HCV核心蛋白抑制SFRP1基因启动子活性

目的探讨HCV核心蛋白对Wnt信号通路抑制分子SFRP1启动子活性的影响。方法以人肝癌细胞系Huh7基因组为模板,扩增SFRP1启动子区不同片段(-407～-27bp,-837～-27 bp,-1 202～-27 bp,-1 619～-27 bp,-2 029～-27 bp),以pGL3-Basic为载体分别构建SFRP1启动子区截短报告质粒。将构建好的质粒与pRL-TK共转染HEK293细胞,确定启动子区活性最强区域;分别用编码HCV核心蛋白的腺病毒或GFP对照腺病毒感染已转染重组报告质粒的SK-Hep1细胞,观察AdCore对SFRP1启动子活性的调控作用。结果 SFRP1启动子区域-407～-27 bp片段活性最强;与pGL3-Basic对照组相比较,相对荧光素酶活性增加了37.31±4.45倍(P<0.01),pGL3-S2～S5的活性分别增加了28.74±2.47、13.56±2.52、12.97±0.87和8.29±0.09倍(P<0.01);HCV Core蛋白能够抑制SFRP1基因启动子区活性,其对pGL3-S1的抑制作用最强,与GFP对照组相比较,抑制率为63.8%±1.0%(P<0.01)。结论 HCV核心蛋白通过抑制SFRP1启动子区活性下调SFRP1基因的表达,可能参与Wnt/β-catenin信号通路的活化,并与原发性肝癌的发生密切相关。

师范院校图书馆如何更好地为师生服务

文章结合师范院校的实际情况,对图书馆自身形象的建立与宣传、特色服务、教师的服务、与读者的交流和沟通、电子阅览室的作用及图书馆员自身素质的提高等方面进行了探讨。

图书馆嵌入式服务的实践与探索——以新疆教育学院为例

图书馆嵌入式服务是当今数字化、网络化发展阶段的必然趋势,本文结合我院图书馆开展嵌入式服务的实践,探讨了图书馆嵌入式服务对用户、馆员以及图书馆自身的作用和影响,分析了图书馆嵌入式服务发展过程中的困难,并提出了改进的建议。

馆员素养与优质服务

本文分析了图书馆要实现高质量、深层次的优质服务,馆员应该具备的基本素养,并进一步阐述了提高馆员素养的途径。

对构建新疆教育学院图书馆双语资料中心的思考

目前,从国家到地方都越来越重视新疆的双语教育。为服务新疆的双语教育,服务双语教育的专家、学者和关心双语教育的读者,新疆教育学院图书馆成立了双语资料中心。建立双语资料中心必将大大促进新疆的双语教育。

丙型肝炎病毒核心蛋白对Wnt信号抑制因子SFRPs甲基化修饰的影响

目的探讨丙型肝炎病毒核心蛋白是否通过对Wnt信号抑制因子SFRPs的甲基化修饰,从而活化Wnt信号通路。方法将编码HCV核心蛋白的腺病毒(AdCore)或GFP对照腺病毒(AdGFP)感染SMMC-7721细胞,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测SFRPs基因mRNA的表达;用5-氮杂-2'-脱氧胞苷(DAC)对AdCore或AdGFP腺病毒感染的SMMC-7721细胞进行去甲基化处理,进一步采用甲基化特异性PCR(MSP)和DNA甲基化测序,检测SFRPs基因启动子区CpG岛的甲基化程度,Western blot检测甲基化转移酶Dnmts的表达。结果在HCV核心蛋白过表达的SMMC-7721细胞系中,SFRP2和SFRP5基因mRNA的表达量与对照组相比明显降低(P<0.05);甲基化分析结果表明:SFRP5基因启动子区CpG岛呈现高甲基化修饰;甲基化转移酶Dnmt1、Dnmt3a表达量增加(P<0.05)。结论 HCV核心蛋白可以促进SFRP5基因启动子区CpG岛的甲基化修饰,参与HCV相关疾病的发生。

《双语教育与双语教学》解读

文章对王斌华教授编著的《双语教育与双语教学》一书的主要内容,即四个板块——比较研究、理论研究、国别研究和个案研究作了简要介绍,本书涵盖了双语教育的理论与实证研究。文章对本书的解读旨在希望让更多的读者了解这本书的价值,以期对当前新疆的民汉双语教学带来一定的启发。

