环形泰勒虫亚端粒编码可变分泌蛋白家族部分基因的研究进展

环形泰勒虫作为一种转化型泰勒虫,可感染牛单核巨噬细胞,并使其发生转化。目前,仅知环形泰勒虫通过劫持宿主细胞信号通路完成转化,但其转化机制尚未阐明。环形泰勒虫亚端粒编码可变分泌蛋白(SVSP)家族作为环形泰勒虫基因组的最大多基因家族,其在虫体-宿主相互作用中的功能尚不清楚。因此,本文通过对环形泰勒虫SVSP家族中部分基因的结构、表达特征、与宿主相互作用和可能发挥的功能进行总结,以期为环形泰勒虫-宿主相互作用机制和致病机理研究提供思路,同时也为癌症基础生物学研究提供借鉴。

青藏高原田鼠源多刺带绦虫囊尾蚴的鉴定及遗传进化分析

为鉴定我国青藏高原分离的田鼠源绦虫囊尾蚴的种类及其遗传进化特征,本研究通过对该囊尾蚴进行形态学观察,采用绦虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该囊尾蚴。形态学观察结果显示,该囊尾蚴为小型虫体,虫体背部和腹部稍扁平,长度约为200.0 mm,虫体横截面直径约为2.5 mm;虫体分为3部分:前端部分直径通常略小,中间部分表面为皱褶区域,约占整个虫体的一半,后端部分细长,相对光滑,有平行的横向凹陷;PCR结果显示,在约440 bp处出现与预期目的片段大小相符的条带,测序结果显示,该基因序列与多刺带绦虫(T.polyacantha)cox1基因序列(EU544581)的同源性高达97.0%。初步表明该囊尾蚴属于多刺带绦虫囊尾蚴。采用多刺带绦虫线粒体cox1、nad1和12S rRNA特异性基因引物经PCR进一步鉴定并测序。将3个基因测序结果与GenBank登录的多刺带绦虫的相应基因序列比对,分析它们之间的同源性,并构建这3个基因的进化树,分析它们之间的遗传进化关系。PCR结果显示,分别扩增到约390 bp(cox1)、480 bp(nad1)和240 bp(12S rRNA)的目的条带。同源性分析结果显示,3个基因序列与GenBank登录的多刺带绦虫相应基因序列的同源性最高分别达99.4%、98.7%和100.0%。进化树结果显示,该虫株的3个基因均与不同宿主的多刺带绦虫处于同一分支。本研究在国内首次鉴定到青藏高原田鼠源多刺带绦虫囊尾蚴,并分析其线粒体基因的同源性及遗传演化关系,为多刺带绦虫的分类、鉴定和种群遗传进化分析及分子流行病学调查等奠定了研究基础。

基于重组酶介导等温扩增技术的羊口疮病毒核酸检测方法的建立及初步应用

为建立羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)核酸的快速检测方法,本研究根据ORFV B2L基因保守序列设计特异性引物,通过优化反应温度与时间初步建立了基于重组酶介导等温扩增技术(RAA)的ORFV检测方法。优化试验结果显示:该方法在37℃反应40 min检测效果最佳。采用该方法对ORFV、山羊痘病毒、O型和A型口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、山羊副流感病毒3型等临床常见症状相似的病毒核酸检测,结果显示:该方法除对ORFV的检测结果为阳性外,对羊的其他病毒的检测结果均为阴性,特异性较强。将质粒标准品10倍倍比稀释(1×10^(9)拷贝/μL~1×10^(0)拷贝/μL)后为模板,利用本研究建立的RAA方法检测,结果显示:该方法对ORFV质粒标准品的最低检测限为1×10^(4)拷贝/μL,敏感性较高。利用本研究建立的方法对95份临床样品(15份组织样品和80份血液样品)检测,结果显示:该RAA方法能够对临床样品快速检测,组织样品和血液样品的阳性率分别为33.33%(5/15)和6.25%(5/80),该检测结果与普通PCR检测方法的符合率均为100%,表明本实验建立的RAA方法能够满足临床样品的检测需求。本研究建立的ORFV RAA方法具有操作简单、特异性强、反应快速等特点,为ORFV的快速检测提供新的技术选择。

青海称多县高原鼠兔感染皮蝇蛆调查及形态学观察

高原鼠兔（Ochotona curzoniae），又称它为“鸣声鼠”，藏语叫“阿不扎”，是兔形目（Lagomorpha）、鼠兔科（Ochototonide）、鼠兔属（Ochotona）的啮齿类小型哺乳动物，主要分布于西藏、青海、甘南、川西高原等地。高原鼠兔是草食性鼠类，它们最爱吃优良牧草的芽、叶、茎、花、种子及根，

