生精胶囊通过调节一氧化氮诱导阴茎海绵体平滑肌舒张改善去势大鼠勃起功能

目的探讨生精胶囊改善雄性去势大鼠勃起功能的潜在作用机制。方法2015年4—6月将3个月龄雄性SD大鼠40只,按随机数字法随机分为假手术组、去势组、生精胶囊组和睾酮组。假手术组作为正常对照,其余组均行双侧睾丸切除术建立勃起功能障碍模型。术后假手术组、去势组给予蒸馏水每天灌胃1次,生精胶囊组给予310.2mg/(kg·d)剂量的生精胶囊混悬液每天灌胃1次,睾酮组给予十一酸睾酮26.3mg/kg肌注4周1次。连续干预8周后,剖取阴茎海绵体组织,Massons三色染色法检测平滑肌与胶原纤维的比例;免疫组织化学技术检测α-肌动蛋白(α-SMA)和碱性调宁蛋白(calponin)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果生精胶囊组大鼠阴茎海绵体平滑肌与胶原纤维的比例为1.03±0.091,显著高于去势组0.11±0.025(P=0.000)。生精胶囊组阴茎海绵体组织α-SMA和calponin表达量分别为(16.51±0.79)%、(20.84±1.36)%,明显高于去势组(7.37±0.59)%、(1.25±1.03)%(P=0.000,P=0.000)。生精胶囊组阴茎海绵体组织nNOS、iNOS、eNOS的mRNA和蛋白表达均显著高于去势组(P值均<0.05)。结论生精胶囊可能通过保护阴茎海绵体组织含量以及增加海绵体组织一氧化氮合酶活性从而改善去势ED大鼠的勃起功能。

EGCG 通过作用IGF信号通路抑制前列腺癌骨转移恶性转化的机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在对抗骨转移来源前列腺癌细胞恶性转化中的潜在作用机制。方法:2017年6～12月,通过MTS筛选出最佳的EGCG有效浓度抑制前列腺癌骨转移PC-3和VCaP细胞。加入拟定浓度的EGCG,通过划痕实验和transwell检测经EGCG处理后细胞的迁移能力;通过流式细胞术检测细胞的凋亡率;最后通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测胰岛素因子-1的表达。结果:在20、40、80μmol/L浓度的EGCG刺激下,PC-3和VCaP细胞的增殖能力均显著低于较未经EGCG处理的细胞(P均<0.05)。划痕实验和transwell实验发现,经20μmol/L浓度EGCG处理过的PC-3和VCaP细胞,其迁移能力明显较对照组细胞下降(P均<0.05)。流式细胞术检查发现,处理组细胞加入20μmol/L浓度的EGCG后,PC-3和VCaP细胞的凋亡率显著低于未经EGCG处理的细胞(P=0.002,P=0.000)。ELISA实验结果表明,经20μmol/L EGCG处理后,PC-3和VCaP细胞IGF-1的表达显著低于较未经EGCG处理的前列腺癌细胞(P=0.000,P=0.000)。结论:经过20μmol/L浓度EGCG处理的PC-3和VCaP细胞,其迁移能力和凋亡率显著下降,可能与降低IGF-1表达水平有关,提示EGCG有望成为一种有效减缓前列癌骨转移进展的药物。

医学生临床基本技能考核方式探索

体格检查是临床基本技能的重要组成部分,是临床医师必须熟练掌握的基本功,而有效的体格检查考试方法,是教师教学水平和教学成果的试金石。因此,在本科教育中探索一种有效的体格检查考试方式能够使教师更好地掌握学生在学习中的薄弱环节,利于以后教学中的查漏补缺,进一步加强医学生临床基本技能的培养,提高教学质量。