乙型肝炎病毒X蛋白抑制SFRP5启动子的活性

目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)抑制分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)启动子活性的分子机制。方法:扩增不同长度的SFRP5启动子区片段,构建到萤光素酶报告基因载体pGL3-Basic上,并将构建好的重组质粒转染入正常肝细胞系LO2细胞,再分别感染编码HBx的腺病毒(Ad-HBx)或编码绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-GFP),荧光显微镜下观察病毒感染效率,检测萤光素酶活性以观察HBx对SFRP5启动子活性的影响。结果:(1)含不同长度的SFRP5启动子区截短突变报告质粒构建成功。(2)截短突变报告质粒的萤光素酶活性与pGL3-Basic对照组相比,分别为(6.32±0.04)倍(-478 bp～+47 bp)、(5.79±0.32)倍(-811 bp～+47 bp)、(3.59±0.34)倍(-1 235 bp～+47 bp)、(3.86±0.39)倍(-1 677 bp～+47 bp)、(3.26±0.42)倍(-2 072 bp～+47 bp)(均P<0.05)。过表达HBx可以明显抑制SFRP5启动子活性,抑制率分别为44%(-478 bp～+47 bp)(P<0.05)、46%(-811 bp～+47 bp)(P<0.05)、28%(-1 235 bp～+47 bp)、24%(-1 677 bp～+47 bp)和40%(-2 072 bp～+47 bp)。结论:HBx可以明显抑制SFRP5启动子区活性,可能导致SFRP5基因表达下调。

丙型肝炎病毒核心蛋白稳定表达肝癌细胞株的构建及生物学研究

旨在构建稳定表达HCV核心蛋白的稳定细胞系Huh7-Core并进行初步的生物学功能研究。利用PCR技术扩增HCV核心蛋白基因,通过酶切连接反应将目的基因克隆至载体pSEB-3Flag中,将重组质粒pSEB-3F-Core和辅助质粒pAmpho共转染Huh7细胞,经过Blasticidine抗性筛选,建立稳定表达HCV核心蛋白的肝癌细胞系Huh7-Core。采用RT-PCR、Western blot鉴定Huh7-Core细胞株中核心蛋白的稳定表达并采用MTS、结晶紫试验观察Huh7-Core稳定细胞株的增殖情况。结果显示,成功构建了表达HCV核心蛋白的稳定细胞株Huh7-Core。结晶紫、MTS试验证实Huh7-Core细胞较Huh7-3Flag细胞增殖速度增快,表达HCV核心蛋白的Huh7-Core稳定细胞株构建成功,Core稳定表达后可促进Huh7细胞生长速度。

尔肯江·吐拉洪关于学前“双语”教育的讲话

新疆维吾尔自治区党委常委尔肯江·吐拉洪在南疆片区少数民族学前“双语”教育工作现场会议暨少数民族“双语”幼儿园建设工程启动会议上作了题为《坚持科学发展观扎扎实实推进少数民族学前“双语”教育工作》的讲话。

乙型肝炎病毒X蛋白截短突变体的构建及其对Wnt/β-catenin信号通路转录活性的影响

目的:观察乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)截短突变体在细胞内的定位及其对Wnt/β-catenin信号通路转录活性的影响。方法:采用PCR克隆全长野生型HBx基因,在此基础上,分别构建融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和缺失HBx基因C端49~154 aa、C端85~154 aa、N端1~57 aa+C端141~154 aa、N端1~57 aa或N端1~84 aa截短突变体的表达载体;激光共聚焦显微镜下观察HBx截短突变体在HEK293细胞中的定位;采用萤光素酶报告系统检测HBx截短突变体对Wnt/β-catenin信号通路转录活性的影响。结果:(1)成功构建了HBx截短突变体与EGFP基因融合的表达载体。(2)野生型HBx及截短突变体在HEK293细胞中具有不同的定位,其中N端缺失突变体主要定位于细胞核周胞质;C端缺失突变体在胞质胞核中呈均匀分布;N端+C端缺失突变体的定位类似于野生型HBx,主要定位于胞质,呈不均一的粗大颗粒,胞核中也有少量表达。(3)与野生型HBx相比,HBx C端49~154 aa、C端85~154 aa、N端1~57 aa+C端141~154 aa、N端1~57 aa和N端1~84 aa缺失突变体在Huh7细胞中均使Wnt/β-catenin信号通路的转录活性明显下降,分别下降了78.7%、84.7%、75.7%、93.8%和95.5%。结论:HBx不同截短突变体的细胞定位及对Wnt/β-catenin信号通路转录活性不同,提示HBx的不同功能区对Wnt信号的转录激活发挥着不同的作用。

