梅毒致继发性膜性肾病1例报道及文献复习

膜性肾病是肾病综合征的一种,肾病综合征是终末期肾病的病因之一。水肿、低蛋白血症是其常见的临床表现,此外,高血压和血脂异常常出现在肾病综合征中[1]。成人常见病因包括糖尿病肾病、局灶性节段性肾小球硬化和膜性肾病。肾病综合征的病因可通过血清学检查和肾脏穿刺活检来确定。尤其是对于病因不明或原因不明的急慢性肾功能减退患者,肾穿刺活检是必要的。其治疗包括非特异性治疗(一般治疗、对症支持治疗、并发症治疗)和特异性治疗(糖皮质激素、细胞毒性药物或其他免疫抑制剂)。

促红细胞生成素对慢性环孢素A肾毒性细胞凋亡的抑制作用

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对慢性环孢素A(CsA)肾毒性致细胞凋亡的抑制作用及机制。方法 SD大鼠分为四组:对照组:给予橄榄油(1 mg·kg-1·d-1皮下注射);对照组+EPO(100 U/kg,3次/w腹腔注射);CsA毒性组:给予CsA(15 mg·kg-1·d-1皮下注射);CsA+EPO。检测各组大鼠的体重、肾功能、收缩期血压、血色素水平;肾小管间质纤维化和细胞凋亡分别以三色染色和TUNEL染色观察;利用RNA原位杂交和免疫印迹法检测转化生长因子(TGF)β1诱导基因h3(βig-h3)、细胞凋亡相关基因的表达。结果与对照组相比,CsA毒性组体重下降、肾功能低下、贫血,伴有肾小管间质纤维化和大量TUNEL阳性细胞。在分子水平上,CsA肾毒性组βig-h3 mRNA和蛋白的表达增加;凋亡基因Fas和Bax表达上调,而Bcl-2蛋白表达减少。EPO治疗均使上述指标逆转(P<0.05)。直线相关分析显示,肾小管间质纤维化程度与βig-h3蛋白表达(r=0.835,P<0.001)和TUNEL阳性细胞数呈正向相关(r=0.698,P<0.001)。结论在慢性CsA肾毒性中,EPO抑制细胞凋亡具有抗纤维化的肾脏保护作用。

过度内质网应激在慢性环孢素A肾毒性细胞凋亡中的作用机制

目的:探讨过度内质网应激在慢性环孢素A(CsA)肾毒性细胞凋亡中的作用机制。方法:将Sprague-Dawley大鼠分为正常对照组和慢性CsA肾毒性组,分别给予皮下注射橄榄油(1 mg·kg-1·d-1)和CsA(15mg·kg-1·d-1)1周或4周后处死大鼠。三色染色和TUNEL染色观察肾小管间质纤维化和细胞凋亡;免疫组织化学染色和免疫印迹检测免疫球蛋白结合蛋白(BiP)、磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)、生长阻滞及DNA损伤诱导蛋白153(GADD153)、caspase-12和caspase-3蛋白表达。结果:CsA注射1周观察不到肾小管间质纤维化和TUNEL阳性细胞,而给予CsA注射4周大鼠表现为明显的肾小管间质纤维化[(38.9±3.3)%vs(0.0±0.0)%,P<0.01]和大量TUNEL阳性细胞[(89±9)%vs(7±2)%,P<0.01]。与对照组比较,CsA组BiP和caspase-12蛋白的表达于1周达到高峰,4周后降至正常水平;反之,eIF2α和caspase-3蛋白表达呈时间依赖性增加。结论:在慢性CsA肾毒性中,过度的内质网应激耗尽分子伴侣,激活凋亡途径,从而导致肾小管上皮细胞凋亡和肾小管间质损伤。

