SYBR Green I荧光定量PCR检测乳中携带sea基因金黄色葡萄球菌的研究

金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的一种常见的致病菌,而其产生的肠毒素A是乳及乳制品食物中毒事件的主要原因。本研究建立了SYBR Green I荧光定量PCR方法对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。该方法能快速、稳定地在8h内完成对乳中金黄色葡萄球菌的检测,对人工污染乳中金黄色葡萄球菌检测的最低检出限为83CFU/ml。

血气分析仪的精密度和准确度的性能验证

目的:对GEMPremier 3000血气分析仪测定项目pH、pCO2、pO2的精密度和准确度进行验证,客观评价其性能。方法:精密度验证:使用AVL公司的血气COMBITROL多项目的质控物,质控液体1、2和3,每8小时测定一次,一天测定三次,连续5天;计算不精密度所占临床允许分析总误差的百分比(S%ofTEa)。准确度验证:使用CAP2006年AQ-C血气能力验证材料,计算测定值与同组靶值的相对不准确度的平均值及不准确度所占临床允许分析总误差的百分比(bias%ofTEa)。利用Westgard的临床检验方法评价决定图并在图中标记其"操作点",判断各项目方法性能。结果:GEMPremier3000血气分析仪测定项目pH、pCO2、PO2的分析性能为优秀。结论:通过选用适当的评价材料,客观、科学地对GEMPremier3000血气分析仪测定项目pH、pCO2、PO2的分析性能。

型钢混凝土低矮剪力墙抗震性能试验研究

剪力墙构件是现代高层建筑结构中的主要抗侧向力构件。为了对比型钢桁架混凝土组合低矮剪力墙与型钢框架混凝土组合低矮剪力墙以及普通钢筋混凝土低矮剪力墙在地震作用下的抗震性能,本文进行了四榀1/4缩尺模型的低矮混凝土剪力墙在单调和低周反复荷载作用下的对比试验,其中单调加载试验包括一榀内置型钢桁架的型钢混凝土组合低矮剪力墙,反复加载试验包括一榀普通钢筋混凝土低矮剪力墙、一榀内置型钢框架的型钢混凝土低矮剪力墙和一榀内置型钢桁架的型钢混凝土低矮剪力墙,给出了各试件的刚度、承载力、变形、延性和破坏形态等试验结果,并对其进行分析。试验结果表明,在这三种墙体中,型钢桁架混凝土组合低矮剪力墙的承载力、变形能力、耗能能力较其他类型剪力墙好,并为型钢桁架混凝土组合低矮剪力墙在实际中的应用提供了试验依据。

Taqman探针实时PCR检测金黄色葡萄球菌的研究

建立了Taqman探针实时PCR方法,针对乳中携带sea基因的金黄色葡萄球菌进行检测。研究所设计的引物具有良好的特异性,而且Taqman探针实时PCR方法检测sea基因的灵敏度高,最低检出限为69 fg,并且该方法可在8 h内完成人工污染乳中金黄色葡萄球菌的检测,最低检出限为83 cfu/mL。研究所建立的方法具有特异性强、灵敏性高及操作简便等优点,适宜于牛乳中金黄色葡萄球菌污染的调查及监测。

型钢混凝土中高剪力墙正截面受弯的开裂荷载和极限荷载的计算方法

为了研究两种型钢混凝土剪力墙(内置型钢框架的混凝土剪力墙和内置型钢桁架的混凝土剪力墙)在受弯情况下的正截面受力状态,以这两种型钢混凝土中高剪力墙和普通钢筋混凝土中高剪力墙在无轴力作用下的单调和反复水平加载试验为基础,通过力学分析和参考现有规范,主要考虑型钢组件对墙体受弯性能的影响,提出了此两种型钢混凝土中高剪力墙在受弯状态下正截面开裂荷载和极限荷载的计算方法,进一步提出了简化计算方法,并将计算结果与试验结果进行比较验证,为此种构件的工程设计提供算法。