感染高原鼠兔的皮蝇蛆线粒体CO1基因序列分析

为分析感染高原鼠兔的皮蝇蛆分子分类地位，通过聚合酶链反应（PCR）对6株感染高原鼠兔的皮蝇蛆的线粒体CO1基因片段进行扩增、克隆和测序，并将其序列与 GenBank中的皮蝇科、胃蝇科、狂蝇科的序列进行了比对分析，构建了遗传进化树。结果显示，扩增出的CO1基因片段为688 bp，感染高原鼠兔的皮蝇蛆与皮蝇科的皮蝇蛆遗传距离更近，位于一个大的进化树分支上，其基因片段同源性为81．2％～86．6％；与胃蝇科的蝇蛆基因片段同源性为77．8％～80．4％，与羊狂蝇基因片段同源性为79．4％～79．8％。结果表明，试验中的6株感染高原鼠兔的皮蝇蛆之间的基因片段同源性98．1％～100％，为皮蝇科的皮蝇蛆。

感染高原属兔的皮蝇蛆Ⅲ期幼虫的电镜形态学比较研究

为了观察感染高原鼠兔与感染牦牛、藏羚羊的皮蝇蛆Ⅲ期幼虫之间形态学上的区别，在青海省玉树县和称多县收集感染高原鼠兔的皮蝇蛆与本研究室以往收集保存的感染牦牛、藏羚羊皮蝇蛆进行比较研究。取出蝇蛆晾干酒精，用戊二醛液固定，切下幼虫的头部和尾部用锇酸溶液固定，不同浓度的酒精脱水、临界点干燥、表面喷金后，扫描电镜观察。感染鼠兔的皮蝇蛆伪头部口裂背侧没有明显的肉质突起，腹面棘成连续的1簇，伪头突起与口裂之间有许多细密的小棘，气门板稍凸起，圆形，上面无棘；第10节腹面前缘棘大，圆形，后缘棘小，散在。与感染牦牛的牛皮蝇蛆、纹皮蝇蛆、中华皮蝇蛆及感染藏羚羊的皮蝇蛆在形态上有明显的区别。

青海省藏犬和野生狐狸棘球绦虫感染调查及虫种分子鉴定

为了解青海省藏犬和野生狐狸的棘球绦虫Echinococcus感染状况及感染种类，本研究在青海省7个地区调查了175条藏犬和28只野生狐狸，对感染藏犬和野生狐狸的21株棘球绦虫分离株，线粒体DNA（mtDNA）的COI、NDI基因种属特异性序列进行了研究。结果表明，16条藏犬感染棘球绦虫，感染率为9．14％。5只野生狐狸感染棘球绦虫，感染率17．86％。测定的棘球绦虫mtDNA的COI、NDI基因片段长度分别为285、507、510bp，通过基因序列分析，发现青海省存在3种棘球绦虫混合感染，藏犬存在Echinococcusgranulosusgenotype1（E．g1）和Echinococcusmultilocularis（E．m）感染，部分藏犬存在E．g1和E．m混合感染，野生狐狸存在E．m和Echinococcusshiquicus（E．5）感染。检测的21株棘球绦虫分离株中，E．gl11株，占52．4％，E．m6株，占28．6％，E．s4株，占19．O％。COI基因存在15个不同的基因序列，种内变异率小于2．5％，种间变异率大于8．2％。NDI基因存在17个不同的基因序列，种内变异率小于1．6％，种间变异率大于17．3％。

青海省藏犬棘球绦虫感染调查

在青海省刚察县、兴海县河卡镇、称多县牧民定居点、玉树县结古镇等地用氢溴酸槟榔碱下泻法调查蔵犬119只,棘球绦虫感染8条,平均感染率为6.15%,感染强度1～327条。

细粒棘球蚴抗原B8/2蛋白单抗的制备及夹心ELISA检测方法的建立

为建立一种早期诊断动物细粒棘球蚴病的方法,诱导表达含PET-EgAgB8/2载体的原核表达菌,以表达纯化蛋白为抗原,制备单克隆抗体,并以制备的抗体建立检测细粒棘球蚴病夹心ELISA方法。结果显示,原核表达菌在37℃诱导培养,菌体上清中大量表达,经验证为目的蛋白,用纯化蛋白免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选得到9株具有良好特异性、稳定分泌单克隆抗体的细胞株,经两两配对,选择75C86/15作为包被抗体,27E57/32为酶标二抗,当包被抗体浓度为1.42μg/mL,4℃包被过夜、用含50 g/L脱脂奶粉的PBST封闭、抗原作1∶100稀释、酶标二抗1∶1000稀释、反应底物作用15 min时效果最佳,检测方法的特异性为98.8%,敏感性为95.3%。成功制备细粒棘球蚴抗原B8/2蛋白单克隆抗体并建立了ELISA检测方法。

