木霉生物有机肥对盐渍化土壤肥力及杭白菜产量和品质的影响

为研究生物有机肥对盐渍土壤化学性状及设施蔬菜生长的影响,以杭白菜为试验材料,共设置盆栽和田间试验,盆栽试验共设置4个不同浓度木霉孢子液,对杭白菜地上部干重、茎粗、SPAD值及根系生长指标进行测定;田间试验共设置中药渣有机肥(OF)、中药渣有机肥+木霉(BOF-1)、中药渣有机肥+木霉(BOF-2)、鸡粪有机肥+木霉(BOF-3)4个处理,对杭白菜产量、养分及品质,土壤性状及酶活等进行测定。结果表明,与对照相比,106CFU/g木霉孢子液处理下杭白菜干重、茎粗、SPAD值、根系生长指标均明显增加。田间试验中,与OF处理相比,BOF-2处理和BOF-3处理增加杭白菜产量,促进作物对磷钾养分吸收,降低杭白菜硝酸盐含量;降低土壤电导率和交换性钠含量,并提高土壤磷酸酶活性。Spearman相关性和随机森林分析结果证明,土壤磷酸酶活性、p H与土壤EC是影响杭白菜产量的重要指示因子。综上,施用木霉生物有机肥(3.0 t/hm^(2))是提高杭白菜产量和品质的有效措施。

解脲支原体感染率及耐药性动态监测

目的:了解该地区2000～2004年间解脲支原体(Uu)年感染率以及对10种抗菌药的耐药率年动态变化.方法:Uu鉴定采用培养法.Uu药敏试验选定罗红霉素、克拉霉素、交沙霉素、氧氟沙星、四环素、可乐必妥、阿齐霉素、红霉素、强力霉素、美满霉素等10种抗菌药,以培养液稀释法进行.结果:2000～2004年,解脲支原体(Uu)的感染率分别为:26.67%、28.16%、29.50%、36.07%、42.40%.Uu对一些抗菌药物的耐药率逐年升高,而对几种抗菌药物其耐药率变化不大.结论2000年同2004年比较,解脲支原体(Uu)的感染率有所升高(P＜0.01),Uu对可乐必妥阿齐霉素、罗红霉素、氧氟沙星的耐药率均升高(P＜0.01).2004年对此4种抗菌药已经产生相当程度的耐药.2000～2004年,Uu对交沙霉素、美满霉素、强力霉素的耐药率基本无变化(P＞0.05),仍然保持较低的耐药率.2000～2004年,Uu对四环素、红霉素的耐药率变化不明显(P＞0.05),仍然居高(＞30%).2004年,Uu对红霉素的耐药率最高(42.73%),对交沙霉素的耐药率最低(4.71%).

结核性脑膜炎实验室诊断技术进展

结核性脑膜炎是肺外结核较为常见的疾病,约占结核病的0.5%～1.0%[1]。全世界结核性脑膜炎自20世纪60年代以后稳步下降,但20世纪80年代后开始呈上升趋势。尤其是近年来,耐药结核分枝杆菌广泛传播及艾滋病的流行和免疫制剂的广泛应用,使得结核性脑膜炎发病率亦随之增高。结核性脑膜炎是死亡率最高的肺外结核病,早期诊断对于提高患者的生存率尤其重要。但在临床工作中,早期结核性脑膜炎患者临床表现和脑脊液改变多不典型。

焦磷酸测序技术检测耐多药结核分枝杆菌

目的利用焦磷酸测序技术,建立结核分枝杆菌菌株耐多药检测方法,并与Bactec MGIT 960药敏法进行比较。方法设计rpoB、katG基因PCR扩增引物和焦磷酸测序引物,建立结核分枝杆菌菌株焦磷酸测序检测方法。利用新确立的焦磷酸测序法检测202株临床分离的耐多药结核分枝杆菌的利福平、异烟肼耐药性。结果与BACTEC MGIT 960法检测药物耐药性结果比较,焦磷酸测序检测多耐药结核分枝杆菌临床分离株的敏感性与特异性为72.8%[95%可信区间（confidence in-terval,CI）：66.3%~78.4%]及90.0%（95%CI：80.1%~95.1%）。结论新确立的焦磷酸测序技术可快速检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼的耐药性,其可作为耐多药结核分枝杆菌药敏有效的检测工具。

