实时定量PCR检测外科发热患者静脉血中大肠杆菌DNA的方法

目的建立实时定量PCR(RQPCR)检测大肠杆菌DNA的方法,评估临床标本检测效果。方法选择大肠杆菌β右旋半乳糖苷酶基因作为检测靶基因设计引物和探针,采用HighPurePCRTemplatePreparationKit提取基因组DNA,建立20μlTaqMan探针RQPCR反应体系。对26份外科发热患者标本(血标本20份,腹腔引流液3份,胸水2份,胆汁1份)进行荧光RQPCR检测。结果引物和探针特异性好,标准曲线相关系数在0.991～0.999之间。在最低检测限(102拷贝/反应体系)以上,仪器对不同含量大肠杆菌样本检测的平均准确性为(112.19±7.48)%;批内及批间重复性平均变异系数(CV)分别为(16.33±4.80)%和(16.03±7.80)%。血标本中大肠杆菌DNA平均提取效率为(38.40±14.05)%,提取效率平均CV为(20.57±16.92)%。含有同等量大肠杆菌模拟标本存放在-20℃或-70℃6个月内,大肠杆菌DNA拷贝数差异无显著性(P=0.130)。外科发热患者血中大肠杆菌阳性率高达30%,最高含量约为1.24×106个/ml;另外在胆汁及腹腔引流液标本中检测出的大肠杆菌DNA含量明显高于相同患者血中含量。结论RQPCR是一种快速、灵敏、特异、重复性好、能定量起始模板拷贝数的检测大肠杆菌DNA方法,可用于定量检测全血及其他体液标本中大肠杆菌含量。

实时定量PCR在细菌移位研究中的潜力

实时定量PCR(RQPCR)是一种新型核酸定量技术,具有实时监测、快速、灵敏、精确、特异等特点。与原有PCR技术相比,其最主要的优势是能对待测样本起始PCR反应模板进行准确定量,扩大了PCR的应用范围。目前在细菌移位研究中,对肠黏膜屏障损伤的早期诊断一直没有很理想的方法。RQPCR能准确定量外周血中细菌DNA,有利于对肠黏膜屏障损伤的早期诊断和损伤程度评估。

实时定量PCR检测大肠埃希菌在LB培养基和血中对抗生素的药物敏感性

目的 建立以实时定量PCR快速检测大肠埃希菌在LB液体培养基和健康人全血中对抗生素药物敏感性的方法。方法 临床血培养获得大肠埃希菌株，以常规纸片法检测其对抗生素的药物敏感性。分别在LB液体培养基和健康人新鲜全血中加入该大肠埃希菌至终浓度为0．5麦氏单位，采用不加抗生素的标本作为生长对照组，加入耐受或敏感的抗生素的标本作为耐受药物组或敏感药物组，37℃震荡培养，分别提取0、1、2、3、4小时的基因组DNA，以大肠埃希菌特异β-右旋半乳糖苷酶基因的引物和TaqMan探针，对标本进行实时定量PCR检测。结果 实时定量PCR方法有较好的重复性（CT值变异系数0．26％～1．56％）和精确度（大肠埃希菌DNA提取效率在LB培养基中为43．6％，在血中为26．7％），标准曲线线性关系好（R^2≥0．998）。培养1～3小时后，耐受药物组与生长对照组的大肠埃希菌DNA拷贝数均呈对数增长，在LB液体培养基中增至约19～120倍，在新鲜全血中增至约6～11倍；敏感药物组大肠埃希菌DNA拷贝数呈减少趋势，在LB液体培养基中减至0．22～0．12倍，在新鲜全血中为1．29～0．14倍。上述药敏结果与常规纸片法一致。结论 采用实时定量PCR检测大肠埃希菌在LB液体培养基和健康人全血中对抗生素的药物敏感性，结果与常规纸片法一致，但更快速。

