微生物实验教学中氧化酶试验准确性和稳定性的探讨

为提高实验教学操作中氧化酶试验的准确性和稳定性,减少和避免学生在操作中出现假阳性或假阴性的情况,尝试采用优化实验方法和铜绿假单胞菌培养基的手段。通过测试多种培养基和多种氧化酶试纸(试剂),选择稳定可靠的适用于学生实验的氧化酶试验方法。以灭菌竹签或玻璃棒取菌或直接用试纸蘸取菌落,取自普通营养琼脂斜面培养基上的铜绿假单胞菌氧化酶试验结果假阴性较多;取自普通营养琼脂平板或血琼脂平板培养基上的铜绿假单胞菌氧化酶试验结果均为阳性。实验结果表明,氧化酶试验以血琼脂平板培养基培养物效果最佳,采用氧化酶试纸或盐酸二甲基对苯二胺化学释放剂试纸均可。

红树林来源真菌Xylaria sp.HNWSW-2异香豆素类次生代谢产物及其生物活性的研究

为了研究红树林来源真菌Xylariasp.HNWSW-2的次生代谢产物及其生物活性,综合利用多种色谱技术对该菌株发酵产物进行分离纯化,结合波谱学与理化常数分析进行化合物结构鉴定,分别采用液体浸泡法和Ellman比色法对化合物的全齿复活线虫致死活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性进行测试。从Xylariasp.HNWSW-2发酵产物乙酸乙酯萃取物中分离鉴定了7个异香豆素类化合物,分别为(S)-(+)-8-O-methylmellein(1),(3S,4S)-(+)-4-hydroxy-8-O-methylmellein (2),(3S,4R)-(+)-4-hydroxy-8-O-methylmellein (3),(3S,4S)-(+)-4-hydroxymellein (4),(3S,4R)-(+)-4-hydroxymellein (5),(3R,4R)-(-)-4-hydroxy-5-methylmellein (6)和(3R,4S)-(+)-4-hydroxy-5-methylmellein (7)。其中,化合物1具有较强全齿复活线虫致死活性,化合物1~3、6和7具有一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。本研究首次发现化合物(S)-(+)-8-O--methylmellein具有较强的抗线虫活性,为相关杀线虫药物的研发提供理论依据。

探讨热带医学教育特色的临床检验诊断学研究生培养模式

目的探讨基于热带医学教育特色的临床检验诊断学研究生的培养模式的研究与构建。方法基于热带病是严重威胁热带地区人口健康的重大公共卫生问题为背景,构建热带医学特色的临床检验诊断学研究生培养模式,明确热带医学特色研究生教育的培养目标和使命、创建特色课程,提升热带医学研究生科研水平,培养热带医学专业人才和创新型科技人才,以补充热带地区医疗资源短缺、热带医学人才匮乏的现状。结果培养热带医学教育特色的临床检验诊断学研究生,为热带医学发展、热带地区医疗人才资源的建设提供基础。结论热带医学高等人才要参与全球公共卫生事业、关注热带病动态、追踪热带医学发展前沿,应对热带病威胁人类健康的挑战。

葡萄糖对草鱼主养池塘水质的影响

Avnimelech（1999）首次提出了＂生物絮团＂技术（Biofloc Technology,BFT）,可通过调节养殖水体中的C/N比促使异养微生物大量繁殖,同化无机氮,降低氨氮和亚硝酸盐氮水平,为水产养殖提供了一种崭新的微生物水质调控技术途径。目前该项技术在水产养殖的应用有一些报道：研究的方向包括最适碳源的筛选、水质改良效果、提高存活率促生长作用、最佳添加量的选择、作用机制等,试验对象主要包括斑节对虾、罗氏沼虾、凡纳滨对虾、草鱼、团头鲂等。草鱼是四川省的主要养殖鱼类,在草鱼池中混养一定数量的鲢、鳙、鲫是本地应用最广的养殖模式。

