正常人眼晶状体中细胞凋亡调节基因Bad、Bcl-xl的表达及其意义

目的 探讨正常人眼晶状体中促进细胞凋亡基因Bad和抑制细胞凋亡基因Bcl xl是否有表达及表达情况。方法 正常人眼晶状体 8个 ,常规石蜡包埋切片 ,采用免疫组织化学方法 (SP法 )观察晶状体上皮、前囊、后囊、囊下、晶状体纤维组织中Bad、Bcl xl基因的表达。结果 Bad、Bcl xl基因在正常人眼赤道部晶状体上皮细胞及较新形成的晶状体纤维内表达 ,且相同部位两种基因的表达量没有统计学差异 (P <0 0 5 ) ,而中央区晶状体上皮细胞、晶状体囊、老化的晶状体纤维内无Bad、Bcl xl基因表达。结论 正常人眼晶状体功能的维持可能是抑制细胞凋亡基因与促进细胞凋亡基因共同作用的结果。

凋亡调节蛋白Bcl-2相关死亡因子Bad在正常人眼视神经组织中的表达

目的 探讨促凋亡蛋白 Bcl- 2相关死亡因子 Bad在正常人眼视神经组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学 SP法观察 8例正常人眼视神经组织中 Bad蛋白的表达情况。结果 Bad蛋白表达在正常人眼视神经髓鞘部位 ,在无髓鞘组织即筛板前视神经及束间隔处未见表达。结论

人β-神经生长因子和神经生长因子基因重组真核表达载体的构建

目的:入神经生长因子包括β-神经生长因子、神经生长因子这两种活性形式,拟分别构建这两种活性形式的基因重组真核表达载体,为进一步的转基因实验作好前期准备。方法:实验于2001～2004年在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。①对象:健康志愿者5人,均对本实验知情同意。流产胎儿由青岛大学医学院妇产科提供,产妇均签署知情同意书,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:根据人β-神经生长因子与神经生长因子的全长基因序列设计合成特异性引物。抽取正常人外周血1.5 mL,提取基因组DNA后克隆出人β-神经生长因子基因片段。取胎儿海马部位脑组织100 mg,采用RT-PCR技术从胎儿脑组织中克隆出人神经生长因子基因片段。分别将纯化的β-神经生长因子产物与神经生长因子产物连接于真核表达载体pcDNA_4上,构建重组真核表达载体。转入JM109大肠杆菌中,扩增后小剂量质粒提取,酶切鉴定及计算机自动测序。结果:β-神经生长因子和神经生长因子的PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果显示,在预期位置均有阳性条带。酶切鉴定结果及计算机自动测序均证实插入片段为目的基因片断。结论:实验分别从人外周血和胎脑海马组织中成功克隆获得β-神经生长因子与神经生长因子,并顺利构建这两种活性形式的重组真核表达载体pcDNA_4-β-NGF与pcDNA_4-NGF,为进一步将神经生长因子基因转入真核细胞并比较二者表达效率作好准备工作。

Bad在正常人角膜上皮细胞中表达的免疫组化研究

目的 探讨正常人角膜上皮中Bad蛋白的表达状况。方法 用免疫组化的方法(SP)观察8例Bad在正常成人角膜组织中的表达状态。结果 正常人角膜上皮表层细胞、角膜上皮基底细胞,包括角膜缘基底细胞中均有Bad表达,中央及周边部角膜上皮表层细胞Bad表达量无明显区别,角膜上皮表层和基底细胞间的绝大多数有丝分裂后仅部分细胞有Bad表达。结论Bad参与了正常角膜上皮细胞的自我更新过程,可能具有促进角膜上皮细胞凋亡的作用。如能抑制Bad基因的表达可能会在一定程度上延缓角膜上皮的脱落,加速角膜上皮损伤后的修复及维持正常角膜上皮的完整与稳定。

