枇杷叶科罗索酸抑制人低密度脂蛋白氧化修饰及保护血管内皮细胞氧化损伤作用

从枇杷叶中提取分离制备科罗索酸,采用体外Cu^(2+)诱导低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)氧化损伤的体外化学反应模型及2,2’-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2,2’-azobis-2-methyl-propanimidamide dihydrochloride,AAPH)诱导人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化损伤的细胞模型,考察枇杷叶科罗索酸对LDL氧化过程的抑制作用及对动脉血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。体外实验结果表明,枇杷叶科罗索酸在体外10~100μmol/L剂量范围内能有效延长LDL氧化过程中的迟滞期,降低反应动力学曲线的曲线下面积以及降低脂质过氧化物的生成,表明科罗索酸在体外能有效抑制Cu^(2+)诱导的LDL氧化。细胞实验结果表明,在2~10μmol/L剂量范围内能有效降低AAPH所致HAECs的乳酸盐脱氢酶漏出量,维护细胞结构的完整性;提高受损细胞的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性,从而提升内皮细胞抵抗氧化应激的能力;降低细胞处于sub-G1/G0状态的比例,减少AAPH所致细胞的坏死或凋亡。表明枇杷叶科罗索酸能在细胞水平有效保护HAECs免受AAPH氧化应激损伤。

雷公藤红素抑制LDL及HAEC细胞氧化损伤作用

目的考察雷公藤红素(celastrol)体外对低密度脂蛋白(LDL)氧化过程及动脉血管内皮细胞氧化损伤的抑制作用。方法采用体外Cu^(2+)诱导LDL氧化修饰的体外化学反应模型,设置阴性对照、模型对照及雷公藤各剂量组,测定Cu^(2+)诱导氧化LDL的动力学曲线,分析比较各实验组的曲线下面积(AUC)、延滞期持续时间(lag time)及脂质过氧化物产生量(TBARS值);MTT法测定细胞活性,以确定雷公藤红素对正常细胞的安全剂量;建立AAPH诱导的人主动脉内皮细胞HAEC氧化损伤的细胞模型,设置阴性对照、模型对照及雷公藤各剂量组,测定细胞的乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、超氧化物岐化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核受损伤情况,RTq PCR法分析Nrf2、HO-1 mRNA表达水平。结果体外实验结果显示,celastrol在体外较低的剂量条件下(100 nmol·L^(-1)~1μmol·L^(-1))即能有效延长LDL氧化过程中的迟滞期,降低反应动力学曲线的AUC以及脂质过氧化物的生成,表明celastrol在体外能有效抑制Cu^(2+)诱导的LDL氧化。细胞实验结果显示,在100~400 nmol·L^(-1)剂量范围内,celastrol能有效降低AAPH所致HAEC细胞的LDH漏出量,维护细胞膜和细胞核的完整性;提高受损细胞的Nrf2和HO-1mRNA表达,提高受损细胞的SOD、GPX酶活,从而提升内皮细胞的抵抗氧化应激的能力。结论 celastrol可在体外有效抑制Cu^(2+)诱导人LDL氧化损伤,在无细胞毒安全剂量下(100~400 nmol·L^(-1))可抑制AAPH所致的HAEC细胞氧化应激损伤。

HPLC法快速检测重组人神经生长因子原液中醋酸残留量

神经生长因子（nerve growth factor,NGF）是最早发现的神经营养因子,其在神经细胞的生长、发育、分化、存活和损伤神经修复中起着重要的作用。目前,临床采用鼠颌下腺提取的NGF用于各类神经损伤的修复,疗效显著。