托克逊县伊拉湖中学双语教育调研报告

文章通过对托克逊县伊拉湖中学双语教育的多次调研,与教研、教学相关的人员共同探讨和分析了影响托克逊县伊拉湖中学双语教育质量的原因,并提出对策和建议,以期促进该校双语教育质量的提高。

乙型肝炎病毒X蛋白抑制肝癌细胞系中DKK2的表达

目的分析不同肝癌细胞系中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对DKK2表达水平的影响及其可能机制。方法应用编码乙型肝炎病毒X蛋白的腺病毒(Ad-HBx)感染HepG2和SMMC7721细胞,利用免疫荧光技术和PCR技术检测X基因的表达、Western blot检测DKK2的蛋白表达水平;应用甲基化转移酶抑制剂(DAC)处理细胞,利用Western blot检测DKK2、Dnmt1、Dnmt3a和Dnmt3b的表达;通过沉默甲基化转移酶,利用Western blot检测DKK2的表达。结果Ad-HBx感染HepG2和SMMC7721细胞后,HBx mRNA相对表达倍数分别上调61.12倍和50.24倍(P<0.05),DKK2的蛋白表达水平分别下调1.61倍(P<0.05)和3.33倍(P<0.05),Dnmt1和Dnmt3a蛋白表达水平显著升高;相较于Ad-HBx感染组,DAC处理后DKK2蛋白表达水平上调2.27倍(P<0.05),Dnmt3a蛋白水平显著下调,Dnmt1和Dnmt3b蛋白水平无显著变化;沉默Dnmt1和Dnmt3a后,DKK2蛋白表达水平显著上调。结论HBx通过上调Dnmt1及Dnmt3a发挥甲基化作用来抑制DKK2的表达,进而激活Wnt/β-catenin信号通路,参与HBV相关肝癌的发生。

汉滩病毒感染EA.hy926细胞上调固有免疫相关分子表达的研究

目的探讨汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)感染EA.hy926细胞诱导抗病毒固有免疫相关分子的表达,为建立HTNV感染的细胞模型提供依据。方法将HTNV感染EA.hy926细胞,利用间接免疫荧光和实时荧光定量PCR技术于不同感染时间段,检测EA.hy926细胞中模式识别受体、细胞因子及抗病毒相关分子的mRNA表达水平。结果HTNV感染EA.hy926细胞后,随着感染时间的持续,核蛋白mRNA相对表达倍数显著上调,且不同感染时间段差异具有统计学意义(P<0.05);与未处理组相比,HTNV感染EA.hy926后,Toll样受体3、RIG-I和MDA5模式识别受体mRNA相对表达倍数均显著上调(P均<0.05),IL-6、IL-10、IFN-β和CCL5细胞因子mRNA相对表达倍数均显著上调(P均<0.05),ISG15、MxA、OAS1、IFITM1和IFITM3抗病毒相关分子mRNA相对表达倍数均显著上调(P均<0.05)。结论HTNV感染EA.hy926细胞后,可上调抗病毒固有免疫相关分子的表达,该细胞可以作为体外HTNV感染的细胞模型。

