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猫角膜缘干细胞不同采集、分离与培养鉴定方法的对比研究
1
作者
胥辉豪
冯雪倩
+6 位作者
朴雪玲
慎晓军
郑小波
杨恒
林珈好
金艺鹏
林德贵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期3091-3101,共11页
本研究旨在对比不同的分离与培养方法体外培养猫角膜缘干细胞(feline limbal stem cells,FLSCs)的效果,建立使FLSCs持续稳定增殖、结构及功能正常的最佳分离与培养体系。在手术显微镜下活体采集猫角膜缘组织,分别使用组织贴壁法(T法)、...
本研究旨在对比不同的分离与培养方法体外培养猫角膜缘干细胞(feline limbal stem cells,FLSCs)的效果,建立使FLSCs持续稳定增殖、结构及功能正常的最佳分离与培养体系。在手术显微镜下活体采集猫角膜缘组织,分别使用组织贴壁法(T法)、混合酶消化法(N法)、混合酶消化法联合组织贴壁法(NT法)分离FLSCs,鉴定LSCs标志蛋白ABCG2,以筛选最适分离方法。用BC培养基、DLM培养基和SCM培养基进行细胞培养,连续7 d细胞计数、观察细胞形态,选取LSCs的阳性标志物p63、波形蛋白和上皮分化标记物CK3、CK12定性分析第3、4、5代培养细胞。结果显示:3种方法分离的细胞中,ABCG2均呈阳性表达,NT法表达最强,表明3种方法均可分离FLSCs,NT法消化分离效果最好。3种培养基均可培养FLSCs,细胞形态无差异,细胞在DLM组中增殖速度最快,更快到达细胞生长峰值,与其他两组比,差异显著(P<0.05)。FLSCs生长曲线图呈典型“S”型,前72 h为迟缓期,72~216 h为对数生长期,216~264 h则基本处于平稳期,从264 h开始进入衰亡期。FLSCs群体倍增时间为38.9 h,平均最大增殖浓度为5.66×10^(5)cells·mL^(-1)。第3、4和5代FLSCs中波形蛋白、p63均呈强阳性表达,CK3和CK12不表达。使用NT法分离FLSCs,并在DLM中进行培养,可建立稳定增殖的FLSCs体外培养体系。
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关键词
猫
角膜缘干细胞
分离方法
培养体系
下载PDF
职称材料
新型生物组织工程角膜移植治疗犬猫角膜疾病的回顾性分析
2
作者
胥辉豪
焦弋恩
+12 位作者
郑小波
张志鹏
杨丽辉
林金洲
王力波
唐静
李启卷
刘江渝
陈子洋
胡小艳
朴雪玲
张慧
甘玲
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4389-4402,共14页
本研究旨在大型回顾性分析总结新型生物组织工程角膜(biotissue-engineered cornea,BEC)治疗犬猫角膜疾病的手术方法与长期临床效果。本研究回顾了2018—2022年使用BEC进行眼表移植手术并至少跟踪随访3个月及以上的犬猫的医疗记录。包...