572例性病门诊患者支原体鉴定及10种抗菌药物敏感性测定

目的了解性病门诊患者支原体感染及耐药情况。方法对572例性病门诊患者进行了支原体培养鉴定及10种抗菌药物敏感性试验(美满霉素、强力霉素、阿齐霉素、交沙霉素、左氧氟沙星、克拉霉素氧、罗红霉素、氧氟沙星、四环素和红霉素)。结果572病例中支原体阳性251例,感染率为43·9%。单独解脲支原体(Uu)、单独人型支原体(Mh)及Uu+Mh混合感染的阳性率分别为39·5%(226例)、2·8%(16例)、1·6%(9例)。男性感染率为32·5%(89例),女性感染率54·4%(162例)。支原体对10种药物敏感性较高的是美满霉素、强力霉素、阿齐霉素、交沙霉素和左氧氟沙星;药物敏感性较低的是红霉素、氧氟沙星和四环素。结论性病门诊支原体感染率为43·9%,女性高于男性(P<0·05);主要为Uu引起(占93·6%);美满霉素、强力霉素、阿齐霉素、交沙霉素和左氧氟沙星敏感率分别高于红霉素、氧氟沙星和四环素(P<0·05)。

支原体体外药敏试验敏感体内耐药研究分析

目的报告支原体(解脲支原体Uu,人型支原体Mh)体外药敏试验敏感体内耐药现象,比较六种抗菌药的体内耐药率的差别,并初步探讨支原体体内耐药的机制。方法选定支原体体外药敏试验结果敏感的抗菌药单种给药常规治疗。根据应用抗菌药的不同相应分为六个治疗组(红霉素组,氧氟沙星组,四环素组,美满霉素组,克拉霉素组,阿齐霉素组),共445例。全部病人治疗后复查并观察记录疗效。结果6个治疗组共存在支原体体内耐药48例。对六种抗菌药均存在体外药敏试验敏感体内耐药病例,但可以认为红霉素,氧氟沙星,四环素体内耐药率相对较高,而阿齐霉素,克拉霉素体内耐药率相对较低(P<0.05)。结论支原体同某些细菌一样存在体外药敏试验敏感体内耐药现象。不同个体对药物生物利用度的差异及抗菌药诱导作用可能是体内耐药的主要原因。

中药对解脲支原体临床分离株的体外抑制试验研究

目的 研究6种单种中草药及二种复方中草药对解脲支原体（Uu）临床分离株的作用并确定它们的最低抑菌浓度（MIC）。方法 临床采集标本后体外培养获得Uu临床分离株，应用微量稀释法测定中草药对解脲支原体临床株的单独作用及部分联合作用，并测定了其最低抑菌浓度（MIC）。结果 6种中草药对解脲支原体临床分离株的最低抑菌浓度MIC范围（生药）分别为：五倍子：0．313—1．25g／L，诃子：1．25—5．00g／L，黄柏：1．25—5．00g／L，栀子：0．625—5．00g／L，赤芍：1．25-2．50g／L，板兰根：10．00—40．00g／L，五倍子＋诃子：1．25—5．00g／L。五倍子＋赤芍：1．25—5．00g／L。复方中草药八正散对解脲脲原体临床分离株的MIC范围（生药）为：2．50—20．00g/L，五淋散为：2．50—20．00g/L。结论 五倍子，黄柏，诃子，栀子，赤芍等具有较强的抑制解脲脲原体临床分离株的作用，传统中药八正散及五淋散也有一定的抑制解脲脲原体临床分离株的作用。应进一步研究中药抗Uu的作用及其机制。

三种培养液进行海马神经元原代培养的对比研究

目的使用3种培养液对海马神经元进行培养,遴选出一种使神经元存活率较高、存活时间较长的培养液。方法分离SD大鼠胎鼠的海马神经元,分别用DMEM、DMEM/F12和Neurobasal培养液进行培养,应用倒置相差显微镜、台盼蓝排斥实验、MTT法和LDH释放率法进行细胞形态和细胞活力分析。结果Neurobasal培养液培养的神经元细胞活力,与另二组培养液培养的神经元活力相比差异有显著性(P<0·05)。结论Neurobasal培养液可作为海马神经元体外培养的良好培养液。