HBx蛋白抑制DKK4表达的机制及对肝癌细胞系增殖和迁移的影响

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白下调DKK4的机制及对肝癌细胞系增殖和迁移能力的影响。方法将编码乙型肝炎病毒X蛋白的腺病毒(Ad-HBx)分别感染肝癌细胞系HepG2和SMMC7721细胞,同时设感染GFP腺病毒(Ad-GFP)为对照组,用去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理肝癌细胞系,并用小干扰RNA-组蛋白去乙酰化酶1(si-HDAC1)及过表达DKK4的慢病毒转染肝癌细胞系。Western blot检测DKK4、HDAC1及SIRT1的表达情况。MTT实验、结晶紫实验和Transwell实验分别检测肝癌细胞系的增殖和迁移能力。结果Ad-HBx感染肝癌细胞系后DKK4蛋白表达水平下降(P<0.05),TSA处理后DKK4蛋白表达水平回复(P<0.05)。Ad-HBx感染肝癌细胞系后,HDAC1及SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05)。小干扰RNA沉默HDAC1后能够恢复DKK4的表达(P<0.05),沉默HDAC1和(或)过表达DKK均能抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力(P<0.05)。结论乙型肝炎病毒X蛋白通过上调HDAC1、SIRT1来抑制DKK4的表达,沉默HDAC1及过表达DKK4蛋白表达能够抑制感染Ad-HBx肝癌细胞系的增殖和迁移能力。

HCV感染者直接抗病毒药物治疗对miR-181a调节CD4^(+)T淋巴细胞衰老相关指标的影响

目的研究miR-181a调节丙型肝炎病毒(HCV)感染者直接抗病毒药物(DAA)治疗过程中对CD4^(+)T淋巴细胞衰老相关指标的影响。方法纳入的26例HCV感染者为HCV组;接受索磷布韦联合达卡他韦片治疗达病毒性治愈者22例为HCV治愈组;以及20例健康对照者为健康对照组。采用qRT-PCR方法检测外周血单个核细胞中CD4^(+)T淋巴细胞上miR-181a,SIRT 1、P 53、P 21 mRNA表达水平。双荧光素酶报告基因检测miR-181a-5p对SIRT1的调控作用。采用流式细胞仪检测CD4^(+)T淋巴细胞上SIRT1、CD57、PD-1、TIM-3分子的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni法。结果miR-181a、SIRT 1、PD-1、TIM-3表达水平在三组间差异有统计学意义(F=7.59,9.69,5.31,11.33;P<0.01)。与健康对照组相比,HCV组、HCV治愈组CD4^(+)T细胞上miR-181a下降,miR-181a能特异性地抑制SIRT1表达。与健康对照组相比,HCV组CD4^(+)T细胞上SIRT1、PD-1、TIM-3表达上升,经过治疗,HCV治愈组SIRT1、PD-1、TIM-3表达水平下降,但与HCV组无统计学差异。P 53、P 21在三组间表达有差异(F=6.53,27.02;P<0.01)。与健康对照组相比,HCV治愈组和HCV组P53(P<0.05)和P 21水平下降(P<0.01),HCV组和HCV治愈组相比无统计学差异。结论miR-181a通过SIRT 1调节HCV感染者CD4^(+)T细胞衰老,经DAA治疗后,SIRT1、PD-1、TIM-3表达水平下降,提示CD4^(+)T细胞衰老部分缓解。

应对新型冠状病毒肺炎疫情的大型场馆改建方舱医院舱内布局流程隔离优化方案探讨

布局流程隔离是传染病医院内进行传染病感染控制的重要环节。本文围绕应对新型冠状病毒肺炎疫情将上海国家会展中心改建为方舱医院的布局流程以及优化方案进行探讨,为大型场馆改建的方舱医院在布局流程隔离方面更好地应对传染病疫情提供一些思路。

以未分化结缔组织病为首发临床表现的黑热病1例

黑热病也称为内脏利什曼病,主要是由杜氏利什曼原虫感染引起,经白蛉叮咬传播的慢性地方性传染病。由于黑热病临床表现多样,鉴别比较困难,需要特殊的诊断方法才能确定病原。除了典型临床表现,黑热病患者可能有自身免疫性指标异常或类似血液系统疾病症状等,很容易误诊。本文报道1例以未分化结缔组织病为首发临床表现的特殊黑热病病例,分析其临床特点和诊治过程,总结临床经验,旨在增强临床医师对黑热病的认识,提高诊治水平。

普通院校校内读者细分与图书馆针对性服务

普通院校图书馆要提升服务质量和读者满意度,则必须对校内读者进行深入细致的研究,为读者提供针对性服务。

阿勒泰部分县市双语教育调研印象

文章通过对阿勒泰地区三县一市中小学及幼儿园双语教育情况的调研,归纳总结了该地区双语教育的现状,分析了制约双语教育质量的因素。