大跨度空间桁架梁整体稳定的参数分析

大跨度空间桁架梁体系在多高层钢结构以及混合结构中的应用日益普及,由于现行规范中对其整体稳定的计算规定并不明确,因此,有必要对它的整体稳定的影响因素进行分类分析。针对实际工程中的空间桁架梁进行基于有限元分析的模拟试验,对此类桁架梁的整体稳定承载力影响因素进行了研究,并得出一些结论。

美国病理学会认可项目介绍

美国病理学会(College of American Pathologists,CAP)是由CAP主席指定并符合要求的病理学家组成。其任务是通过在世界范围内提高病理学和医学实验室的水平,来保证和维护病人、公众和病理学家的利益。CAP是世界上最大的专业病理学家组成的联合会,被公认为是实验室质量保证的领导者。1947年CAP由一些致力于改进病理学和实验医学的病理学家组建。从那时候起,CAP就成为由病理学家委员会、理事会和委员运作的全球最大的非营利性实验室组织之一。CAP致力于临床实验室步骤的标准化和改进,所产生的影响超过了任何一个其他组织。现为学会会员的1.6万多名病理学家,代表了不同的实验室背景和学科专家意见。学会的实验室认可计划(Laboratory Accredition Program,LAP)授予认可的实验室达至6千多家,是国外认可实验室的主要组织。CAP组织从事各种项目,主要包括能力验证试验(Proficiency Testing,PT),质量监控(Q-Probes,Q-Tracks)和实验室认可(Laboratory Accreditiation)。四川大学华西医院是一家三级甲等的综合教学医院,实验医学科经过3年努力,于2006年、2008年和2010年等连续3年通过了CAP的认可。

乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素的PCR检测

介绍了PCR技术在检测乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素方面的研究进展,并对其今后的发展方向和前景进行了展望。

人和猪血清尿酸测定方法的比较

目的:在现有的人血清尿酸测定方法中找出适合猪尿酸测定的方法。方法:采用化学法(磷酸三钠法,碳酸钠法)以及酶法对人和猪的血清尿酸进行检测。结果:人血清尿酸测定,化学法与酶法比较,测定结果偏高,其中磷酸三钠法与酶法无显著性差异(P>0.05),碳酸钠法有显著性差异(P<0.05);猪血清尿酸测定,酶法测得的结果很低,化学法较高。结论:酶法测得的猪血清尿酸很低,化学法测定的猪尿酸较高。

某多层框架结构基础隔震设计研究

借助SAP2000有限元分析软件,以某一实际多层框架工程结构为研究对象,利用减隔震技术,对该结构进行了橡胶支座隔震设计,使之抗震安全性得到了提高,且满足建筑结构抗震设计规范的要求,研究结果可为今后类似的工程结构基础隔震设计提供参考。

25项临床生物化学指标测量不确定度的评估

目的合理评估Roche P800全自动生化分析仪所测25项临床化学指标的测量不确定度。方法针对Roche P800全自动生化分析仪所测定的25项指标,通过批内重复性、批间重复性测定结果以及室间质评(CAP能力测试)结果等计算不确定度分量;同时利用变异系数(CV)计算标准不确定度;利用批内变异(CVw)、批间变异(CVb)和方法偏移(CVbias)等计算扩展不确定度(U)。结果 25项临床生化常规检测指标在整个测定过程受各因素影响不一,其引入的测量不确定度的贡献亦相应不同。结论通过评估25项临床生物化学指标测定不确定度,以不确定度分量贡献大小来提供合理的临床生物化学检验质量改进依据。