IL-17A基因和IL-17F基因多态性在评估扩张型心肌病发病风险和预后的意义

目的:评估白细胞介素17A(IL-17A)和IL-17F单核苷酸多态性(SNPs)与中国重庆地区汉族人群扩张型心肌病(DCM)发生风险和预后的关系。方法:选取112例DCM患者和125例年龄和性别相匹配的健康人群对照,采用聚和酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性和DNA测序的方法对IL-17A基因rs2275913(G-197A)和IL-17F基因rs763780(7488C/T)两个功能性SNP进行基因分型,然后运用等统计学方法分析SNPs与DCM遗传易感性及预后的关系。结果:IL-17A基因SNP rs2275913(G-197A)携带_(AA)基因型的个体患DMC的风险是携带GG基因型个体的2.124倍(95%CI_(AA)=1.213-3.964,P_(AA)=0.007);在DCM患者中,rs2 275 913位点_(AA)基因型携带者在NYHA心功能分级Ⅳ级、左心室射血分数<35%及有病毒性心肌炎病史的患者中所占比例显著增高(P<0.05);未发现IL-17F基因SNP rs763780(7488C/T)与DCM的发病和预后相关。结论:本研究首次发现IL-17A基因rs2275913(G-197A)位点SNP可能与DCM的遗传易感性和预后相关。

海口市湿地公园褐云玛瑙螺广州管圆线虫感染情况调查

为了解海口市湿地公园褐云玛瑙螺感染广州管圆线虫情况,分别于2021、2022年3—7月采集海口市某湿地公园两岸的公共绿地和乱石下的螺类并鉴定螺种,鉴定为褐云玛瑙螺的螺进行压片后镜检肺囊,“肺检法”检测褐云玛瑙螺的广州管圆线虫感染情况。提取阳性螺广州管圆线虫基因组DNA进行PCR扩增核糖体大亚基rRNA基因,测序后进行BLAST比对。2021—2022年从调查点共采集到褐云玛瑙螺207只,其中23只广州管圆线虫阳性,阳性率为11.11%(23/207)。PCR扩增结果显示在约400 bp处有特异性条带,符合预期大小。BLAST比对结果显示,PCR扩增产物测序结果与NCBI基因库中广州管圆线虫基因序列(GenBank序列号:AY295821.1、FM207759.1、AM039758.1和ON747308.1)的一致性为98.49%~99.75%。结果提示该湿地公园存在广州管圆线虫阳性的褐云玛瑙螺,接触、进食生或半生的螺肉存在较高的感染风险。

IL-17A基因多态性及血浆水平与病毒性心肌炎的相关性研究

目的:探讨白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)rs2275913(G-197A)位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)及血浆水平与重庆汉族人群病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)的关系。方法:收集VMC患者200例,根据病程将患者分为急性期组112例和恢复期组88例,并选择同期200例健康体检的正常人作为对照组,采用聚和酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性(PCR-RFLP)、DNA测序等方法检测全部受试者IL-17A基因rs2275913(G-197A)位点SNP,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血清IL-17水平。结果:VMC组IL-17A基因rs2275913(G-197A)多态位点AA基因型和A等位基因频率均显著高于对照组(P<0.05),携带AA基因型及携带A等位基因(AA+AG基因型)可增加患VMC的易感性(矫正后ORAA=2.197,95%CIAA=1.208-4.279,PAA=0.003;矫正后ORAA+AG=2.051,95%CIAA+AG=1.134-3.995,PAA+AG=0.009)。VMC组血清IL-17水平明显高于对照组(P<0.05),尤以急性期为著(P<0.05)。不论是VMC组还是对照组,IL-17A基因rs2275913(G-197A)多态位点中含A等位基因(AA+AG)者血清IL-17水平均显著高于非A等位基因(GG)携带者(P<0.01)。结论:IL-17A基因rs2275913位点SNP可能与中国重庆地区汉族人群VMC有关,A等位基因是VMC的易感基因。

人体蠕形螨标本制作方法探讨

目的探索和研究安全、快速,且能长期保存人体蠕行螨标本的制作方法,以期满足人体寄生虫实验教学的需要。方法采用透明胶纸粘贴法和挤刮涂片法获取蠕形螨,使用多种方法对人体蠕形螨进行处理,对比中性树胶、无味型封片剂以及甘油明胶的封片效果,在数码显微镜KoPa WiFi EDU软件系统下观察和拍摄。结果背景杂质少油脂少不影响观察的标本可直接采用无味型封片剂或者甘油明胶对透明胶封片保存。透明胶未粘贴好导致气泡多或者油脂、汗毛多影响观察的标本可采用2%洗洁精短时间清洁后,依次放入浓度为75%~100%的乙醇溶液中脱水后,采用无味型封片剂封片保存。对于透明胶上密度较大的标本,可采用2%洗洁精长时间浸泡后,离心沉淀,取沉渣放入75%乙醇溶液中固定后,采用甘油明胶封片保存。结论可采用无味型封片剂或者甘油明胶代替中性树胶作为蠕形螨标本制作的封片剂。采用2%洗洁精可清洗标本中存在的油脂且可达到从透明胶带中游离蠕形螨的效果。