牛黄酸和VC对染砷小鼠脑神经损伤保护作用

目的观察牛黄酸和维生素C(VC)对砷暴露导致的脑组织核酸损伤的保护作用,为砷毒性脑损伤的预防和治疗提供科学依据。方法昆明种小鼠40只,随机分为4组:4 mg/L三氧化二砷染毒组1、50 mg/kg牛黄酸和45mg/kg VC拮抗组以及生理盐水对照组。每周2次,连续染毒60d,取小鼠脑组织固定,用免疫组化方法观察脑组织神经细胞8-硝基鸟嘌呤(8-NO2-G)的表达。结果染砷组小鼠脑组织出现异常病理学改变,脑皮质神经细胞的胞浆中8-NO2-G呈现明显的高表达。而牛黄酸和VC拮抗组小鼠脑组织出现轻度的病理学变化8-NO2-G表达。结论牛黄酸和VC对砷暴露小鼠脑组织RNA损伤具有保护作用。

铅对胎鼠甲状腺功能及仔鼠行为发育影响的研究

本文以醋酸铅作为受试物,将受孕大鼠随机分为20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg3个剂量组和对照组;将受孕小鼠随机分为试验组(60mg/kg)、阴性对照组和甲基硫氧嘧啶组(25mg/只/次)。从大鼠受孕第13天,小鼠受孕第10天腹腔注射染毒,隔两天1次,共3次。甲基硫氧嘧啶组灌胃,共3次。实验结果表明,试验组胎鼠血清和羊水T_3、T_4水平及仔鼠平均体重明显下降,试验组和甲基硫氧嘧啶组仔鼠多种神经行为发育明显延迟于对照组仔鼠。说明,铅对胎鼠甲状腺功能、仔鼠体重增长以及多种神经行为发育有明显的抑制作用。铅对胎鼠甲状腺功能的影响可能是仔鼠神经行为和智力发育迟缓的重要原因。

三氧化二砷对小鼠脑神经元DNA损伤作用

[目的]为探讨砷的中枢神经系统毒性作用机制提供实验依据。[方法]昆明种小鼠40只,随机分为4组:1、2、4 ppm三氧化二砷染毒组和生理盐水组。连续染毒60 d,取大脑,用免疫组化方法观察脑皮质神经细胞8-羟基-2’-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH-dG)的表达,并用单细胞凝胶电泳试验检测脑神经元的单链DNA断裂程度。[结果]各染砷组小鼠脑皮质神经细胞出现肿胀、胞质内有空泡变性、核固缩、碎裂等病理学变化,神经组织中8-OH-dG呈现明显的高表达,而且神经细胞可见明显的彗尾、且随砷暴露剂量增高其彗尾变长。[结论]慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠神经元的DNA损伤,脑皮质神经元可能是砷神经毒性作用的主要靶细胞。

城市大气颗粒物质中多环芳香烃类化合物浓度及其致突变活性

[目的]调查东北某工业城市大气颗粒物质和多环芳香烃类化合物的浓度以及它们的致突变活性。[方法]在北方某城市的工业区、居民区、郊区及主干线道旁设4个采样点,用大流量粉尘采样器采样,用带有荧光检测仪的高压液相色谱仪(HPLC)检测多环芳香烃类化合物(PAH)中benzo[a]anthoracene(BaA)和benzo[a]pyrene(BaP)浓度。通过Ames沙门氏菌致突变活性检测程序,检测样品的致突变活性。[结果]工业区和主干线道的大气颗粒物质浓度分别为454.00μg/m3和364.33μg/m3,显著高于郊区273.67μg/m3或居民区340.00μg/m3(P<0.05或P<0.01)。从各季节来看,春、冬季颗粒物质浓度高于夏、秋季。大气颗粒物质中多环芳香烃类化合物BaA和BaP的浓度,在工业区相对较高。而且工业区大气多环芳香烃类化合物致沙门氏菌TA98和TA100回复突变率也高于其他各采样点。[结论]工业区大气中颗粒物质和多环芳香烃类化合物浓度较高,并有很高的致突变活性。

