延边黄牛SCD1基因多态性及其与经济性状的关联分析

本研究旨在探索延边黄牛硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoy-CoA desaturase 1,SCD1)基因多态性及其与经济性状的相关性。以157头36月龄健康无病、体重相近的延边黄牛为研究对象,颈静脉采血提取基因组DNA,根据GenBank中牛SCD 1基因序列(登录号:AC_000181.1),利用Oligo 6.0软件设计特异性引物,应用PCR扩增SCD 1全长基因后直接测序,分析其多态位点,并应用生物信息学软件分析其蛋白结构;屠宰前测定活体重、胴体重、屠宰率、背膘厚等胴体性状,屠宰后采集背最长肌,测定眼肌面积、蒸煮损失、滴水损失、嫩度、系水力、pH、脂肪酸含量等肉质性状,并通过一般线性模型分析方法对延边黄牛SCD 1基因SNPs与肉质性状的相关性进行了分析。结果发现,延边黄牛SCD 1基因846 bp处存在A→G突变(g846 A→G)、1 022 bp处存在C→T突变(g1022 C→T),其中g1022 C→T突变导致丙氨酸(A)突变为缬氨酸(V),但未引起三级结构改变。关联分析结果表明,g846 A→G多态位点与延边黄牛宰前活重、胴体重、滴水损失及硬脂酸、亚油酸含量存在显著相关(P<0.05);g1022 C→T多态位点与延边黄牛宰前活重、胴体重及硬脂酸含量存在显著相关(P<0.05),说明上述2个位点与延边黄牛相关肉质性状存在显著相关,该突变位点可作为潜在的分子标记。

苜蓿基因组总DNA提取及RAPD反应条件优化

采用CTAB改良法,从苜蓿成熟叶片中提取到高质量、高纯度的DNA。对RAPD反应程序的重要参数进行摸索和优化试验,建立的适合苜蓿RAPD分析应用的体系组成为:反应液总体积25μL,模板DNA浓度135 ng.μL-1,10×缓冲液浓度2.5 mmol.L-1,10碱基引物浓度15pmol,Taq DNA聚合酶1U,dNTP浓度1.5mmol.L-1,Mg2+浓度2.5 mmol.L-1。

加强学科建设以促进创新型研究生培养

学科建设是高校的核心工作,学科建设关系到研究生教育的规模和质量,只有高素质的学科队伍,高水平的学术成果,才能培养出高质量、高层次的人才。研究生创新能力的培养必须从学校的学科建设抓起,以学科创新为方向,大力加强学科建设,通过学科的发展带动教学和科研水平的提高,促进创新型人才的培养。

秉承科学发展观,培养与时俱进的研究生

科学发展观是加强和改进研究生思想政治教育的指导方针,为研究生思想政治教育提供了新的理论指导、提出了新的思想方法、提出了新的更高要求。用科学发展观确立研究生的思想,培养研究生的自主创新能力,打开研究生政治思想的新局面。

榆干侧耳人工驯化栽培研究初探

对野生榆干侧耳的人工驯化栽培进行了初步研究 ,结果表明母种培养基以马铃薯综合培养基为最好 ,原种培养基以玉米粒为最好 ,子实体人工栽培培养料以木屑、麦麸、蔗糖。

卓越农林人才培养背景下“双师型”教师教育培训模式探讨——以延边大学农学院为例

在卓越农林人才培养背景下,"双师型"教师师资队伍建设起着越来越重要的作用。探讨"双师型"教师培养模式,提升教师的教学、科研及实践能力,已成为高校的重点任务之一。本文就从"双师型"教师培养的必要性出发,对农业院校"双师型"教师培训模式进行了探讨。

地方高校师德师风建设现状与对策

文章在阐述问卷信息与样本分布情况的基础上,调查分析了地方高校师德师风建设现状,包括教师自律意识情况、教育行为表现情况、师德师风总体评价情况、师德师风建设情况,然后提出了地方高校师德师风建设建议。

卓越农林人才教育培养模式下学生学习满意度调查

从学生学习满意度角度分析和探讨卓越农林人才教育培养模式的优点、存在的问题、影响因素及对策建议。采用自编问卷调查,以延边大学农学院动物科学与动物医学专业的220名学生为调查对象,探讨其对现行教育培养模式的满意程度。

ADCY2基因表达对延边黄牛脂肪前体细胞成脂分化的影响

本试验旨在研究环腺苷酸(3′,5′-cyclic adenosine monophosphote,cAMP)环化酶合成酶2(adenylyl cyclase 2,ADCY2)基因对延边黄牛脂肪前体细胞成脂分化的影响。选取3日龄的延边黄牛腹股沟皮下脂肪组织进行脂肪前体细胞的分离、培养和诱导分化;设计ADCY2基因的干扰片段(siADCY2-1、2、3),构建pEX4过表达载体;分别收集正常诱导(对照组)、干扰和过表达0、5和10 d的脂肪细胞。用实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖激活物受体(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPα)和ADCY2在细胞分化过程中mRNA的转录水平,并用Western blotting法检测其蛋白的表达;用油红O染色检测脂滴含量的变化;用甘油三酯试剂盒检测甘油三酯含量。试验结果表明,在成脂分化过程中,与未分化相比,ADCY2基因在分化的第5和10天表达量均极显著上升(P<0.01),而分化第10天与第5天相比水平极显著下降(P<0.01);siADCY2-1干扰效率最高,过表达ADCY2基因使其mRNA水平升高;与对照组相比,过表达组细胞内ADCY2基因mRNA水平提高了约4000000倍,脂肪细胞内脂滴含量和甘油三酯的含量极显著提高(P<0.01),成脂关键基因C/EBPα和PPARγ表达极显著上调(P<0.01),而RNA干扰组细胞内ADCY2基因mRNA水平极显著降低(P<0.01),脂肪细胞内脂滴含量和甘油三酯的含量极显著下降,成脂关键基因C/EBPα和PPARγ表达极显著下调(P<0.01)。因此,ADCY2基因过表达能显著增加成熟脂肪细胞的脂滴含量及甘油三酯含量,促进成脂关键基因C/EBPα和PPARγ的表达,说明ADCY2基因对脂肪细胞分化具有正向调控作用。

