覆盆子二氯甲烷萃取物中的化学成分

目的:研究覆盆子二氯甲烷萃取物的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等技术提取分离覆盆子化学成分,用EI-MS、ES-MS、1H NMR、13C NMR、HMQC及HMBC等光谱方法鉴定化合物结构。结果:得到10种化合物,鉴定其中9种化合物,分别为二十六烷醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(Ⅲ)、对羟基苯甲醛(Ⅳ)、齐墩果酸(Ⅴ)、stigmast-5-en-3-ol,oleate(Ⅵ)、1H-2-indenone,2,4,5,6,7,7a-hexahydro-3-(1-methylethyl)-7a-methyl(Ⅷ)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(Ⅸ)、liballinol(Ⅹ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅹ均首次从该植物中分离得到。

糖化终末产物对人结肠癌HCT116细胞氧化应激的影响

目的观察糖化终末产物(AGEs)对人结肠癌HCT116细胞氧化应激的影响。方法运用活性氧(ROS)捕获剂孵育HCT116细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜检测AGEs刺激后HCT116细胞内ROS水平;同时用N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预氧化应激状态,观察是否影响AGEs诱导的ROS增加及细胞增殖。结果 AGEs刺激后HCT116细胞中ROS的生成增加。HCT116细胞经NAC处理后,AGEs刺激所致ROS生成增加和促细胞增殖能力都被明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AGEs通过激活氧化应激反应促进人结肠癌HCT116细胞的增殖。

红花cDNA相关序列扩增多态性的扩增体系优化

目的:建立一种适合以红花cDNA为模板进行相关序列扩增多态性(SRAP)扩增的体系,筛选最佳的SRAP-PCR反应条件。方法:提取红花RNA并反转录成cDNA,以此为模板,使用正交设计表设计PCR反应中的3个重要因素Taq酶、三磷酸脱氧核苷(dNTPs)、引物的反应浓度。随后设计Mg2+的反应浓度以及模板含量,分别进行单因素试验。结果:本研究建立的红花cDNA-SRAP扩增条件为:25μL反应体系中含模板cDNA 20 ng,1×PCR缓冲液2.5 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.04 U/μL,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.2μmol/L。优化后扩增结果稳定性好,条带清晰,多态性好。结论:该体系为红花功能基因的研究奠定了基础。