细胞凋亡和细胞自噬在慢性环孢素A肾毒性中的作用

目的探讨细胞凋亡和细胞自噬在慢性环孢素A(CsA)肾毒性中的作用。方法 Sprague-Dawley大鼠分为两组:对照组:皮下注射橄榄油(1 ml·kg-1·d-1)4 w;慢性CsA肾毒性组:皮下注射CsA(15 mg·kg-1·d-1)4 w。检测两组大鼠的体重和肾功能;三色染色检测肾小管间质纤维化程度;ELISA法检测血、尿8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平;原位末端标记法(TUNEL)染色观察细胞凋亡;免疫印迹法检测细胞凋亡调控基因(Bcl-2、Bax、Caspase-3)和细胞自噬体膜型LC3-Ⅱ蛋白的表达;Pearson直线相关分析肾小管间质纤维化程度与细胞凋亡和LC3-Ⅱ蛋白表达的相关关系。结果与对照组相比,毒性组大鼠体重减轻、肾功能低下、血尿8-OHdG水平升高,同时肾毒性组可见明显的肾小管间质纤维化和大量TUNEL阳性细胞。免疫印迹结果表明,毒性组Bax、Caspase-3、LC3-Ⅱ蛋白的表达明显增加,反之,Bcl-2的表达显著减少。直线相关分析提示,肾小管间质纤维化程度与TUNEL阳性细胞数和LC3-Ⅱ蛋白表达呈正向相关。结论细胞凋亡和细胞自噬参与了慢性CsA肾毒性肾小管间质的损伤。

虫草提取物CS-4对他克莫司所致大鼠胰腺和肾脏损伤的保护

目的探讨冬虫夏草(CS)-4提取物对他克莫司(TAC)所致胰腺和肾脏损伤的保护作用及分子机制。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠皮下注射TAC(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))建立TAC肾毒性模型16只,肾毒性模型中随机选8只大鼠给予CS治疗(5 g·kg^(-1)·d^(-1),灌胃)4 w。检测大鼠的血糖、胰岛素水平、肾功能、24 h尿蛋白排泄率、8-羟基脱氧鸟苷(8OHdG);采用免疫组化和免疫印迹法分别检测胰腺胰岛素、炎性介质、致纤因子、细胞凋亡相关基因的表达。结果CS明显减少胰腺细胞凋亡、保护胰岛数量,其结果是血糖下降和胰岛素水平上升;此外,CS改善肾功能和肾小管间质纤维化,减少尿蛋白排泄率和血尿8-OHdG水平。在分子水平上,CS下调炎性介质和致纤因子的表达,调节细胞凋亡调控基因的表达。结论 CS对TAC诱导的胰腺和肾脏损伤具有降糖、抗炎、抗纤维化等保护作用。

左卡尼汀对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护机制研究

目的:探讨左卡尼汀(L-carnitine,LC)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏保护的分子机制。方法:对雄性Sprague-Dawley大鼠腹腔注射STZ(65 mg/kg)建立糖尿病模型,造模成功大鼠给予LC(50 mg·kg^(-1)·d^(-1)或200 mg·kg^(-1)·d^(-1))12周治疗,检测各组大鼠的肾功能、24 h尿蛋白排泄率和肾小球硬化程度;免疫组化和Western blot法分别检测炎性因子、致纤因子、核因子κB和细胞凋亡调控基因的表达。结果:LC治疗可明显减轻糖尿病大鼠肾小球硬化,保持足细胞数量,这些改变伴随着尿蛋白排泄率的减少和肾功能的改善。在分子水平上,LC可下调炎性介质和致纤因子的表达,调节细胞凋亡调控基因的表达,此作用可能与干预核因子κB信号通路有关。结论:LC对STZ诱导的DN大鼠具有抗炎、抗肾小球硬化的肾脏保护作用。