RT-PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因

金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的重要病源菌之一,尤其是肠毒素。国内外由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒屡屡发生。目前,国内检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素仍采用传统的方法,其操作繁琐、检测时间较长,通常需要3-5 d才能完成,且灵敏度较低。本研究缩短食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测时间,针对PCR检测的灵敏性、特异性,建立了检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法,为检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素提供了技术支持。分别采用TRIZol法和热酚法提取金黄色葡萄球菌总RNA并进行比较研究,在此基础上反转录获得cDNA,用特异引物对sea基因进行扩增,并优化PCR反应条件,获得理想的sea基因阳性扩增条带。结果表明,热酚法在总RNA提取方面优于TRIZol法,改进PCR反应时间和循环次数,最终初步建立RT-PCR检测金黄色葡萄球菌A基因的方法。

食品中单核细胞增多李斯特菌的快速检测

单核细胞增多李斯特菌是一种能引起人畜共患病和食源性疾病的致病菌。本文简述了单增李斯特菌的特性和毒力因子,介绍了从分子生物学和免疫学发展起来的核酸探针杂交、PCR、ELISA、免疫传感器等快速检测方法。这些快速检测方法与传统检测方法相比不仅缩短了检测时间,提高了检测效率,还提高了检测方法的灵敏度和特异性,对于单增李斯特菌的检测具有良好的应用前景。

型钢混凝土梁柱框支剪力墙结构抗震性能试验研究

框支剪力墙结构在实际工程中经常被采用,震害表明钢筋混凝土框支剪力墙结构抗震性能较差,本文提出型钢混凝土梁柱框支剪力墙结构对此加以改进。作者进行了4个1/4缩尺模型在竖向荷载和单调及低周反复水平荷载作用下的对比试验,其中3个试件采用型钢混凝土转换梁、型钢混凝土框支柱,1个试件采用钢筋混凝土转换梁、钢筋混凝土框支柱。我们分析其承载力、刚度、变形、延性和破坏形态等。试验结果表明,型钢混凝土梁柱框支剪力墙结构承载力高、延性好、滞回曲线丰满,变形能力和耗能能力较强。

型钢混凝土中高剪力墙的抗震性能

在单调和低周反复荷载作用下进行4榀1/3～1/4缩尺模型的中高混凝土剪力墙的对比试验,包括1榀普通钢筋、1榀内置型钢框架和2榀内置型钢桁架.结果表明,带型钢内置框架剪力墙的耗能能力远优于纯钢筋混凝土剪力墙,斜向支撑使试件的抗震能力进一步提高;与纯钢筋混凝土相比,型钢支撑框架混凝土剪力墙的极限荷载提高约25%,极限位移提高约29%,耗能提高约36%;内置型钢框架和型钢桁架可不同程度地提高普通剪力墙的后期刚度,减小墙体的层间位移,改善墙体的破坏形态.

MDRD与CKD-EPI肾小球滤过率预测公式在慢性肾脏病患者中的比较

目的:比较MDRD与CKD-EPI公式对慢性肾脏病(CKD)患者肾小球滤过率(GFR)的预测性能。方法:收集成都市区136例CKD患者的有关资料,检测其血清肌酐(Scr)水平;同时行同位素Tc-DTPA肾扫描99m检查。以DTPA清除率作为本研究GFR检测的参考值(rGFR),计算Scr与rGFR的相关性,并就MDRD公式和CKD-EPI公式预测GFR(eGFR)的偏差、精密度、准确度及诊断敏感性进行比较。结果:将Scr进行标准倒数变换后,其与rGFR回归后的相关系数r=0.680。两预测公式所获eGFR分别与rGFR进行配对t检验,差异均有统计学意义(P<0.05);两预测公式所获eGFR之间差异无统计学意义。但当rGFR>60mL/(min·1.73m2)时,CKD-EPI公式偏差较小,精密度较高,30%和50%准确性高于MDRD公式;当rGFR<60mL/(min·1.73m2)时,两公式偏差和精密度差异不明显,但CKD-EPI公式30%和50%准确性低于MDRD公式。当分别以90或60mL/(min·1.73m2)作为诊断分界点时,ROC曲线下面积比较无统计学意义。结论:CKD-EPI公式适用于CKD患者GFR的预测,在rGFR>60mL/(min·1.73m2)时体现了较好的预测趋势,但是否能取代MDRD公式尚需进一步研究。