大量输血患者血清电解质浓度动态监测

目的研究手术患者接受大量输血后不同时限血清电解质浓度变化。方法分别于输血前、输血1h及输血3d、7d后，采集大量输血患者的血标本，应用全自动生化分析仪进行血K＋、Na＋、Cl-、Ca2＋检测，并以SPSS软件做统计学比较。结果大量输血1h、3d后患者的血K＋、血Cl-与输血前比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；而与大量输血7d后比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。输血前、输血1h、3d、7d后血Na＋浓度比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。大量输血1h后血Ca2＋浓度与输血前比较差异有统计学意义（P〈0．05）；输血3d后分别与输血1h、输血7d后血Ca2＋浓度相互间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。输注8～15U红细胞组与输注16～20U红细胞组比较，仅输血后7d血清Ca抖的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论大量输注血液制剂尤其是红细胞的患者在1～3d内可出现高钾血症、高氯血症、低钙血症，应加强对大量输血后患者血K＋、Cl-、Ca2＋的动态监测。

医院分离病原菌分布及药物敏感性分析

目的分析临床分离的病原菌分布及不同细菌的药物敏感性,了解细菌耐药的特点,为临床合理使用抗菌药物及有效控制医院感染提供参考。方法细菌培养鉴定及药敏试验采用AMSVITEK仪器分析并结合手工法。药敏试验结果判定按2008年美国临床实验室标准化协会(CLSI)标准进行。利用WHONET软件对临床分离出的388株病原菌分布及其药敏结果进行回顾性分析。结果革兰阳性菌占31.2%,革兰阴性菌占68.8%。分离率较高的依次为为:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、鲍曼不动杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌等。多重耐药菌菌种分布较为广泛,但主要集中于鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、葡萄球菌属、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌等。结论对临床有较大威胁的主要病原菌是多重耐药鲍曼不动杆菌、产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、多重耐药阴沟肠杆菌。了解临床分离细菌的分布及耐药情况有助于指导临床合理使用抗菌药物及控制医院感染。

结核性脑膜炎的综合诊断

结核性脑膜炎(TBM)在我国是常见病,严重威胁人类身体健康,近几十年来,由于抗生素特别是抗结核药的应用,不典型TBM有增加趋势,因临床表现复杂,常引起误诊,误诊范围在12.7％～91.7％,平均38.7％,因此,TBM的综合诊断就显得更为重要。

解脲脲原体的DNA模板制备方法的研究比较

目的:从蛋白酶K法,酚-氯仿法,双蒸水煮沸裂解法中遴选出提取UuDNA的较好方法。方法:分别以双蒸水煮沸裂解法,蛋白酶K法(PK法)及酚-氯仿提取法提取UuDNA模板并作比较。结果:PK法及酚-氯仿提取法比较两法无差异,双蒸水煮沸裂解法与酚-氯仿提取法比较前者敏感率较低。结论:应用PCR检测Uu,PK法及酚-氯仿法均可用于UuDNA模板的提取,而双蒸水煮沸裂解法不主张应用。

结核分枝杆菌环丝氨酸药物敏感性及耐药机制研究

目的检测耐多药结核病(MDR-TB)临床分离株的环丝氨酸最低抑菌浓度(MIC),并从基因水平进行环丝氨酸耐药机制的研究,为环丝氨酸的快速耐药测定提供理论依据。方法采用Middlebrook 7H9液体培养基,在96孔板中对140株MDR-TB和37株敏感结核分枝杆菌(MTB)临床分离株进行环丝氨酸药敏试验,筛选出对环丝氨酸耐药及敏感的菌株,再对Ald、Alr、ddlA基因进行突变位点及基因表达量的分析。结果 MDR-TB对环丝氨酸的耐药率仅为4.28%,初步将MIC≥32μg/mL的结核分枝杆菌菌株判定为对环丝氨酸耐药;Ald、Alr、ddlA基因位点突变与结核分枝杆菌对环丝氨酸耐药无明显相关性,环丝氨酸耐药菌株在Alr基因位点处基因表达量明显高于敏感菌株。结论目前临床的MDR-TB患者对环丝氨酸的耐药率较低,使用环丝氨酸治疗MDR-TB是一种有效的选择。尚未发现明确的环丝氨酸耐药突变位点,但Alr基因的过表达与MTB环丝氨酸耐药高度相关,可能是其耐药的新机制。