超声生物显微镜评价联合激光治疗急性原发性闭角型青光眼

目的观察激光周边虹膜成形术联合周边虹膜切除术在治疗初次发作的急性闭角型青光眼中的安全性和有效性。方法初次发作的急性闭角型青光眼患者67例70眼,诊断后立即行氪激光周边虹膜成形术同时或待角膜透明后行YAG激光周边虹膜切除术,观察激光治疗前后视力、眼压及超声生物显微镜监测下的房角开放度数变化。结果视力：术后24h92.85%的患眼视力提高2行以上;眼压：术前32～80mmHg（1kPa=7.5mmHg）,平均（42.5±18.5）mmHg,术后1h平均眼压（27.5±9.5）mmHg,术后4h平均眼压（20.2±6.7）mmHg;中央前房深度：术前平均（1.69±0.34）mm,术后平均（2.13±0.20）mm;房角开放情况：术前均1/2以上关闭,术后92.85%患眼（65/70）房角不同程度改善,以下方和颞侧增宽明显;平均房角开放度数：术前平均2.15°±0.17°,术后6.23°±0.26°。激光术后各时间点眼压及术后超声生物显微镜下的房角开放度数、前房深度与术前比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论氪激光周边虹膜成形术联合YAG激光周边虹膜切除术是急性闭角型青光眼早期快速降眼压的一种安全有效的方法。

体外培养表达人β-NGF基因的猫角膜内皮细胞

目的:体外培养表达人β-神经生长因子基因(β-nerve growth factor,β-NGF)的工程化猫角膜内皮细胞,为进一步猫角膜内皮细胞的移植做准备。方法:将人β-NGF重组真核表达载体pcDNA4-β-NGF,通过EffecteneTM脂质体介导转染到体外培养的猫角膜内皮细胞中,选择性培养基筛选转基因后细胞,人NGF单克隆抗体行细胞免疫组织化学染色(immunohistochemistry)。结果:选择性培养基培养2wk后筛选出独立细胞克隆,该细胞高表达人β-NGF基因。结论:转基因方法可体外培养出表达人β-NGF基因的工程化猫角膜内皮细胞。

原发性青光眼患者术后低视力及康复效果观察

目的 :了解原发性青光眼术后低视力患者远近矫正视力及应用助视器后的矫正视力 ,研究针对造成低视力的相关因素所进行康复治疗的效果。方法 :对 10 4例原发性青光眼患者 16 5只眼术后近期 (第 4周 )裸眼及矫正远近视力进行分析 ,分析导致低视力的病因 ,并观察给予相应助视器矫正后的视力康复情况。结果 :16 5眼中有 38眼为低视力 ,主要病因为青光眼性视神经萎缩、眼底病变、并发性白内障、角膜病变等。应用助视镜后 ,76 .3%的低视力眼的矫正远视力和 84.2 %的矫正近视力可提高到有用视力。结论 :助视镜的应用仍是较为可靠、有效的康复治疗方法之一 。

羊膜植片在穿透性滤过手术中抑制巩膜瓣下纤维增殖的研究

目的探讨羊膜植片在兔眼穿透性滤过手术中抗纤维增殖情况。方法将羊膜上皮面朝外折叠成双层植入穿透性滤过手术的兔眼浅层巩膜瓣下。于术后不同时间点,行眼球组织学切片及运用显微图像分析系统对滤过道内成纤维细胞进行记数、分析。结果术后2周滤过道内开始出现成纤维细胞,随时间延长成纤维细胞数目逐渐增多,但无统计学差异(P>0.05)。对照组由术后1周开始出现纤维增殖,且逐渐加重,术后2周滤过道大部分封闭,术后3周已有新生血管长入。实验组和对照组的成纤维细胞数在术后1、2、3、4周分别进行比较,有显著性差异(P<0.05)。结论羊膜植片应用于穿透性滤过手术,可明显抑制滤过道使成纤维细胞增殖,滤过道保持通畅。