东北某城市大气颗粒污染物中有毒重金属浓度

[目的]摸清东北某城市大气污染颗粒污染物中所含多种有毒重金属的浓度,为防治大气污染提供依据。[方法]用大流量粉尘采样器采样大气颗粒污染物,用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)检测大气颗粒物中Cd、Mn、Pb、Ni、Cr和As等6种重金属浓度。[结果]工业区Cd、Mn、Pb、Ni、Cr和As的浓度分别为9.3、461.9、588.7、69.5、205.7和57.4 ng/m3,交通干线旁为5.7、245.5、305.0、31.4、58.8和32.5 ng/m3,郊区为6.2、154.5、202.3、16.6、26.8和18.2 ng/m3。除Cd浓度外,工业区和交通干线旁的金属浓度显著高于郊区(P<0.05或P<0.01)。6种有毒重金属浓度随时间变化曲线呈现冬、春季浓度高,夏、秋季浓度低的变化规律。[结论]工业区和交通干线旁大气颗粒污染物中的重金属浓度较高。

东北某市大气颗粒物质和多环芳烃类化合物的浓度及其致突变性

背景与目的:调查东北某工业城市大气颗粒物质和多环芳烃类化合物的浓度以及它们的致突变活性。材料与方法:用大流量粉尘采样器采样,带有荧光检测仪的高压液相色谱仪(HPLC)检测总的多环芳香烃类化合物(PAHs)以及其中的苯并(a)芘[B(a)P]的浓度。以Ames沙门氏菌致突变活性检测样品的致突变性。结果:工业区和交通干道大气中颗粒物质浓度高于居住区或郊区,工业区大气中颗粒物质中多环芳香烃化合物和苯并(a)芘的浓度高于郊区和交通干道(P<0.05或P<0.01)。工业区大气颗粒物质和有机提取物致沙门氏菌TA98和TA100回复突变率高于其他各区采样点(P<0.05或P<0.01)。结论:工业区大气中颗粒物质和多环芳香烃类化合物浓度较高,并具有很高的间接致突变活性和较弱的直接致突变活性。

TOCP对DFP在鸡脊髓神经细胞膜特异结合的影响

[目的]调查〔3H〕DFP在各脊髓段神经细胞膜上的特异结合。[方法]鸡曝露于Tri-o-cre-sylphosphate(TOCP)后,隔6、24、48h处死,取颈、胸、腰段脊髓,称重后制成匀浆。经超速离心,获得膜蛋白。在脊髓膜蛋白中加入8nM的〔3H〕DFP,或加入80nM的非标记DFP后又加入8nM的〔3H〕DFP,然后培养1h。用nitrocellulosefilter进行快速真空滤过,用Tris-HCl-NaCl液对滤纸冲洗,再加5mL的Aquasol-2后,计数〔3H〕DFP的结合量。[结果]对照组鸡的颈、胸、腰椎段脊髓神经细胞膜上的〔3H〕DFP特异结合量分别为832.0、857.0、864.0fmol/mg,TOCP曝露组为273.5、243.52、71.5fmol/mg。TOCP曝露组各段脊髓神经细胞膜上的〔3H〕DFP特异结合量显著低于对照组,而各段脊髓神经细胞膜之间〔3H〕DFP的特异结合量无显著性差异。随着TOCP曝露后的时间的推移,各段脊髓神经细胞膜上的〔3H〕DFP特异结合量逐渐增高,提示迟发性神经毒性有机磷化合物的特异结合膜蛋白是较均匀地分布在整个脊髓神经细胞膜上。在这些脊髓神经细胞膜上的特异性结合部位,TOCP和DFP之间有竞争性抑制作用。[结论]脊髓神经细胞膜上的特异性结合膜蛋白可能与有机磷化合物的迟发性神经毒性诱发有关。