胰激肽原酶减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

目的:探讨胰激肽原酶(PK)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾间质纤维化大鼠肾脏的保护作用。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠建立UUO模型后随机分为4组:UUO7组、UUO14组、UUO+PK7组和UUO+PK14组,其中UUO+PK7组和UUO+PK14组给予腹腔注射PK(7.2 U·kg^−1·d^−1)治疗14 d,分别于第7天和第14天处死大鼠;假手术组给予生理盐水。采用Masson染色、HE染色和透射电镜观察各组大鼠的肾间质纤维化程度;免疫组化和Western blot法分别检测炎症因子、致纤因子、氧化应激、细胞凋亡及细胞自噬调控因子的表达。结果:PK治疗明显减轻UUO大鼠肾小管间质纤维化程度,并呈时间依赖性,这种改善伴随着炎症介质[单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和Toll样受体2(TLR-2)]及致纤因子[转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)]的表达下调。UUO所致氧化应激表现为氧化酶[NADPH氧化酶2(NOX-2)和NOX-4]的表达增加和抗氧化酶[超氧化物岐化酶1(SOD1)和SOD2]的表达下降,这种改变与细胞凋亡(Bcl-2/Bax和cleaved caspase-3)及细胞自噬(LC3B、beclin-1和P62)调控因子表达失衡紧密相关,PK逆转了上述所有指标。结论:PK可能通过干预氧化应激和程序性细胞死亡对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏具有抗纤维化作用。

普伐他汀和洛沙坦联合应用对慢性环孢素A肾毒性模型大鼠转化生长因子诱导基因h3的抑制作用

[目的]探讨普伐他汀和洛沙坦联合应用对慢性环孢素A(CsA)肾毒性模型大鼠抗纤维化作用的分子机制.[方法]取Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为对照组(橄榄油1mg/kg)、CsA毒性组(皮下注射CsA 15mg/kg)、洛沙坦治疗组(洛沙坦10mg/kg+CsA)、普伐他汀治疗组(普伐他汀20mg/kg+CsA)、联合治疗组(CsA+洛沙坦+普伐他汀),均每日给药1次,持续4周.检测各组大鼠肾功能、收缩期血压、血脂水平;利用三色染色观察肾组织纤维化程度;利用Northern杂交、RNA原位杂交、免疫印迹法分别检测转化生长因子β1(TGF-β1)和TGF-β诱导基因h3(βig-h3)的表达.[结果]与CsA毒性组比较,普伐他汀和洛沙坦单独治疗组肾小管间质纤维化明显减轻(洛沙坦24.1%±4.0%,普伐他汀30.3%±5.2%,P<0.01,2.0%±3.0%),同时TGF-β1(洛沙坦230%±20%,普伐他汀240%±15%,P<0.01)和βig-h3(洛沙坦178%±21%,普伐他汀167%±10%,P<0.01)表达均明显降低,联合治疗进一步降低上述指标水平(肾小管间质纤维化程度13.5%±2.5%,TGF-β1 150%±28%,βig-h3 126%±9%,P<0.01).直线相关分析结果显示,βig-h3表达与TGF-β1(r=0.787,P<0.001)和肾小管间质纤维化程度(r=0.688,P<0.001)呈正相关.但是各组收缩期血压和血脂水平间差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]在慢性CsA肾毒性中,普伐他汀和洛沙坦联合应用通过抑制βig-h3表达起到抗纤维化协同作用,而不依赖于降低血压或降低血脂作用.

FTY720对他克莫司所致大鼠肾损伤的保护作用

目的探讨FTY720对他克莫司(TAC)所致肾损伤保护的分子机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠分为四组给予橄榄油、TAC、FTY720干预4 w。检测各组大鼠的生化、肾功能、肾小管间质纤维化程度;免疫组化和Western印迹法分别检测炎性因子、致纤因子的表达。结果 FTY720减少血白细胞和淋巴细胞数,同时明显减少肾小管间质淋巴细胞(CD3和CD8)、单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的浸润,改善肾功能。Western印迹显示FTY720显著下调炎性介质骨桥蛋白(OPN)和致纤因子蛋白转化生长因子(TGF)-β1的表达。结论 FTY720对TAC所致肾损伤具有抗炎、抗纤维化的肾脏保护作用。