外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA实时定量PCR检测与体征及血细胞计数的相关性

目的 定量检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌DNA含量，研究其与体征及皿细胞计数之间的相关性，并比较不同检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异。方法 以实时定量PCR（RQ-PCR）定量检测40份健康人静脉血标本，确定临床阳性检测限。31例发热患者共72份血标本同时进行常规细菌培养及大肠埃希菌DNA定量检测，比较两种检测方法对血中大肠埃希菌的阳性检出率的差异，两个取血时间点间大肠埃希菌DNA含量的变化，并计算大肠埃希菌DNA含量与体温、心率、白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间的相关性。结果 RQ-PCR定量检测大肠埃希菌DNA阳性率为52．78％（38／72），显著高于细菌培养阳性率2．78％（2／72）（P=0．000）。同一患者两个时间点血标本检测结果显示，静脉血中大肠埃希菌DNA在2～6小时内的升降变化达10～20倍。血中大肠埃希菌DNA含量与体温和心率之间均显著相关（P=0．000），相关程度中度密切（，值分别为0．565和0．546），与白细胞计数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比之间无显著相关关系。结论 RQ-PCR检测外科发热患者静脉血中大肠埃希菌阳性率远高于血培养。血中大肠埃希菌DNA拷贝数变化速度较快。血细胞计数不能很好反映血中大肠埃希菌的含量，而体温心率的影响因素较多，因此RQ-PCR能更及时准确反映大肠埃希菌血症的严重程度，有助于对肠屏障损伤导致肠道细菌移位的动态程度或后果进行评估。

Hb、Alb及PLR与壶腹周围癌患者胰十二指肠切除术后并发症及临床预后的关系分析

目的分析血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)与壶腹周围癌(VPC)患者胰十二指肠切除术(PD)术后并发症及临床预后的关系。方法选取2019年1月—2022年1月徐州市肿瘤医院肝胆胰外科行PD治疗的VPC患者102例为研究对象。术后根据是否发生并发症分为发生组38例和未发生组64例,同时对所有患者均随访1年(失访3例),根据随访结果将患者分为预后不良亚组35例和预后良好亚组64例,比较各组患者Hb、Alb、PLR水平。采用Spearman相关性分析VPC患者Hb、Alb、PLR水平与术后并发症、预后的相关性;Logistic回归分析影响行PD治疗的VPC患者预后的危险因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析Hb、Alb、PLR水平对患者预后不良的预测价值。结果发生组患者Hb、Alb水平低于未发生组,PLR水平高于未发生组(t/P=6.454/<0.001、20.333/<0.001、30.371/<0.001);预后不良亚组患者Hb、Alb水平低于预后良好亚组,PLR水平高于预后良好亚组(t/P=11.701/<0.001、26.741/<0.001、31.135/<0.001)。Spearman相关性分析显示,Hb、Alb与行PD治疗的VPC患者术后并发症呈负相关,PLR水平与术后并发症呈正相关(r/P=-0.354/0.002、-0.472/<0.001、0.513/<0.001)。Hb、Alb与VPC患者PD治疗发生预后不良呈负相关,PLR水平与发生预后不良呈正相关(r/P=-0.326/0.003、-0.453/<0.001、0.501/<0.001)。Logistic回归分析显示,Hb低、Alb低、PLR高水平均是影响行PD治疗的VPC患者发生预后不良的危险因素[OR(95%CI)=2.100(1.046~3.154)、2.784(1.352~4.217)、3.463(1.498~5.427)]。ROC曲线显示,Hb低、Alb低、PLR高及三者联合预测患者发生预后不良的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.724、0.781、0.801、0.867,三者联合的AUC显著高于单项预测(Z/P=5.071/0.006、5.687/0.001、6.021/<0.001)。结论术前Hb、Alb、PLR水平异常与VPC患者PD术后发生并发症及预后的关系密切,且是影响预后不良的危险因素,三者联合检测对预后不良具有较高的预测价值。

