四种检验结果在丙肝患者的病情程度分析的应用价值

目的探讨丙肝抗体、丙肝病毒(HCV)RNA、白蛋白(ALB)及谷丙转氨酶(ALT)四种检验结果在丙肝诊断中的应用效果。方法选取2019年8月~2020年8月在我院接受丙肝治疗的患者200例作为观察组,同时选取于我院接受健康检查的健康志愿者100例作为对照组。对比两组入选者ALB及ALT水平;对比观察组患者丙肝抗体、HCV-RNA阳性率以及不同HCV-RNA拷贝数组ALB、ALT水平和丙肝抗体阳性率。结果观察组患者中HCV-RNA阳性率为93%,显著高于其丙肝抗体阳性率85.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者ALB水平低于对照组,ALT水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者中随着HCV-RNA拷贝数的增加,丙肝患者ALB水平逐渐增加,ALT水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05);随着HCV-RNA拷贝数的增加,丙肝抗体阳性率也增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丙肝抗体、HCV-RNA、ALB、ALT在内的四种检查方法均可用于评估丙肝患者的病情严重程度和病情进程。

Foxo1-KLF2-S1P1在MG患者胸腺组织的表达

目的通过探讨Foxo1-KLF2-S1P1在MG患者胸腺的表达,分析其对胸腺T细胞输出的影响。方法取MG患者及对照组胸腺组织,提取总RNA,通过荧光定量RT-PCR检测Foxo1、KLF2、S1P1及CD62L、CCR7、CD69的表达;制作胸腺组织切片,通过免疫组化了解Foxo1、S1P1、CD62L、CD69、CCR7在胸腺组织的分布与表达。结果免疫组化显示Foxo1、S1P1、CCR7在MG患者及对照组胸腺都有表达,主要分布在髓质区,MG患者胸腺组织髓质区扩大,Foxo1、S1P1、CCR7表达显著高于对照组;荧光定量PCR结果显示MG胸腺组织Foxo1、KLF2、S1P1、CCR7、CD69的m RNA的水平表达显著增高(分别是5.36±0.728、1.43±2.71、6.1±1.033、5.0±0.932、4.97±1.112,与对照组相比P<0.05)。结论 MG患者Foxo1-KLF2-S1P1高表达可能是MG患者胸腺细胞的异常输出的原因。

CCL21基因过表达上调重症肌无力患者CK8/18阳性胸腺上皮细胞的抗原呈递功能相关基因

目的明确重症肌无力(MG)患者胸腺组织CC趋化因子配体21(CCL21)的分布;通过CCL21基因转染MG患者细胞角蛋白8/18(CK8/18)阳性胸腺上皮细胞(TEC),探讨CCL21过表达对CK8/18阳性TEC中抗原提呈功能相关分子表达的影响。方法采用免疫组织化学检测CCL21、CK8/18阳性细胞在MG患者胸腺的表达及分布,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MG患者胸腺CCL21、CCL19及CC趋化因子受体7(CCR7)的mRNA水平;p CMV-CCL21质粒转染MG患者分离的CK8/18阳性TEC,qRT-PCR检测转染前后TEC功能性基因CD80、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、CD86、HLA-DR、HLA-A的mRNA水平。结果 MG胸腺组织中CK8/18阳性细胞明显多于正常对照,且在皮质及髓质区均有分布,CCL21蛋白、CCR7mRNA的水平显著增高。p CMV-CCL21质粒转染TEC后,HLA-A、HLA-DR、ICAM和CD80 mRNA水平显著增加。结论 CCL21过表达,可引起MG患者CK8/18阳性胸腺上皮细胞抗原呈递功能相关基因的表达增高。

人CCL25基因慢病毒表达载体的构建及其对TEC黏附分子表达的影响

通过构建人趋化因子CCL25基因过表达慢病毒载体并转染人原代胸腺上皮细胞(TEC),探讨过表达CCL25对人TEC黏附分子表达的影响,为研究CCL25在重症肌无力患者胸腺异常表达的作用奠定基础。PCR和DNA测序鉴定携带CCL25基因的慢病毒构建成功,病毒滴度约为4×108 Tu/ml,慢病毒对TEC感染效率达80%。Western blotting结果显示感染组细胞CCL25蛋白表达量显著增高。RT-PCR结果显示,与对照组相比,感染组HLA-A、HLA-DR表达无显著变化,P-selectin、VCAM-1和ICAM-1表达显著增高,提示我们人胸腺上皮细胞CCL25基因的过表达可一定程度影响TEC的功能特性,可能以通过增加P-selectin、VCAM-1和ICAM-1的表达量来影响淋巴祖细胞的胸腺归巢或胸腺内胸腺细胞的阳性选择过程,进而引起胸腺细胞发育异常,细胞亚群比例失调。

IL-37通过作用树突状细胞调节CD8^+T细胞功能

将小鼠骨髓细胞诱导分化为DC,用IL-37处理后,流式细胞术检测细胞表面共刺激分子(CD86、CD80),RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12和TGF-βmRNA的表达,多重液相蛋白定量CBA试剂盒及ELISA试剂盒检测细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-12、IFN-γ、MCP-1和TGF-β蛋白的表达。Western blotting方法检测DC中磷酸化蛋白的表达。将DC与T细胞共培养,流式细胞术检测CD8+T细胞增殖及活化程度(CFSE、CD69)。结果显示,IL-37能够降低表达CD80+/CD86+的DC数量。促炎因子TNF-α、IL-12和IL-6的表达被明显抑制,而T淋巴细胞抑制因子TGF-β明显增高。IL-37预处理的DC明显降低T淋巴细胞的增殖和活化能力。IL-37能够降低DC中磷酸化ERK和NF-κB的表达。IL-37处理的DC对CD8+T细胞产生明显抑制作用。结果表明,IL-37能够通过影响ERK和NF-κB依赖的信号通路抑制DC的成熟和免疫反应,从而抑制CD8+T细胞的活化及增殖。

原发性肝癌不同Child-Pugh分级患者的血清甲胎蛋白、CA153、CA199表达情况

目的:比较不同肝功能Child-Pugh分级的原发性肝癌患者血清甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原153、199(CA153、CA199)表达浓度及其相关性。方法:回顾性分析本院2020年1月~2020年10月收治的84例原发性肝癌患者(观察组),另选取30例健康体检志愿者为对照组,比较不同肝功能Child-Pugh分级患者血清AFP、CA153、CA199浓度,并分析其与肝功能分级的相关性。结果:观察组血清AFP、CA153、CA199高于对照组(P<0.05);不同肝功能Child-Pugh分级患者血清AFP、CA153、CA199浓度比较差异有统计学意义;其中,肝功能Child-Pugh C级患者高于B级、A级患者,肝功能B级患者高于A级患者(P<0.05)。结论:不同肝功能Child-Pugh分级的原发性肝癌患者血清AFP、CA153、CA199表达浓度存在明显差异,AFP、CA153、CA199与肝功能分级呈正相关性。