本研究旨在大型回顾性分析总结新型生物组织工程角膜(biotissue-engineered cornea,BEC)治疗犬猫角膜疾病的手术方法与长期临床效果。本研究回顾了2018—2022年使用BEC进行眼表移植手术并至少跟踪随访3个月及以上的犬猫的医疗记录。包括坏死性角膜炎、深度角膜溃疡、后弹力层膨出以及角膜穿孔在内的犬猫患眼被纳入本研究。术后每周定期检查,并在术后0、3、6和12个月对部分患眼进行了光学相干断层扫描检查,根据最后一次检查结果对术眼角膜进行评级。本研究共纳入139只患眼(猫112例,犬27例),其中板层角膜移植103只眼,全层角膜移植36只眼。使用4种不同厚度的BEC植片(200、300、400和450μm),植片的平均直径为7.74 mm(范围为3~13 mm)。术后影响相对较大的并发症包括植片部分松脱或裂开(5例,3.60%)、植片溶解或穿孔(8例,5.76%)、角膜植床坏死(1例,0.72%)和眼球萎缩(1例,0.72%)。术后随访时间为3~50个月(中位数18个月),最终139只眼均保持了角膜和眼球完整性,其中133只眼(95.68%)保留了较敏锐视力。统计学分析显示,角膜植片透明度与动物年龄(P=0.021)、物种(P=0.000)、植片直径(P=0.032)、是否全层移植(P=0.000)以及角膜再上皮时间(P=0.000)显著正相关。BEC是一种安全且有效的角膜植片,可用于犬猫板层或全层角膜移植术,具有广泛的临床应用价值。
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关键词
犬
猫
角膜移植
生物组织工程角膜
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职称材料
建筑业的税收筹划策略以及注意问题探析
3
作者
朴雪玲
马兴义
《中国经贸》
2011年第16期229-230,共2页
目前,我国建筑业亟须合理缩减成本,促进可持续发展。而税收筹划在守法情况下能够减轻企业税收负担,促进企业经济效益发展。为此,在建筑业中实施税收筹划是很有必要的。本文主要对税收筹划的概念、建筑业税收筹划的策略和建筑业税收...
目前,我国建筑业亟须合理缩减成本,促进可持续发展。而税收筹划在守法情况下能够减轻企业税收负担,促进企业经济效益发展。为此,在建筑业中实施税收筹划是很有必要的。本文主要对税收筹划的概念、建筑业税收筹划的策略和建筑业税收筹划应注意的问题进行了分析。
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关键词
建筑业
税收筹划
策略
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职称材料
题名
猫角膜缘干细胞不同采集、分离与培养鉴定方法的对比研究
1
作者
胥辉豪
冯雪倩
朴雪玲
慎晓军
郑小波
杨恒
林珈好
金艺鹏
林德贵
机构
西南大学动物医学院
西南大学发光分析与分子传感教育部重点实验室
中国农业大学动物医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第7期3091-3101,共11页
基金
国家自然科学基金(31972730)
西南大学实验技术研究项目(SYJ2020013)
深圳市瑞鹏公益基金会高校青年教师(小动物临床)科研基金(RPJJ2020001)。
文摘
本研究旨在对比不同的分离与培养方法体外培养猫角膜缘干细胞(feline limbal stem cells,FLSCs)的效果,建立使FLSCs持续稳定增殖、结构及功能正常的最佳分离与培养体系。在手术显微镜下活体采集猫角膜缘组织,分别使用组织贴壁法(T法)、混合酶消化法(N法)、混合酶消化法联合组织贴壁法(NT法)分离FLSCs,鉴定LSCs标志蛋白ABCG2,以筛选最适分离方法。用BC培养基、DLM培养基和SCM培养基进行细胞培养,连续7 d细胞计数、观察细胞形态,选取LSCs的阳性标志物p63、波形蛋白和上皮分化标记物CK3、CK12定性分析第3、4、5代培养细胞。结果显示:3种方法分离的细胞中,ABCG2均呈阳性表达,NT法表达最强,表明3种方法均可分离FLSCs,NT法消化分离效果最好。3种培养基均可培养FLSCs,细胞形态无差异,细胞在DLM组中增殖速度最快,更快到达细胞生长峰值,与其他两组比,差异显著(P<0.05)。FLSCs生长曲线图呈典型“S”型,前72 h为迟缓期,72~216 h为对数生长期,216~264 h则基本处于平稳期,从264 h开始进入衰亡期。FLSCs群体倍增时间为38.9 h,平均最大增殖浓度为5.66×10^(5)cells·mL^(-1)。第3、4和5代FLSCs中波形蛋白、p63均呈强阳性表达,CK3和CK12不表达。使用NT法分离FLSCs,并在DLM中进行培养,可建立稳定增殖的FLSCs体外培养体系。
