喹酮治疗组肝组织中的TLR2、TLR6 mRNA水平较单纯感染组下降,而TLR1未见明显变化。免疫组织化学结果显示,感染后5、6、8、12周,小鼠肝组织中的TLR2、TLR6蛋白表达水平升高;感染后6周,吡喹酮治疗组肝组织中的TLR2蛋白水平较单纯感染组明显下降,TLR2阳性表达面积百分比分别为(8.8±3.1)%、(44.2±4.3)%,差异有统计学意义(P<0.01)。感染后6周,吡喹酮治疗组肝组织中的TLR6蛋白水平较单纯感染组略微下降,TLR6阳性表达面积百分比分别为(37.4±3.5)%、(48.4±5.4)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠感染日本血吸虫后肝组织中的TRL2、TLR6蛋白水平升高,但TLR6的作用比TLR2弱。

非酒精性脂肪肝流行病学的研究进展

近年非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发病率达到一个新的高度,其危险因素是遗传、饮食习惯和缺少运动。发病机理主要是二次打击和四次打击。NAFLD的预后较好,饮食卫生和恒久运动是主要的预防措施。

乙型肝炎流行病学的研究新进展

携带乙肝病毒的人逐年减少,输血传播乙肝已下降到1%以下,携带乙肝病毒的妇女超过95%可以成功阻断母婴传播,新近研究提示日常接触传播乙肝机会相对较少,乙肝疫苗应用后,乙肝的易感者逐年减少。乙型肝炎流行病学的新特点,可为新的乙肝防疫措施的实施提供有利的可行条件。

p38γMAPK蛋白在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨人结肠癌中p38γMAPK蛋白的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测54例结肠癌组织、近癌旁组织、癌周正常组织和15例腺瘤息肉组织中p38γ蛋白的表达情况。结果p38γ蛋白的表达主要定位于胞质中,仅少量在胞核中表达。p38γ蛋白在结肠癌组织、癌旁组织、癌周正常组织中的高表达率分别为75.93%、51.85%、37.04%,在结肠腺瘤息肉组织中高表达率为33.33%。p38γ蛋白在结肠癌中的表达明显高于癌旁组织、癌周正常组织和腺瘤息肉组织,有统计学意义(P<0.01)。p38γ的表达与Duke分期,组织分化程度及有无淋巴结转移有显著差异(P<0.01),p38γ的表达与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置无明显相关(P>0.05)。结论结肠癌组织中p38γ蛋白处于过度表达状态,与结肠癌的发生、发展和转移密切相关。

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低,孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。

母乳喂养与感染性疾病

因为母乳中有多种特异性和非特异性的免疫保护因子,其中有体液免疫物质和细胞免疫物质,所以母乳喂养可提供抵抗感染性疾病的免疫力。母乳也有传播某些感染性疾病的可能,研究成果提供了抵御母乳传播HBV和HIV的措施。

病毒变异与传染病

随着分子生物学的进步,近年对病毒变异与传染病的关系研究较多,发现多种病毒都会发生变异。生物进化、生态环境、医源因素等都是病毒变异的因素。病毒变异的结果使临床病情变化、实验室诊断逃逸、抗病毒治疗逃逸、疫苗免疫逃逸和新的传染病的增加等。面对病毒变异应该保护生态环境,实现生态预防,临床上应合理使用各种病毒防治措施,加强对病毒变异的监测,根据监测结果改良和开发试剂盒,开发新的抗病毒药物和改进疫苗等。

乙型肝炎病毒经生殖细胞传播的研究

文章列出了系列实验结果,提示HBV(乙肝病毒)可以通过卵细胞或精细胞进入受精卵,而传播到胎儿。乙肝免疫球蛋白和抗乙肝病毒药物的使用,可能会减少乙肝病毒经生殖细胞传播的机会。

继续教育课件“传染病学网络课程”的构建思路分析

针对继续教育的需要,构建了“传染病学网络课程”,课件构建的思路是:(1)新世纪医学继续教育开辟网络教学的重要性;(2)医学继续教育开辟网络教学的艰巨性;(3)课件是我院传染病学类比教学法的延伸;(4)突出新发现传染病的知识资源;(5)通过影视教学使资源充分共享;(6)给予学科的前沿新进展一定空间。

核苷类抗病毒药物阻断乙肝病毒母婴传播的研究进展

核苷类抗病毒药物能降低孕妇血中乙肝病毒载量,核苷类抗病毒药物联合新生儿接种乙肝免疫球蛋白(HBIG)、乙肝疫苗,阻断乙肝病毒母婴传播效果比新生儿单纯接种HBIG、乙肝疫苗的效果更好。孕妇和胎儿安全性等问题尚需深入研究。慢性乙型肝炎和携带病毒的孕妇可以考虑服用核苷类抗病毒药物,提高阻断乙肝病毒母婴传播的效果。

重组日本血吸虫FKBP12基因的酶活性及其转录水平鉴定

目的对日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)FK506结合蛋白12(FKBP12)进行肽基脯氨酸顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIase)活性鉴定,并比较它与26 000 Mr的谷胱甘肽转移酶(Sj26GST)基因在成虫、尾蚴和虫卵的转录水平。方法从成虫RNA中RT-PCR扩增SjFKBP12基因,将其克隆入pGEX-4T-1载体中,诱导表达重组融合蛋白,经纯化后进行PPIase活性测定。利用RT-PCR半定量分析SjFKBP12基因与Sj26GST基因的转录水平。结果将SjFKBP12基因成功克隆入pGEX-4T-1载体中后,表达、纯化的重组融合蛋白有PPIase活性。SjFKBP12在尾蚴与虫卵期的转录水平相仿,都高于Sj26GST基因,是成虫期转录水平的1.5倍左右。结论成功鉴定了重组SjFKBP12酶活性,SjFKBP12在尾蚴和虫卵期较高的转录水平,为将其进行疫苗等研究提供了依据。

人兽共患病对传染病学的新挑战

近代人兽共患疾病不断增加,80%新发现的传染病属于人兽共患。人兽共患传染病对经济繁荣和社会安定有较大的威胁。防范人兽共患传染病的措施是加强人兽共患传染病的教育、研究和宣传,建立健全的国家兽医体系。

隐性感染的流行病学意义

隐性感染是指病原体侵入人体后,仅引起机体产生特异性的免疫应答,在临床上不显出任何症状、体征,甚至生化改变,隐性感染普遍存在,属于主动免疫范畴。隐性感染的流行病学意义是通过自然过程,让机体产生免疫保护、接种疫苗后的追加免疫、遏制传染病流行等作用。

旅行医学与新发现传染病的播散

近年发现旅游与新传染病的流行有一定关系,旅游引发SARS、艾滋病、登革热、甲型H1N1流感等新传染病的播散,引致新发现传染病迅速在各地蔓延,引起社会的恐慌,扰乱了社会正常的生活秩序,继而引起经济受损失。应对旅游引致新发现传染病播散的措施是隔离传染源、切断传播途径和研制新的疫苗。