分子标记技术在牧草上的研究进展

介绍了我国牧草资源情况以及2种主要分子标记RAPD和RFLP在苜蓿遗传图谱的构建和基因定位、品种的分类和鉴定、遗传育种中的作用等3个方面的应用现状,同时指出了存在的问题.

松辽黑猪前体脂肪细胞分离及诱导分化

为建立松辽黑猪前体脂肪细胞分化体系,了解其增殖规律及相关的脂肪标志基因在细胞分化过程中的相对表达。选用7日龄松辽黑猪,用Ⅰ型胶原酶消化脂肪组织得到前体脂肪细胞,传代后进行形态学观察并绘制生长曲线,利用传统"鸡尾酒"法进行诱导分化,油红O对分化后的细胞进行染色,判断分化效果,提取总RNA,对成脂标志基因进行相对表达量分析。结果表明:分离获得的松辽黑猪原代前体脂肪细胞可贴壁生长,形似成纤维细胞,细胞生长曲线符合细胞生长规律,近似"S"形;诱导分化后的细胞具有成熟脂肪细胞的典型特征,细胞内聚集大量脂滴;诱导后第10天,细胞内甘油三酯含量极显著提高;成脂标志基因PPARγ、C/EBPα在分化后的细胞中相对表达量极显著升高(P<0.01),而FoxO1在分化前相对表达量最高,第5天表达量与第0天相比极显著下降(P<0.01),但第10天的表达量极显著高于第5天(P<0.01),且第10天表达量与第0天无显著差异(P>0.05)。试验建立了松辽黑猪前体脂肪细胞的分离体系,为进一步研究松辽黑猪脂肪沉积与代谢机制以及改善肉质提供了依据。

延边黄牛肾周棕色脂肪的鉴定与UCP1的表达

低温症是影响养牛业的一个严重问题,棕色脂肪的快速产热是冬季维持体温的重要途径。本文对寒冷地区的延边黄牛棕色脂肪组织形态和标志分子解耦联蛋白1(UCP1)的表达进行了检测。结果显示:新生牛存在经典的棕色脂肪组织,UCP1表达水平极显著高于三月龄小牛(P<0.01);新生牛冬季肾周脂肪UCP1表达水平极显著高于夏季(P<0.01),说明延边黄牛的寒冷适应性可能与棕色脂肪的季节性变化有关。

胰岛素和油酸对延边黄牛前脂肪细胞分化的影响

为探讨胰岛素和油酸对延边黄牛前脂肪细胞分化的影响,试验采用胶原酶消化法在无菌条件下分离获得延边黄牛原代脂肪细胞,并进行传代及诱导分化,通过油红O染色法、甘油三酯含量测定及实时荧光定量RT-PCR方法研究胰岛素和油酸单独处理和同时处理96 h后,对延边黄牛脂肪细胞分化的影响,以及与脂肪细胞分化相关的主要标志基因PPARγ、LPL、SREBP1和C/EBPαmRNA表达的影响。结果表明,在分化处理96 h后,胰岛素单独处理虽不能促使脂滴形成,但却显著提高了PPARγ基因的表达量;油酸不仅对脂滴的形成有着明显的促进作用,同时还显著提高了PPARγ和SREBP1基因的表达量;二者同时处理时,脂滴数量和大小以及甘油三酯含量均大于单独处理时,但各标志基因的表达量与单独处理时相比却都各不相同。因此得出,胰岛素和油酸均在延边黄牛脂肪细胞的分化过程中起着重要作用,通过对脂肪形成相关基因的调节作用,进而实现脂肪细胞的分化并促进脂滴的形成。

42个苜蓿品种间亲缘关系的RAPD分析

应用RAPD标记,对42个不同苜蓿品种的亲缘关系进行研究。采用CTAB改良法可快速提取到较高质量苜蓿基因组总DNA用于RAPD扩增,并从RAPD反应中筛选出19个10碱基随机引物,总共扩增出220条带,其中138条呈多态性,占62.7%,82条为单态性带,占37.3%;利用MEGA2.1软件计算42个苜蓿品种遗传距离,进行UPGMA聚类分析,遗传距离在0.174~0.500之间,说明供试苜蓿品种间遗传距离较大,亲缘关系较远。遗传距离为0.435时,42个苜蓿品种可分为五类,不同苜蓿品种间的亲缘关系有较大的差异,表明RAPD标记可作为苜蓿品种亲缘关系判定的依据。这为苜蓿品种遗传改良、杂交亲本选配提供可靠的科学依据。