糖尿病患者糖化血清蛋白检测及临床意义

目的通过对糖尿病患者糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HbAlc)、及血糖水平的检测,探讨GSP在患者血糖水平监测中的意义。方法检测87例糖尿病患者和35例对照组空腹血糖、餐后2h血糖(2hPG)、GSP、HbAlc等指标,并分析其临床意义。结果糖尿病患者组:HbAlc(8.17±2.37)%,GSP(20.25±84.13)μmol/L,FBG(8.72±3.38)mmol/L2,hPG(15.21±5.51)mmol/L;对照组:HbAlc(5.55±0.34)%,GSP(231.91±20.98)μmol/L,FBG(4.90±0.32)mmol/L2,hPG(6.30±1.08)mmol/L。糖尿病患者组与对照组相关指标比较P<0.01,差异具有统计学意义。糖尿病患者GSP分别与HbAlc、FBG、2hPG呈正相关;HbAlc、FBG、2hPG之间也呈正相关关系。其中,GSP与HbAlc、FBG、2hPG相关系数分别为0.826、0.869和0.807;HbAlc与FBG、2hPG相关系数为0.804、0.781;FBG、2hPG之间的相关系数为0.843。结论 GSP是反映糖尿病患者短期血糖水平的良好指标。

型钢桁架混凝土剪力墙的非线性有限元分析

利用有限元分析软件ANSYS进行了型钢桁架混凝土中高剪力墙和低矮剪力墙的实体有限元分析,得到了型钢桁架混凝土剪力墙在顶部水平荷载单向加载作用下墙体的变形性能,裂缝出现、发展、分布形态,试件破坏的形态,水平荷载-位移骨架曲线,以及试件开裂荷载、极限荷载、初始刚度、屈服刚度等力学指标。结果表明,有限元模型分析结果与试验结果吻合很好,可为此类构件的受力性能分析提供一种有效手段。

优化金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取方法

为提取金黄色葡萄球菌DNA,比较了酶解法、丙酮-酶解法、玻璃珠机械法等破壁方法,确定玻璃珠破壁法为最优提取方法。该方法无需对样品进行增菌,可直接从乳品中提取金黄色葡萄球菌DNA。

表氧化二十碳三烯酸对游离脂肪酸诱导胰岛β细胞凋亡的抑制作用

目的:研究11,12-表氧化二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EETs)抑制游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)对原代小鼠胰岛β细胞凋亡的影响,探讨11,12-EETs保护胰岛β细胞是否通过抑制内质网应激相关转录因子ATF4与ATF6核转位来实现.方法:棕榈酸(palmitic acids,PA)诱导原代小鼠胰岛β细胞凋亡,与11,12-EETs共同孵育24h后,采用流式细胞术检测该细胞的线粒体膜电位的变化与细胞凋亡水平的改变,以观察11,12-EETs对原代小鼠胰岛β细胞的保护作用;用免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相关转录因子ATF4与ATF6在胞浆与胞核中的蛋白表达,以此观察二者的核转位改变.结果:100nmol/L11,12-EETs与400μmol/LPA共同孵育胰岛β细胞24h后,与FFAs对照组相比,FFAs+EET组可显著提升胰岛β细胞的存活率(62.1%±7.3%vs53.0%±6.1%),并明显降低胰岛β细胞线粒体的去极化水平(23.6%±3.4%vs35.2%±4.7%);11,12-EETs可有效抑制PA诱导的细胞凋亡(24.5%±4.2%vs40.1%±5.6%);同时,PA刺激的ATF4与ATF6的核转位受到11,12-EETs的影响,胞核ATF4与ATF6蛋白水平显著性降低,胞浆ATF4与ATF6蛋白水平明显上调.结论:11,12-EETs可以抑制FFAs诱导的凋亡,其分子机制可能是通过抑制FFAs引发的ATF4与ATF6转位导致内质网应激相关基因表达.