日本四日市小学生多种变态反应性疾病的流行病学调查

[目的]为阐明儿童变态反应性疾病漫延扩大的诱因提供流行病学调查依据。[方法]通过健康调查表,对日本四日市旧污染区楠小学校及非污染物下野小学校的学生进行有关变态反应性疾病患病情况的流行病学调查。[结果]下野小学调查对象中患过敏性鼻炎学生占23.4%,显著高于楠小学(占14.4%)(P<0.01),而楠小学调查对象中患荨麻疹学生占6.8%,显著高于下野小学(占3.6%)(P<0.05)。两校调查对象有既往史的父母及祖父母中,占前2位的疾病分别是花粉症和过敏性鼻炎。其中,下野小学调查对象的父亲和祖父母花粉症既往史率分别为26.2%和20.8%,显著高于楠小学(分别为20.0%和11.8%)(P<0.05或P<0.01)。两校调查对象的变态反应相关疾病患病率与其父母及祖父母既往史有密切的相关性(P<0.05或P<0.01)。[结论]遗传因素、环境因素及饮食习惯对该两所学校学生的变态反应相关疾病诱发起重要的作用。

苯甲基磺酰氟对有机磷化合物诱导的迟发性神经毒性的影响

[目的]为进一步解析苯甲基磺酰氟(PMSF)对有机磷化合物(OP)诱导的迟发性神经毒性(OPIDN)的影响提供依据。[方法]80只单冠白色leghorn种雌性成鸡被分成17组。除了30 mg/kg溴苯磷(leptophos)组和40 mg/kg三甲基苯基磷酸酯(TOCP)组为10只鸡外,其余组均为4只。OP染毒后各组鸡是否出现OPIDN症状要连续观察25 d,并对其临床症状的评分值进行分析比较。[结果]OP暴露后第25天,各组鸡的迟发性神经毒性症状观察结果显示,30 mg/kg leptophos组、30 mg/kg leptophos染毒后再给60 mg/kg PMSF组、40 mg/kg TOCP组和40 mg/kgTOCP染毒后再给60 mg/kg PMSF组的鸡出现了迟发性神经毒性症状,其临床症状的评分值分别为4.2、5.5、3.0和4.5。同时给予30 mg/kg leptophos和1 mg/kg PMSF组、40 mg/kg TOCP和1 mg/kg PMSF组鸡也出现了迟发性神经毒性症状,其临床症状的评分值分别为0.8和1.2,明显低于30 mg/kg leptophos组和40 mg/kg TOCP组(P<0.05或P<0.01)。5 mg/kg leptophos染毒后再投予30 mg/kg leptophos组和5 mg/kg TOCP染毒后再投予40 mg/kgTOCP组的鸡则出现较重的迟发性神经毒性症状,其评分值分别达6.0和4.0。[结论]OP染毒前给予PMSF能防止诱发OPIDN,后给予PMSF时能增强OP的OPIDN。同时给予PMSF和OP时是否诱发OPIDN,取决于PMSF和OP的暴露浓度比例。两次OP染毒之间给予PMSF时,同样能预防OP诱发OPIDN。

慢性砷暴露对小鼠肾组织DNA损伤的研究

目的:通过检测8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)在砷暴露小鼠肾脏组织中的表达和分布,探讨砷的肾毒性作用机制。方法:昆明种小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为低剂量组(1ppmAs2O3)、中剂量组(2ppm As2O3)、高剂量组(4ppm As2O3)和生理盐水对照组,连续染毒60天后断头处死,用HE染色法进行组织病理学观察,用免疫组化及图像分析方法检测肾组织内8-OHdG的水平。结果:与对照组相比,1ppm、2ppm和4ppm染砷组小鼠肾组织出现不同程度细胞肿胀,胞浆空泡变性,核固缩、溶解及血管扩张、充血等病理学改变,近曲小管较肾小球损伤严重。免疫组化结果表明,肾组织中8-OHdG含量明显增高,并呈现明显的剂量-反应关系,其总光密度值与对照组比较具有显著性差异(P<0.01)。而且,8-OHdG在近曲小管的表达明显高于肾小球区域。结论:慢性低剂量砷暴露可引起小鼠肾组织DNA的氧化损伤和病理变化,尤其对肾脏近曲小管的损伤作用较为明显。