低能量氦氖激光血管内照射治疗椎-基底动脉供血不足患者的TCD及BAEP变化

目的 :了解低能量氦氖激光血管内照射 (ILIB)对椎 -基底动脉供血不足 (VBI)患者的经颅超声多谱勒 (TCD)及脑干听觉诱发电位(BAEP)检查的影响。方法 :将 2 95例VBI患者分为治疗组 (常规治疗 +ILIB治疗 )及对照组 (常规治疗 ) ,治疗前、后分别进行TCD及BAEP检测。结果 :治疗组及对照组治疗后较治疗前TCD及BAEP各项参数均有显著改善 ,治疗组较对照组更着显。结论 :ILIB确有改善血液流变学性质及脑血液循环的作用 。

神经元移行异常二例报告

神经元移行异常二例报告刘枢晓，侯靖边，徐珍仙，粱燕，李云玖（成都军区昆明总医院神经内科昆明６５００３２）例１，男，２７岁。左侧肢体反复发作性抽搐３年，不伴意识障碍及二便失禁，药物治疗难以控制。自幼反应迟钝，学习成绩差。查体：反应较迟钝，左侧肢体肌力Ｖ...

椎—基底动脉供血不足患者临床、TCD、BAEP分析

全部进行了TCD及BAEP检查的286例VBI患者,症状主要有与颈部活动有关的眩晕,耳鸣、行走不稳、呕吐等,体征以眼震、共济失调、腱反射活跃等为主,病因主要有颈椎病、动脉硬化、高脂血症、血粘度增高及高血压。TCD总异常率88.46％(发作期96.15％,缓解期84.07％),BAEP总异常率80.77％(发作期93.1％,缓解期72.35％),两者发作期异常率均显著高于缓解期;两项检查比较,总异常率及发作期异常率无显著差异,缓解期TCD异常率明显高于BAEP。认为TCD与BAEP从不同角度反映VBI的循环及电生理变化,两者结合对VBI的诊断及疗效观察有肯定价值。

腹腔镜肝癌根治术对原发性肝癌的近期疗效及肝功能指标变化分析

目的探讨腹腔镜肝癌根治术对原发性肝癌患者的近期疗效及肝功能指标变化。方法选取2016年6月至2017年12月江苏省徐州市肿瘤医院收治的68例原发性肝癌患者,采用随机数字表法分为对照组与观察组各34例。对照组患者采用传统开腹肝切除术,观察组患者采取腹腔镜肝切除术,分析比较两组患者的近期临床效果及肝功能指标变化。结果两组患者的术中出血量、肝门阻断时间及并发症发生率差异无显著性(P>0.05);观察组患者的手术时间长于对照组,视觉模拟评分、住院时间均显著低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。两组患者术前肝功能指标差异无显著性(P>0.05);术后1周观察组患者总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶及白蛋白均优于对照组,差异有显著性(P<0.05);观察组术后1周凝血酶原时间指标与术前差异无显著性(P>0.05)。观察组随访1年、2年的复发率显著低于对照组,观察组随访1年、2年的生存率显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论腹腔镜肝癌根治术在不影响治疗效果的前提下可以减轻原发性肝癌患者的疼痛程度,缩短住院时间,改善肝功能水平,但手术时间较长。

腹腔镜肝切除术治疗非边缘部位肝癌的安全性与可行性分析

目的分析腹腔镜肝切除术(LH)治疗非边缘部位肝癌的可行性。方法将68例非边缘部位肝癌患者随机分为两组,各34例。对照组接受传统开腹肝切除术治疗,观察组接受LH手术治疗,比较两组治疗效果。结果两组患者手术均顺利完成。观察组术后皮质醇低于对照组(P<0.01),白蛋白水平高于对照组(P<0.01);观察组患者手术出血量少于对照组(P<0.01),术后住院与进食时间均短于对照组(P<0.01);两组并发症发生率无差异。结论 LH手术治疗非边缘部位肝癌效果显著,具有创伤小、安全性高和术后恢复快等优点。