棘球蚴病免疫学研究进展

作者从棘球蚴感染动物机体引起宿主免疫反应的主要抗原,导致机体免疫反应和棘球蚴的免疫逃避等三方面对棘球蚴病的免疫研究进展进行了综述。

青海省部分仔猪水肿病病原的血清型鉴定

就青海省仔猪水肿病多发区分离鉴定的45株溶血性大肠杆菌进行了血清学定型,结果表明:已鉴定出血清型的菌株33株,占73.3％,12株未定出血清型,占26.7％;其中O810株(22.2％),O251株(2.2％),O101 1株(2.2％),O1383株(6.7％),O1397株(15.5％),O1415株(11.1％),O1496株(13.3％)。O抗原优势菌株分别为:O8、O139、O141、O149,占全部菌数的62.2％。

捆裹青贮牧草中乳酸菌的测定

对两种捆裹青贮牧草中乳酸菌进行测定 ,结果表明 :在 12月至次年 2月两种捆裹青贮牧草中乳酸菌数量比较接近 ,3月至 5月两种捆裹青贮牧草中乳酸菌含量都有不同程度的提高 ,其中燕麦单包组乳酸菌含量提高最多。

阿维菌素透皮溶液防治牦牛皮蝇蛆病及停药后感染回升状况调查

经过连续数年防治,用不同剂量的阿维菌素透皮溶液防治牦牛皮蝇蛆病,试验组1防治牦牛137头,感染0头,感染率为0,驱净率100%;试验组2防治牦牛180头,感染0头,感染率为0,驱净率100%;试验组3牦牛128头,给予安慰剂,自然感染24头,感染率为18.75%,平均感染强度1.71个。应用推荐剂量的1/2和1/4防治牦牛皮蝇蛆病,效果显著。结论:牛皮蝇自然感染回升快,防治工作要长期坚持。

猪生殖和呼吸系统综合征诊断技术研究进展

从病毒的分离培养、病原检查、血清学诊断,分子生物学诊断等方面对猪生殖和呼吸系统综合征病毒的诊断 技术研究进展进行了综述。

青海省果洛地区不同剂量阿维菌素透皮溶液防治牦牛皮蝇蛆病效果观察

为降低牦牛皮蝇蛆病防治药物成本,用不同剂量的阿维菌素透皮溶液进行试验,结果表明,1/2剂量组338头感染0头,感染率为0%,驱净率100%,驱虫率100%;1/4剂量组194头,感染1头,感染率为0.52%,感染强度4个驱净率99.5%,驱虫率96.5%;对照组牦牛76头,感染50头,感染率为65.8%,平均感染强度2.3个。因此,建议使用推荐剂量的1/2和1/4防治牦牛皮蝇蛆病,既降低了成本,效果也显著。

牦牛中华皮蝇蛆和藏羊的皮蝇蛆扫描电镜形态学比较观察

应用电子显微镜对寄生于牦牛体的中华皮蝇蛆和藏羊皮蝇蛆进行了形态学扫描观察,结果:感染藏羊皮蝇幼虫气门板稍平,呈平面方形,气门钮稍突出,气门孔周围有少量小的突棘,第10节腹面前后缘均未发现棘。感染牦牛的中华皮蝇幼虫,气门板稍有凹陷,气门钮突出。第10节腹面前后缘均有棘,气门孔周围有少量小的突棘。

猪生殖和呼吸系统综合症

对猪生殖和呼吸系统综合症的病原、流行病学、临床症状、病理变化、诊断方法和防制方法进行了综述 ,指出加强饲养管理 ,防止继发感染 ,病猪进行隔离饲养 ,防止病原进入饲养场 。

猪水肿病

本文对猪水肿病的流行状况、发病机理、症状及病变、诊断、防治等进行了综述,指出致病菌侵入后,产生毒素是发生该病的主要原因;加强饲养管理,避免各种应激因素,添加维生素和矿物质,进行自价菌苗接种是预防本病的主要措施。

兔病毒性出血症研究概况

本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、兔病毒性出血症病毒的分子生物学、兔病毒性出血症病毒的诊断、兔病毒性出血症病毒的疫苗等方面进行了简要综述。

鸡肾型传染性支气管炎

对鸡肾型传染性支气管炎的病原、流行病学、临床症状、病理变化、几种诊断方法和预防方法等进行了综述，指出加强饲养管理，接种疫苗，防止病原进入饲养场地是有效预防该病的主要措施。