铅对孕鼠甲状腺功能影响的形态学观察

作者用醋酸铅作为受试物,以三组剂量(20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg)于大鼠受孕第13、16、19天3次腹腔注射染毒,对照组给生理盐水。结果:光镜下甲状腺组织呈明显的低功改变,并有退行性变趋势。电镜下滤泡上皮细胞呈萎缩性改变,有关蛋白质代谢的细胞器不发达,分泌颗粒、溶酶体及胶质小泡的数量也明显减少。提示醋酸铅对甲状腺有明显的毒性作用。

铅对胎鼠甲状腺功能、孕鼠和胚胎的毒性作用

铅的用途广泛,是重要的生活和环境中重金属污染源之一。据报道,铅作业工人和染铅小鼠甲状腺功能下降。流行病学调查和动物实验资料表明,铅具有胚胎毒性。但是有关铅对胎鼠甲状腺功能影响的资料尚未见报道。

环境因素的宫内暴露与生后致癌的研究进展及预防策略

恶性肿瘤是危害人类生命与健康的最严重疾病。近些年,恶性肿瘤发病率的明显变化特点之一就是年轻化趋势,其中儿童和青少年癌症的发病率上升较快,已引起各国学者的广泛关注。一些学者认为,这可能主要与母亲在怀孕期,甚至怀孕前期对各种致癌性环境因素暴露有密切的因果关系。人群流行病学调查或动物试验结果显示,在孕期胎儿或胎仔宫内暴露于射线、烟雾、一些药物、酒精、农药、有机溶剂、重金属、某些病毒感染等环境危险因素,与生后诱发肿瘤有相关性。尽管许多环境危险因素的宫内暴露致癌作用还缺乏相应的人类资料和确切依据,但随着社会经济的发展,人类接触各种环境危险因素的机会越来越多,由于一些环境因素的宫内和孕前暴露而导致其子女诱发肿瘤的潜在风险还在不断增加。因此,当务之急是大力开展环境因素的宫内暴露与子女诱发肿瘤相关的病因学研究,不断发现新的环境危险因素。同时,鉴于胎儿对各种环境致癌因素作用的高敏感性,在怀孕前期和孕期阶段,积极采取有效措施消除其环境危险因素,对降低儿童乃至全民肿瘤发病率具有重要意义。

挥发性有机化学物质和甲醛的室内空气污染动态调查与危险性研究

[目的]阐明新装建室内空气中挥发性有机化学物质(VOCs)和甲醛(HCHO)污染的动态变化趋势,探讨人类暴露的危险性。[方法]以GC-MS和HLPC法分析经时13个月新装建使用初某校舍不同用途的室内空气中VOCs、HCHO等污染浓度,及个人暴露水平。[结果]室内空气中HCHO污染水平以8月最高(教室230μg/m3,室内空气质量标准值=100μg/m3),1年经过后降至使用初的60%,呈现随时间推移逐渐降低的动态趋势;HCHO的释放与室温变化呈正相关(r>0.6410,P<0.01,n=13)。室内空气中VOCs13项指标使用初均有不同程度检出,其中90%以上为甲苯,VOCs和甲苯的空气污染浓度随建成使用时间的推移而降低,3个月后达到室内空气质量标准。[结论]新装建使用初室内空气中HCHO污染普遍存在,随使用时间的推移呈伴有夏季升高的螺旋样下降趋势。VOCs的污染以新装建使用初最高,之后迅速下降,1年后降至使用初的1%左右。

全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及优势

背景:骨髓来源的间充质干细胞含量极低,体外纯化、扩增活性好、分化潜能高的骨髓间充质干细胞,对进一步研究至关重要。目的:进一步验证全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化骨髓间充质干细胞的生物学特性、表型及多向分化潜能。方法:通过全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞标记物表达,分别进行成骨、成脂诱导分化。结果与结论:成功纯化、扩增了高细胞活性、高分化潜能的骨髓间充质干细胞。所得细胞呈成纤维细胞样;表达CD29、CD90,不表达CD45;成骨、成脂诱导分化后,茜素红染色、油红O染色阳性。证实全骨髓贴壁法操作简单、对细胞活性损伤小,可以得到高纯度、高活性、高分化潜能、生物学形态和特征稳定的骨髓间充质干细胞。