腹腔镜肿瘤切除术与开腹肿瘤切除术治疗肝血管瘤的效果对比

目的:比较使用腹腔镜肿瘤切除术与开腹肿瘤切除术治疗肝血管瘤的效果。方法:将2016年6月至2018年6月期间徐州市肿瘤医院收治的18例肝血管瘤患者根据入院顺序的单双号分为常规组(n=9)和试验组(n=9)。为常规组患者使用开腹肿瘤切除术进行治疗。为试验组患者使用腹腔镜肿瘤切除术进行治疗。然后观察两组患者的各项临床指标。结果:试验组患者手术持续的时间、术毕至排气的时间及术后住院的时间均短于常规组患者,其术中的出血量少于常规组患者,P <0.05。结论:与使用开腹肿瘤切除术相比,在使用腹腔镜肿瘤切除术治疗肝血管瘤时手术持续的时间短,患者术中的出血量少,术后其恢复的速度快。

腹腔镜胆总管切开取石术中夹闭T管的临床分析

目的分析腹腔镜胆总管切开取石术中夹闭T管的临床有效性。方法选择2019年1—12月该院收治的68例梗阻性黄疸患者为研究对象。患者存在胆总管结石。按照患者的就诊顺序,将其分为两组,每组34例。患者均接受腹腔镜胆总管切开取石术。对照组开放T管,观察组夹闭T管。分析结果。结果和对照组相比,观察组患者手术后第1天,ALP、γ-GT、DBIL、TBIL、GPT、GOT指标明显更高[(133.26±11.28)U/L vs(148.52±12.26)U/L、(103.62±2.82)U/L vs(116.36±5.24)U/L、(56.42±13.22)μmol/L vs(63.82±8.13)μmol/L、(85.14±22.33)μmol/L vs(106.52±7.78)μmol/L、(85.14±22.26)U/L vs(108.25±22.26)U/L、(101.26±22.25)U/L vs(128.63±22.62)U/L],差异有统计学意义(t=5.341、12.484、2.780、5.272、4.281、5.030,P<0.05)。两组患者手术后第3天以及第5天ALP、γ-GT、DBIL、TBIL、GPT、GOT指标[(98.25±13.26)U/L vs(98.52±15.26)U/L、(77.63±8.52)U/L vs(75.26±6.93)U/L、(41.24±13.22)μmol/L vs(40.88±11.22)μmol/L、(84.42±13.77)μmol/L vs(82.62±9.64)μmol/L、(78.96±15.29)U/L vs(77.63±19.63)U/L、(96.36±15.28)U/L vs(95.66±23.25)U/L,(75.19±12.28)U/L vs(73.26±10.26)U/L、(73.62±4.29)U/L vs(72.51±4.48)U/L、(30.88±4.44)μmol/L vs(29.13±4.32)μmol/L、(63.29±11.44)μmol/L vs(64.26±12.82)μmol/L、(60.13±12.44)U/L vs(56.26±12.28)U/L、(64.25±15.28)U/L vs(62.36±15.28)U/L],差异无统计学意义(P>0.05)。患者顺利完成手术,未出现严重不良反应。结论针对于结石梗阻性黄疸患者来讲,在对其实施腹腔镜胆总管切开取石术中早期夹闭T型管手术不会对其肝脏功能以及黄疸消退造成显著影响。且因为在术中早期对T管实施夹闭处理,能够防止非必要性胆盐以及电解质丢失。有助于维持患者机体内环境稳定,可降低并发症发生概率。

腹腔镜肝癌切除与开腹肝癌切除的疼痛评分对比

目的探讨腹腔镜肝癌切除术和传统开腹肝癌切除术对肝癌患者的治疗效果及疼痛评分的比较。方法选取2015年8月～2018年8月收治的28例原发性肝癌患者为研究对象,根据患者选择手术方法不同分为研究组(腹腔镜肝癌切除手术)16例,对照组(开腹手术)12例,观察两组效果。结果研究组患者术中出血量、术后排气时间、引流管使用时间和住院时间均显著优于对照组,手术时间多于对照组,VAS疼痛评分和并发症发生率明显低于对照组,组间差异有统计学意义(P <0.05)。结论行腹腔镜肝癌切除术治疗原发性肝癌患者能够有效的改善手术各项指标,减少患者疼痛和并发症,效果显著。