翼状胬肉组织Caveolin-1,E-cadherin和P63的表达

目的:观察翼状胬肉上皮细胞中caveolin-1,E-cadherin和P63的表达。方法:应用免疫荧光组织化学染色法检测12例翼状胬肉上皮细胞caveolin-1,E-cadherin和P63的表达,并与正常结膜对比。结果:在正常结膜上皮,E-cadherin和P63低表达,caveolin-1无表达。在翼状胬肉组织,E-cadherin和P63的表达明显增强,caveolin-1在上皮基底及基底上部细胞阳性表达。caveolin-1在正常结膜上皮阳性表达的光密度值为0,而在翼状胬肉的吸光度值为9706±2018。E-cadherin和β-catenin在正常结膜与在翼状胬肉的上皮阳性表达的吸光度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论:翼状胬肉上皮细胞caveolin-1,E-cadherin和P63蛋白表达异常。

改良泪道冲洗在新生儿泪囊炎的临床应用

目的:评价加压泪道冲洗对新生儿泪囊炎的临床治疗效果。方法:在门诊治疗中对3mo以上的新生儿泪囊炎280例340眼进行泪道冲洗,随机分为2组,A组140例164眼采用常规方法冲洗,B组140例176眼进行加压泪道冲洗,对比并观察冲洗治疗效果。结果:A组冲洗1～3次通畅9眼(5.5%);冲洗4次以上通畅14眼(8.5%);需加泪道探通141眼(86.0%)。B组冲洗1～3次通畅128眼(72.7%);冲洗4次以上通畅31眼(17.6%),需加泪道探通术17眼(9.7%)。改良方法的成功率明显高于常规方法。结论:加压泪道冲洗可明显提高新生儿泪囊炎泪道冲洗成功率。

羊膜植片在穿透性滤过术巩膜滤过道中细胞学变化特点

目的 探讨羊膜移植应用于兔眼穿透性滤过手术巩膜滤过道中细胞学变化特点。方法 选取科研用白色家兔12只,双眼行穿透性滤过手术,术中将羊膜上皮面朝外折叠成双层植于浅层巩膜瓣下。于术后不同时间点观察巩膜滤过道内细胞病理学改变。结果 术后1周手术区大量炎细胞,随后炎细胞数量减少,并有少量杆状核细胞出现,术后3周炎症反应达最高峰,随后炎细胞数量再次减少,术后8周羊膜完全溶解,滤过道内仅存少量异物巨细胞,并于术后12周完全消失,滤过道保持开放。结论 羊膜移植应用于穿透性滤过手术后滤过道内主要细胞类型:中性粒细胞、单核-巨噬细胞及成纤维细胞,病理改变主要为慢性肉芽肿性炎症是一种异种移植免疫排斥反应。

Bcl-xl、Bad在眼组织细胞凋亡中的作用

凋亡既是一种自然过程,同时又受很多基因调节,如bcl-2家族中的bcl-xl和bad基因,前者具有与bcl-2相似的抑制细胞凋亡的作用,bad则促进细胞凋亡,二者在眼组织很多部位如角膜、脉络膜上皮细胞、感光细胞、视网膜神经节细胞中均有表达。说明部分眼内组织细胞的生理、病理过程中均有细胞凋亡参与调节,这就为某些眼内疾病的基因治疗提供了新的思路。

采用瞳孔成形术治疗青光眼急性发作后瞳孔散大合并白内障的临床研究

目的探讨瞳孔成形术治疗急性闭角型青光眼急性发作后瞳孔散大的疗效。方法回顾分析该院2012年6月—2014年2月期间收治的21例(22眼)原发急性闭角型青光眼急性发作后出现眼压升高致瞳孔散大固定合并白内障患者,采用瞳孔成形术联合白内障超声乳化联合人工晶体植入联合小梁切除术治疗,以其为观察组。以及9例(9眼)已行小梁切除术的原发性急性闭角型青光眼患者,行瞳孔成形术联合白内障超声乳化及人工晶体植入术治疗,以其为对照组。观察两组视力改变情况。结果观察组裸眼视力较术前平均提高(2.73±2.31)行,对照组裸眼视力较术前平均提高(4.44±2.50)行,两组患者术后瞳孔直径缩小(P<0.001),畏光减轻(P<0.001)。结论瞳孔成形术治疗急性闭角型青光眼瞳孔散大固定能够达到提高视力、改善畏光眩光、提高视觉质量。