Caveolin-1基因重组腺病毒表达系统的构建与鉴定

目的:构建靶向肝脏的小凹蛋白-1 caveolin-1基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法:根据GeneBanks中caveolin-1的序列设计引物,以大鼠肝组织提取总RNA为模板,PCR扩增caveolin-1,并将caveolin-1序列克隆至pAdTrack-CMV质粒中,再与pAd-easy质粒进行同源重组构建重组腺病毒载体,利用脂质体法于293细胞中进行包装重组腺病毒,RT-PCR检测caveolin-1基因的转录,Westernblotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果:PCR及Western blotting检测结果表明成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒。结论:成功构建出caveolin-1基因重组腺病毒,为进一步研究caveolin-1基因在肝纤维化及肝硬化疾病中的作用机制打下实验基础。

二次剖宫产的麻醉体会

目的回顾性探讨二次剖宫产的麻醉管理效果。方法 120例二次剖宫产患者,对其实施麻醉前心理护理,麻醉前扩容,术中生命体征的严密监测,促子宫收缩药的及时、有效应用,低体温的防范等措施。观察其麻醉效果。结果 120例患者发生低血压30例占25.0%,术中轻微寒战10例占8.3%,呕吐5例占4.2%,所有患者麻醉顺利,效果满意。12例大出血,10例行双侧子宫动脉结扎,2例介入动脉栓塞术。结论二次剖宫产患者经过充分的麻醉准备,严密的生命体征维持,子宫收缩药的及时有效应用,术中体温的保护等麻醉管理,可以使二次剖宫产手术麻醉顺利完成,这套麻醉方法有效可行,值得临床推广应用。

浅谈学校管理中的教师群体

在学校的日常管理中如何对待教师群体,使其作为一个整体团结在管理者周围,形成一种团队合力,围绕着共同的教育目标去实施教育教学,从而锻炼出一支合格的教师队伍。

新时代应用型高校学生劳动教育研究

本文简要阐述开展劳动教育符合应用型高校创新特色发展的目标定位和学生全面成长成才的利益诉求。从教育主管部门、高校、家长和学生四个方面分析了现阶段落实劳动育人存在的问题及原因,提出教育主管部门提高重视和支持力度、高校完善体制机制建设、学生和家长改进观念等改进措施,为应用型高校有效开展劳动教育,培养高素质技能型人才提供一定借鉴。

共表达人PUMA和HGF／NK4基因的重组腺病毒的制备及在胰腺癌细胞中的表达

目的制备同步表达HGF／NK4基因和PUMA基因的重组腺病毒，感染胰腺癌细胞后检测基因的有效表达。方法将PUMA基因和HGF／NK4基因以串联方式依次克隆至腺病毒穿梭载体，构建重组穿梭载体pAdTrack-PUMA-NK4，转化大肠杆菌BJ5183并在细菌内与腺病毒载体同源重组制备重组腺病毒载体pAd-PUMA-NK4。PacⅠ酶切后转染至HEK293细胞包装得到重组腺病毒。一定滴度的腺病毒感染人胰腺癌细胞株，荧光定量RT-PCR检测细胞中NK4和PUMA基因mRNA表达水平。结果双酶切重组pad-PUMA-NK4穿梭载体鉴定证实目的基因PUMA和HGF／NK4正确克隆；重组腺病毒载体经PacⅠ酶切得到特异的酶切产物转染HEK293细胞后成功包装出重组腺病毒；病毒感染胰腺癌细胞后3-9d内PUMA和NK4基因的表达水平较高，整体持续表达可维持2w。结论成功构建了同时表达NK4和PUMA基因的重组腺病毒载体并包装出相应的重组腺病毒颗粒，该腺病毒能有效感染胰腺癌细胞并高表达NK4和PUMA基因，这为进一步确定NK4和PUMA基因的功能及指导双基因联合治疗胰腺癌提供了理论依据和必要的材料。