三邻甲苯磷酸酯对大鼠C6星形胶质细胞的氧化损伤和细胞周期阻滞作用

三邻甲苯磷酸酯(tri-o-cresyl phosphate,TOCP)是一种有机磷酸酯类化合物,具神经毒性作用。研究表明星形胶质细胞是有机磷化合物(organophosphorus compounds,OPs)神经毒性作用的靶点之一。为了探讨TOCP对星形胶质细胞的毒性作用,采用大鼠C6星形胶质细胞分别经0.1、0.3、1.0和3.0 mmol·L-1TOCP染毒处理24 h,应用MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)活力分析法检测细胞活力,在电子相差显微镜下观察细胞形态,二硫代二硝基苯甲酸(DNTB)比色法测定谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,流式细胞仪检测分析细胞周期。结果显示,经TOCP处理24 h后,大鼠C6星形胶质细胞存活率降低,LDH释放增加,细胞形态也发生了明显的变化。GSH含量和GSH-Px活性降低,G1期细胞数量也逐渐增加。上述结果表明,TOCP对星形胶质细胞具有毒性作用,引起氧化损伤和细胞周期阻滞。

慢性砷暴露对小鼠肾组织DNA损伤及牛磺酸和维生素C的保护作用

目的探讨砷对肾组织DNA氧化性损伤以及牛磺酸和维生素C的保护作用。方法小鼠60只,随机分为6组,即:低剂量组(1mg/LAs2O3)、中剂量组(2mg/LAs2O3)、高剂量组(4mg/LAs2O3)、牛磺酸保护组(4mg/LAs2O3+150mg/kg牛磺酸)、维生素C保护组(4mg/LAs2O3+45mg/kg维生素C)以及生理盐水对照组,用HE染色法进行组织病理学观察,用免疫组化检测肾组织内8-OH-dG的水平。结果各染砷组小鼠肾组织出现不同程度细胞肿胀,胞浆空泡变性等病理学改变。免疫组化表明砷暴露组8-OH-dG的表达显著增高。牛磺酸和维生素C保护组肾组织病理学变化较轻,8-OH-dG表达较少(P<0.01)。结论慢性砷暴露可引起小鼠肾组织DNA氧化性损伤和病理变化,牛磺酸和维生素C具有保护作用。

GSH对砷氧化损伤保护作用的研究

[目的]研究细胞内谷胱甘肽(GSH)对砷致人角质形成细胞系(HaCaT)氧化损伤的保护作用。[方法]用流式细胞仪检测细胞内二氯荧光素(DCF)的荧光强度;用改良硫代巴比妥酸荧光法测定细胞内丙二醛(MDA)含量。[结果]单独用NaAsO2作用后,DCF荧光强度和MDA含量与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),用N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,细胞内DCF荧光强度和MDA含量与砷作用组相比差异有显著性意义(P<0.05),其中MDA达到对照组水平。用丁硫氨酸亚矾胺(BSO)预处理细胞后,DCF荧光强度和MDA含量与NaAsO2单独作用组相比明显增高(P<0.05)。[结论]NAC可减轻砷对细胞的氧化损伤,而BSO则可加重其氧化损伤,说明细胞内的GSH可对砷引起的氧化损伤起一定的保护作用。

砷暴露小鼠肝组织核酸损伤免疫组织化学观察

目的为进一步研究砷对肝脏的毒性作用机制提供实验依据。方法昆明种小鼠40只,随机分为4组:1,2,4 mg/L三氧化二砷染毒组和生理盐水组,连续染毒60 d,取小鼠肝组织固定,用免疫组化方法观察肝脏组织细胞的8-Nitroguanine表达。结果染砷组小鼠肝细胞出现抗8-Nitroguanine免疫染色阳性反应,并随着砷暴露剂量的增加而呈现明显的剂量-反应关系。结论慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠肝细胞8-Nitroguanine的高表达,提示8-硝基鸟嘌呤核苷(8-Nitroguanine)可以作为砷对肝细胞毒性作用的早期敏感生物标志物。