T淋巴细胞耗竭在耐多药肺结核患者免疫表达中的初步研究

目的探讨T淋巴细胞耗竭在耐多药肺结核(multidrug-resistant pulmonary tuberculosis,MDR-PTB)患者外周血分离流式细胞术检测后免疫表达中的特征。方法采用前瞻性研究的方法,选取2020年1—8月同济大学附属上海市肺科医院住院治疗的58例肺结核患者作为研究对象,其中,MDR-PTB患者20例(MDR-PTB组),药物敏感性肺结核(drug susceptible pulmonary tuberculosis,DS-PTB)患者38例(DS-PTB组);同期纳入健康志愿者20名,作为健康对照组(HD组)。分别采集各组研究对象肘部静脉血各10ml并抗凝处理,分离其外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear,PBMC),利用流式细胞术检测并比较其结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)抗原特异性CD4+和CD8+T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1(PD-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)和淋巴细胞活化基因-3(Lag-3)等抑制性受体的表达水平,以及胞内细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平。结果MDR-PTB组CD4-PD-1、CD8-PD-1、CD4-Tim-3和CD8-Tim-3的表达水平[中位数(四分位数)][分别为24.50%(21.58%,26.00%)、19.95%(16.10%,21.65%)、3.75%(3.20%,4.68%)和12.65%(10.65%,14.10%)]均明显高于HD组[分别为13.10%(11.80%,17.80%)、12.55%(9.61%,18.18%)、0.67%(0.46%,2.41%)和3.78%(2.35%,6.55%)]和DS-PTB组[分别为14.50%(11.90%,20.00%)、13.20%(8.61%,18.23%)、1.12%(0.71%,3.36%)和3.59%(2.10%,7.52%)],差异均有统计学意义(Z值分别为-4.009、-4.159,-3.027、-3.284,-3.565、-3.967,-5.568、-3.261,P值均<0.05)。MDR-PTB组CD4-IL-2和CD8-IL-2分泌水平[分别为1.30%(0.73%,2.71%)和2.27%(1.03%,3.11%)]均明显高于HD组[分别为0.67%(0.44%,1.10%)和0.59%(0.39%,0.91%)],差异均有统计学意义(Z=-2.670、-3.917,P值均<0.05)。DS-PTB组CD4-IFN-γ分泌水平[0.92%(0.59%,2.02%)]明显高于HD组[0.65%(0.38%,0.82%)],MDR-PTB组和DS-PTB组CD8-IFN-γ分泌水平[分别为1.16%(0.53%,2.03%)和1.80%(0.97%,3.04%)]均明显高于HD组[0.69%(0.35%,0.91%)],差异均有统计学意义(Z值分别为-2.337、-1.988、-4.455,P值均<0.05)。DS-PTB组CD4-TNF-α分泌水平[0.83%(0.67%,1.22%)]明显高于HD组[0.44%(0.28%,0.71%)]和MDR-PTB组[0.41%(0.28%,0.82%)],差异均有统计学意义(Z值分别为-3.903、-2.919,P值均<0.05)。结论MDR-PTB患者存在T淋巴细胞功能耗竭,阻碍了T淋巴细胞免疫效应的表达。

胆碱酯酶对氧化酶法测定血清尿酸浓度的影响

尿酸是临床上经常测定的生化指标,痛风、肾病、心血管疾病、糖尿病与血清尿酸增高有关[1]。因此,尿酸的检测与分析对临床诊断、了解病情进展,有重要的参考价值。在日常生化检验工作中,我们发现单独测定尿酸时测定结果比较理想，而在测定完胆碱酯酶（CHE）后紧接着测尿酸，尿酸的检测结果偏低。笔者怀疑这可能是测试项目间的交叉污染所致，本文作以下探讨。

疑难血型标本的基因测序分析

目的采用基因测序方法鉴定8例ABO、Rh血型不符的疑难血型。方法收集本院2019年12月至2023年4月血型正反定型不符的8例血液标本,采用基因测序方法检测基因型。结果基因测序结果显示:8例样本中1例为A102/O01、1例为Bw12/O01、1例为B(A)、1例为O01/O02、1例为Bw19/O01、2例为类孟买、1例为weak D type 25/RHD*DEL1。其中有6例标本血型基因测序结果和血清学表型一致,2例标本的血清学表型和基因测序结果均表现出一定的差异。结论基因测序技术可以很好地解决输血患者抗原或抗体减弱以及亚型所致的ABO血型正反不符的血型鉴定,并鉴定了1个罕见的RhD变异型,可提升输血安全性,保证临床用血安全。