改良阴茎海绵体穿刺法在大鼠阴茎海绵体内压测定中的应用研究

目的 探讨改良阴茎海绵体穿刺法在大鼠阴茎海绵体内压（intracavernous pressure,ICp）测定中的应用效果.方法 2014年10-12月将20只3个月龄雄性SD大鼠按随机数字法随机分为常规阴茎海绵体穿刺组（采用阴茎脚部位穿刺）及改良阴茎海绵体穿刺组（穿刺部位为阴茎海绵体中段）,每组10只.测定ICP与平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）的比值（ICP/MAP）,评价大鼠勃起功能.电刺激参数均为电压5V,频率15 Hz,波宽5 ms,刺激时间60s.每只大鼠测定3次取平均值.结果 常规阴茎海绵体穿刺组与改良组所测得的基础ICP分别为（14.9±2.7）、（15.5±3.1） mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）;刺激后ICP分别为（87.6±7.5）、（85.0±6.2） mmHg;ICP/MAP分别为（71.3±6.6）％、（72.5±6.3）％,组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.改良法能在直视下快速准确穿刺阴茎海绵体,成功率（100％）高于常规法（80％）,但组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 改良阴茎海绵体穿刺法具有穿刺海绵体成功率高的优点,在研究勃起功能的动物实验中应用.

生精胶囊改善雄性去势大鼠勃起功能的研究

目的研究生精胶囊对雄性去势大鼠勃起功能的影响。方法成年雄性SD大鼠40只,按随机数字法随机分为假手术组、去势组、生精胶囊组和睾酮组。假手术组作为正常对照,其余组均行双侧睾丸切除术建立勃起功能障碍模型。术后假手术组、去势组给予蒸馏水灌胃,生精胶囊组给予310.2mg/kg·d^(-1)剂量的生精胶囊混悬液每天灌胃一次,睾酮组给予十一酸睾酮26.3mg/kg肌注,4周一次。每周记录各组大鼠体质量。干预8周后检测阴茎海绵体内压(intracavemosal pressure,ICP),测定血清睾酮水平以及称量前列腺和精囊腺组织。结果生精胶囊组与去势组间体质量、前列腺质量、精囊腺质量及血清睾酮水平比较,差异均无统计学意义(P均>0.05);而较假手术组显著降低,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。生精胶囊组ICP/平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)为(0.55±0.073)mmHg,显著高于去势组(0.28±0.061)mmHg,差异有统计学意义(P<0.005),但显著低于假手术组(0.69±0.055),差异有统计学意义(P<0.05)。结论生精胶囊可以显著提高雄性去势大鼠ICP,改善勃起功能。

慢病毒介导的稳定表达LBH的前列腺癌细胞株的建立

目的:构建稳定表达LBH基因的人前列腺癌细胞株PC-3M-LBH,探讨LBH基因对PC-3M细胞增殖能力的影响。方法:构建表达LBH基因的重组慢病毒载体并制备出相应的慢病毒,感染低表达LBH基因的人前列腺癌PC-3M细胞后,经嘌呤霉素筛选获得细胞克隆;实时荧光定量PCR和蛋白印迹法(Western-Blot)分别检测细胞株中LBH的mRNA、蛋白表达水平;采用CCK-8法检测表达LBH基因后细胞增殖能力的改变。结果:成功构建了重组慢病毒表达质粒p Lenti-LBH并包装出了慢病毒,感染前列腺癌细胞后经嘌呤霉素筛选得到PC-3M-LBH细胞株;PC-3M-LBH细胞株中LBH基因的mRNA和蛋白表达显著上调;相对母细胞和NC对照组,PC-3M-LBH细胞在接种后第4天即出现明显的生长抑制,到第6天其生长抑制率达到19.7%。结论:构建的细胞株能稳定表达LBH基因,该基因的表达能显著抑制前列腺癌PC-3M细胞的体外增殖。