白内障超声乳化术的角膜内皮细胞观察

目的探讨白内障超声乳化术对角膜内皮细胞(CEC)的影响.方法采用颞上方透明角膜缘切口行白内障超声乳化术,平均超声能量及作用时间分别为23.8%、1分30秒;用非接触式角膜内皮细胞分析仪分别于术前、术后3～6个月拍摄174例(184只眼)角膜内皮细胞图像并进行计算机图像处理及自动分析.结果手术前和手术后3～6个月的角膜内皮细胞密度分别为2531.8±345.3 mm2和2246.5±402.2 mm2,内皮细胞丧失率为11.6%.平均内皮细胞面积分别为331.13+125.25μm2和385.21±198.32μm2,变异系数分别为38.45%和48.63%,六角形细胞比率分别为52.6%±12.9%和43.8%±16.2%;与术前相比,术后角膜内皮细胞密度、六角形细胞比率减少,平均内皮细胞面积增大,统计学分析均有显著性差异(P＜0.05).术后6个月矫正视力0.5以上者占88.6%,1.0以上者占50.0%.结论高龄或Ⅳ、Ⅴ级核的白内障患者施行白内障超声乳化术时,术前检查应常规行角膜内皮细胞计数分析,术中采用高负压、低超声能量操作,同样可以取得满意的手术效果.

羊膜植片应用于兔眼穿透性滤过术局部变化特点(英文)

目的:探讨羊膜移植应用于兔眼穿透性滤过手术手术区细胞病理学变化特点。方法:选取科研用白色家兔20只,双眼行穿透性滤过手术,术中将羊膜上皮面朝外折叠成双层植入于浅层巩膜瓣下。于术后不同时间点观察巩膜滤过道内细胞病理学改变。结果:实验组术后1wk手术区大量炎细胞,随后炎细胞数量减少,并有少量杆状核细胞出现,术后3wk炎症反应达最高峰,随后炎细胞数量再次减少,术后8wk羊膜完全溶解,滤过道内仅存少量异物巨细胞,并于术后12wk完全消失,滤过道保持开放。在整个实验观察过程中,实验组手术区成纤维细胞数量无明显变化(P >0.05),但与对照组相比较有明显统计学差异(P <0.05)。结论:羊膜植片在术后8wk完全溶解。在实验动物中将羊膜应用于穿透性滤过手术可明显抑制成纤维细胞增殖,保持滤过道开放。

人工晶体前膜形成82例临床分析

近年来，随着人工晶体植入术的广泛开展，人工晶体前膜的形成已成为术后较常见的并发症，并引起眼科学者的普遍关注。现将我院１９９４年１月至１９９６年６月住院患者所做后房型人工晶体植入术８２例，８８只眼的前膜形成情况分析如下。１临床资料１．１一般资料：本组共...

Ahmed青光眼引流阀暴露脱出6例患者临床分析及应对措施

目的探讨Ahmed青光眼引流阀植入治疗难治性青光眼术后引流阀暴露脱出患者的临床表现及应对措施。方法回顾分析2007年4月11日—2011年9月5日间126例行Ahmed(S-3)青光眼引流阀植入术并连续随访2年以上的患者,其中6例术后出现引流阀暴露或脱出。分析其临床表现并总结应对措施。结果该次调查中青光眼引流阀植入术后发生暴露脱出的发生率为4.76%,发生时间集中在术后4个月至术后2年。临床表现主要为球结膜侵蚀及裂孔(3例)、引流盘移位(1例)、引流盘脱出(2例)。主要处理方法:球结膜修补联合异体巩膜移植术(2例)、引流阀取出联合睫状体光凝术(2例)、引流阀取出联合新引流阀植入术(1例)、原引流阀移位在植入术(1例)。结论 Ahmed青光眼引流阀植入术后暴露脱出相对少见,根据不同表现采取相应的措施仍可达到良好的降眼压效果,采取全巩膜隧道或异体巩膜覆盖可降低引流管暴露的风险。