左卡尼汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的探讨左卡尼汀(LC)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化的保护作用机制。方法38只雄性SD大鼠建立UUO模型后随机分为UUO7组(n=8)、UUO7+LC组(n=8)、UUO14组(n=8)、UUO14+LC组(n=8)和假手术组(n=6),其中UUO7+LC组、UUO14+LC组给予腹腔注射LC〔200 mg/(kg·d)〕,分别于第7、14天处死大鼠;假手术组给予等量生理盐水。Masson染色、HE染色、电镜观察各组肾间质纤维化程度;免疫组化和Western印迹法分别检测炎性因子、致纤因子、氧化应激、染色体相关基因的表达。结果LC治疗明显减轻UUO大鼠肾小管间质纤维化程度,伴随着炎性介质〔单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、Toll样受体(TLR)-2、骨桥蛋白(OPN)〕和致纤因子〔转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)〕的表达下调,呈时间依赖性。UUO所致氧化应激表现为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)-2表达增加和抗氧化酶线粒体锰超氧化物歧化酶(MnSOD)表达下降,这种改变与染色体功能失调及其调控基因表达失衡紧密相关,LC逆转了上述所有指标。结论LC通过干预氧化应激和保护染色体功能对UUO大鼠肾脏具有抗炎、抗纤维化作用。

普伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨

目的明确普伐他汀（pravastatin）对大鼠肾缺血再灌注（ischemia reperfusion，IR）损伤的保护作用，并探讨其作用的分子机制。方法健康Sprague-Dawley大鼠被分为假手术组（Sham，n=5）、缺血再灌注组（IR，n=8）和普伐他汀预处理组（P＋IR，n=8）。IR组和P＋IR组大鼠给予双侧肾动脉夹闭45min后恢复灌注，术后24h后处死大鼠。P＋IR组大鼠术前1周给予普伐他汀（20mg·kg^-1·d^-1）灌胃。检测各组大鼠肾功能、体质量和血脂变化。过碘酸希夫（PAS）染色观察。肾组织病理改变；免疫组化法检测肾组织热休克蛋白70（HSP-70）的蛋白表达；TUNEL法和Western印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和活性天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（活性Caspase-3）的变化。结果与Sham组相比，P＋IR组大鼠肾组织HSP-70蛋白表达明显增加[（173．9±19．2）％比（100．9±13．7）％，P〈0．01]。与Sham组相比，IR组大鼠Scr、血BUN水平升高（P〈0．01），肾组织坏死评分增高【（36．0±1．2）％比0，P〈0．01】，TUNEL阳性细胞数增多[（295．4±28.3）个比（1．4±1．1）个，P〈0．011。IR组大鼠肾组织Bcl-2／Bax蛋白比值下降[（57.3±7．3）％比（100．0±5．4）％，P〈0．01]，活性Caspase-3蛋白表达增高[（385．2＋38．7）％比（96．9±3．1）％，P〈0．01]。P＋IR组大鼠上述指标的改变减轻（P〈0．05）。结论普伐他汀预处理可保护大鼠肾IR损伤，其肾脏保护作用机制与诱导介质HSP．70蛋白有关，而不依赖其降脂作用。

左卡尼汀对环孢素A所致胰腺和肾脏损伤的保护作用

目的探讨左卡尼汀对环孢素A(CsA)所致胰腺和肾脏损伤保护作用的分子机制。方法将SD大鼠分为6组,即正常对照(VH)组、正常对照+左卡尼汀低剂量(VH+L50)组、正常对照+左卡尼汀高剂量(VH+L200)组、CsA组、CsA+左卡尼汀低剂量治疗(CsA+L50)组和CsA十左卡尼汀高剂量治疗(CsA+L200)组。检测胰腺及肾功能指标、自噬性溶酶体(LC3-Ⅱ)表达、肾小管间质纤维化(TIF)、肾脏TGF-β1和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。结果 CsA诱导胰腺损伤表现为血糖和HbA1c升高,血浆胰岛素水平下降,胰腺LC3-Ⅱ表达升高(P<0.01)。肾脏中CsA致Scr和BUN升高、TIF增加(P<0.01),该变化伴随TGF-β1、8-OHdG和LC3-Ⅱ表达增加。左卡尼汀治疗对各指标均有效,LC3-Ⅱ表达仅在左卡尼汀高剂量治疗下减少(P<0.05)。结论左卡尼汀对CsA所致胰腺和肾脏损伤有保护作用。