慢病毒介导荧光素酶表达的人鼻咽癌细胞小鼠模型的建立

目的:建立荧光素酶标记的人鼻咽癌细胞裸鼠模型,活体成像系统监测肿瘤的生长并与肿瘤的体积进行对比。方法:构建表达荧光素酶基因2(luc2)的慢病毒载体,与辅助质粒共转染293T细胞以制备慢病毒,感染人鼻咽癌SUNE1细胞后经嘌呤霉素筛选获得表达luc2的细胞株。活体成像设备体外检测不同数量细胞的发光强度,最后以5×106个细胞皮下接种BALB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统动态记录接种后肿瘤的信号并与肿瘤的体积对比。结果:成功构建慢病毒表达质粒pLenti-luc2并包装出慢病毒颗粒,病毒感染后嘌呤霉素筛选6天得到鼻咽癌细胞株SUNE1-luc2。细胞株传代后有稳定的发光强度,且经活体检测的每秒光子数与细胞数成正相关(R2=0.96);活体成像观察发现裸鼠接种第2天接种部位的发光强度就达到3.2×108,而且成瘤过程中发光强度的变化与肿瘤大小一致。结论:成功构建适用于活体成像的人鼻咽癌SUNE1细胞的裸鼠成瘤模型,该模型从细胞接种开始即可有效动态监测鼻咽癌皮下瘤的生长及转移,从而为鼻咽癌的成瘤机制及药物干预研究提供一个新的手段。

g-C3N4/LSACF复合材料制备及其可见光催化性能研究

在将生物质海绵-丝瓜络纤维通过高温碳化烧制成丝瓜络基活性炭纤维(LSACF)的基础上,以尿素包裹并煅烧制得g-C3N4/LSACF复合材料。通过SEM、XRD、EDS、BET等手段对样品微观结构和组成进行表征,通过UV-Vis分析其可见光响应性。结果表明:复合材料对罗丹明B(RhB)有着良好的吸附和可见光催化降解性能,优良的吸附性能源于LSACF的网状多孔结构及负载后复合材料比表面积的有效提高;g-C3N4/LSACF在5次循环降解测试中仍维持较好的催化性能,显示了其良好的循环利用价值。该研究为g-C3N4负载材料的选择及高效循环利用提供了思路。

复合垂直流人工湿地-微滤复合系统净化雨水

为充分利用雨水资源,构建雨水收集-复合垂直流人工湿地-微滤膜(RC-IVCW-MF)复合系统进行雨水深度净化试验研究。通过研究不同水力停留时间(HRT)下IVCW单元对雨水氨氮、总氮、总磷、COD的去除效果,确定其最优HRT,并研究最优HRT时RC-IVCW-MF复合系统对雨水的净化效果。结果表明:IVCW最优HRT为12h,IVCW对氨氮、总氮、总磷、COD的去除率分别为62.16%、69.60%、46.52%和21.85%,出水水质能达到《地表水环境质量标准》(GB 3828—2002)Ⅲ类水质标准;IVCW中氨氮和COD的去除率与进水浓度具有显著的相关性;IVCW的HRT为12 h时,RC-IVCW-MF复合系统主要出水水质指标均能达到《生活饮用水卫生标准》(GB 5749—2006)。

磁共振显像检测荷人前列腺癌严重联合免疫缺陷小鼠移植瘤远处转移的研究

本研究旨在探讨应用磁共振显像（MRI）技术检测荷人前列腺癌重症联合免疫缺陷（SCID）小鼠移植瘤和远处转移的可行性。一、材料与方法1．造模方法：取5×10^7／ml的PC-3M细胞悬液0．1ml接种于15只小鼠右侧腋皮下，在3只小鼠同侧取等量磷酸盐缓冲液（PBS）进行接种，记录成瘤时间。

载脂蛋白A1模拟肽D4F抑制内皮间质转化

目的探讨载脂蛋白A1(Apo-A1)模拟肽D4F对Apo-E基因敲除(Apo-E^(-/-))小鼠主动脉中内皮间质转化(EndMT)的影响。方法18只C57BL/6小鼠随机均分为野生型小鼠组(A组)、Apo-E^(-/-)小鼠组(B组)和Apo-E^(-/-)+D4F给药组(C组)。采用实时定量PCR和Western blot法分别检测CD31、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达。结果与A组相比,B组主动脉组织中CD31、VE-cadherin mRNA和蛋白表达减少,α-SMA mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);而C组给予D4F后能有效逆转B组上述指标的变化过程(P<0.05或P<0.01)。结论Apo-A1模拟肽D4F能明显抑制Apo-E^(-/-)小鼠主动脉中EndMT的发生。