一例弱D25与“亚洲型”DEL基因杂合型个体的RHD基因分析

目的对1例血清学RHD弱阳性的患者进行RHD基因型检测。方法采用盐水法以及抗人球蛋白法鉴定RHD血型,应用抗球蛋白微柱凝胶卡进行直接抗人球蛋白试验;采用RH血型分型卡检测RHCE表型;对RHD基因的10个外显子进行PCR扩增及直接测序分析。结果该个体血清学结果显示RHD抗原弱阳性表达,为D变异型,RHCE表型为CcEE,直接抗人球蛋白试验结果为阳性。RHD基因外显子直接测序发现其第9外显子上的第1227号碱基发生了G>A的杂合突变。同时,第3外显子上的第341号碱基发生了G>A的杂合突变,导致D抗原表达减弱。综上,该样本属RHD*weak D type 25/RHD*DEL1杂合型。结论此D变异型个体为弱D25与DEL型杂合的病例,其血清学表现为D变异型,且未检索到中国人群相关病例报道。

应用念珠菌显色培养基培养浅部真菌的研究

目的:探讨念珠菌显色培养基培养检测浅部真菌的应用价值。方法:分别使用直接镜检和念珠菌显色培养基培养检测法平行检测临床标本37例。结果:镜检和培养检测法结果差异无显著意义(P>0.5)。如果以直接镜检作为确诊标准,则培养法的敏感度为77%,特异度为91%。在念珠菌显色培养基上念珠菌形成光滑的湿润菌落,其生长较快,一些念珠菌的颜色和形态有其特征性;而丝状真菌在念珠菌显色培养基上形成丝状菌落,生长较慢。结论:直接镜检结合念珠菌显色培养基培养有助于临床实验室鉴定和检测浅部真菌。

二甲双胍通过三羧酸循环途径对巨噬细胞线粒体功能的影响

目的:通过对三羧酸循环(TCA)中的关键酶在炎症与抗炎时表达量的变化来分析二甲双胍(Met)对线粒体功能的影响.方法:用质量浓度为1μg/mL的脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞,诱导出炎症,采用浓度为5 mmoL/L的Met对巨噬细胞进行抗炎处理,用流式细胞仪检测线粒体活性氧(ROS),使用Real-time PCR技术和Western Blot技术分析由LPS诱导出炎症和Met抗炎后的巨噬细胞线粒体中TCA循环通路的变化,用Western Blot技术测定线粒体自噬相关蛋白的变化,使用线粒体膜电位检测线粒体功能,以此推测TCA循环通路对线粒体功能的影响.结果:LPS刺激巨噬细胞8 h后诱导出巨噬细胞炎症,此时TCA循环通路中的关键酶表达水平降低,线粒体ROS升高,线粒体膜电位升高;Met抗炎后TCA循环中的关键酶表达增高,线粒体ROS降低,线粒体膜电位降低,线粒体自噬相关蛋白Beclin-1和LC3b表达量显著降低.结论:线粒体TCA循环在炎症状态下会被抑制,造成线粒体能量代谢失衡;Met能够抑制炎症,减弱线粒体自噬功能,同时抗炎状态会对TCA循环起到修复作用,使线粒体功能趋于稳定.

常用消毒剂对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑制作用

目的明确临床常用消毒剂对我院ICU病房流行的多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑制浓度(MIC)值,帮助临床选取正确的多重耐药鲍曼不动杆菌消毒剂。方法收集本院ICU流行鲍曼不动杆菌临床分离株8株,制备菌液,以微量稀释法测定临床常用消毒剂对8株鲍曼不动杆菌的MIC值。结果碘伏、过氧乙酸,氯己定、2%戊二醛和乙醇对8株鲍曼不动杆菌的MIC值分别为0.0016%、0.011%、62.5mg/L、1%和75%;肥皂对鲍曼不动杆菌无作用。5种消毒剂对鲍曼不动杆菌的有效稀释比,从高到低依次是过氧乙酸、氯己定、碘伏、戊二醛和乙醇。结论过氧乙酸、氯己定为本院抑杀环境中多重耐药鲍曼不动杆菌的首选消毒剂,而2%戊二醛不主张应用。碘伏能够作为体表中的有效消毒剂,而乙醇应用消毒时一定要保证浓度在75%。我们认为消毒剂对于不同细菌的MIC值检测正如抗菌药物敏感试验一样对于控制细菌感染性疾病的流行有着重要价值。