关键词
猫
角膜缘干细胞
分离方法
培养体系
Keywords
feline
limbal stem cells
isolation method
culture system
分类号
S857.6 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
新型生物组织工程角膜移植治疗犬猫角膜疾病的回顾性分析
2
作者
胥辉豪
焦弋恩
郑小波
张志鹏
杨丽辉
林金洲
王力波
唐静
李启卷
刘江渝
陈子洋
胡小艳
朴雪玲
张慧
甘玲
机构
西南大学动物医学院
西南大学发光分析与分子传感教育部重点实验室
杭州瑞派虹泰宠物医院
维特(深圳)动物医院
厦门御宝贝宠物医院
宠颐生沈阳中心医院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期4389-4402,共14页
基金
西南大学实验技术研究项目(SYJ2020013)
深圳市瑞鹏公益基金会高校青年教师(小动物临床)科研基金(RPJJ2020001)。
文摘
本研究旨在大型回顾性分析总结新型生物组织工程角膜(biotissue-engineered cornea,BEC)治疗犬猫角膜疾病的手术方法与长期临床效果。本研究回顾了2018—2022年使用BEC进行眼表移植手术并至少跟踪随访3个月及以上的犬猫的医疗记录。包括坏死性角膜炎、深度角膜溃疡、后弹力层膨出以及角膜穿孔在内的犬猫患眼被纳入本研究。术后每周定期检查,并在术后0、3、6和12个月对部分患眼进行了光学相干断层扫描检查,根据最后一次检查结果对术眼角膜进行评级。本研究共纳入139只患眼(猫112例,犬27例),其中板层角膜移植103只眼,全层角膜移植36只眼。使用4种不同厚度的BEC植片(200、300、400和450μm),植片的平均直径为7.74 mm(范围为3~13 mm)。术后影响相对较大的并发症包括植片部分松脱或裂开(5例,3.60%)、植片溶解或穿孔(8例,5.76%)、角膜植床坏死(1例,0.72%)和眼球萎缩(1例,0.72%)。术后随访时间为3~50个月(中位数18个月),最终139只眼均保持了角膜和眼球完整性,其中133只眼(95.68%)保留了较敏锐视力。统计学分析显示,角膜植片透明度与动物年龄(P=0.021)、物种(P=0.000)、植片直径(P=0.032)、是否全层移植(P=0.000)以及角膜再上皮时间(P=0.000)显著正相关。BEC是一种安全且有效的角膜植片,可用于犬猫板层或全层角膜移植术,具有广泛的临床应用价值。
关键词
犬
猫
角膜移植
生物组织工程角膜
Keywords
canine
feline
corneal transplant
biotissue-engineered cornea
分类号
S857.6 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
建筑业的税收筹划策略以及注意问题探析
3
作者
朴雪玲
马兴义
机构
重庆绿地申润房地产开发有限公司
中交二航局第二工程有限公司
出处
《中国经贸》
2011年第16期229-230,共2页
文摘
目前,我国建筑业亟须合理缩减成本,促进可持续发展。而税收筹划在守法情况下能够减轻企业税收负担,促进企业经济效益发展。为此,在建筑业中实施税收筹划是很有必要的。本文主要对税收筹划的概念、建筑业税收筹划的策略和建筑业税收筹划应注意的问题进行了分析。
关键词
建筑业
税收筹划
策略
分类号
F812.42 [经济管理—财政学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猫角膜缘干细胞不同采集、分离与培养鉴定方法的对比研究
胥辉豪
冯雪倩
朴雪玲
慎晓军
郑小波
杨恒
林珈好
金艺鹏
林德贵
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
新型生物组织工程角膜移植治疗犬猫角膜疾病的回顾性分析
胥辉豪
焦弋恩
郑小波
张志鹏
杨丽辉
林金洲
王力波
唐静
李启卷
刘江渝
陈子洋
胡小艳
朴雪玲
张慧
甘玲
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
3
建筑业的税收筹划策略以及注意问题探析
朴雪玲
马兴义
《中国经贸》
2011
0
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职称材料
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