线粒体基因ND3、ND4L核苷酸变异与弱精子症相关分析

目的:对弱精子症(AST)精子线粒体DNAND3、ND4L基因突变检测和分析,探索弱精子症致病的分子机制。方法:收集弱精子症患者50例,年龄匹配的对照42例,用密度梯度离心将弱精子症患者和对照组的不同活力精子进行分离,扩增线粒体ND3、ND4L基因,测序和比对,比较弱精子症组和对照组线粒体ND3、ND4L基因核苷酸变异和单体型差异。结果:在弱精子症组和对照组中共检测出22个变异位点,其中A10157G和A10313C未见报道,G10320A、A10398G、T10609C为错义突变。A10398G和C10400T核苷酸变异率在弱精子症组显著低于对照组(P<0.05),G10310A核苷酸变异率在弱精子症组显著高于对照组(P<0.05);单体型分析可见弱精子症组单体型N百分率(33/50)显著高于对照组(14/42)(P<0.05),单体型R9在弱精子症组(15/50)的比例显著高于对照组(4/42)(P<0.05);单体型F1、F2和R9的前向运动精子百分率显著低于单体型M和Mrest(P<0.05)。对弱精子症同一病例不同活力精子进行检测,有2例不同活力的精子的线粒体单体型存在差异,活力好的精子为单体型M,而活力差的精子为单体型N;在50例弱精子症中有2例活力中等和活力差的精子标本中检测出G10310A异质性突变,而在活力好的精子标本中无G10310A突变。结论:线粒体单体型与精子活力可能存在一定的相关性;线粒体DNA10398G-10400T多态性可能是精子活力的有益因素,线粒体DNAG10310A突变可能是精子活力的有害因素。

mtATPase6基因变异与弱精子症的相关分析

为了分析mtATPase6基因突变与弱精子症的相关性,按WHO标准收集了27例弱精子症精液标本和28例精子活力正常精液标本,PCR扩增mtATPase6基因,纯化测序,分析mtATPase6基因突变,比较两组突变频率的差异。结合生物信息学工具分析错义突变位点的氨基酸进化保守性及其蛋白质部分三级结构。结果显示:发现了6个未曾报道过的突变位点;弱精子症组mtATPase6基因平均突变率显著高于对照组,可能与弱精子症有一定的相关性。G8584A、A8701G和G9053A三个错义突变可能是多态性位点,其余8个错义突变中的6个具有进化保守性的位点累计突变频率显著高于对照组,这些位点突变可能与弱精子症有关。

脑出血患者急性期凝血与纤溶功能特点分析

目的:分析脑出血患者急性期凝血与纤溶功能的特点,为临床诊疗工作提供必要的参考与借鉴。方法:选取本院2009年9月-2010年1月收治的66例脑出血患者作为研究对象,并随机抽取同一时期内来本院接受体检的健康者66例,分别设为观察组与对照组,回顾性分析所有就诊人员的临床资料。针对132例,均进行相关检查,确定外周血小板的数量与体积、血浆D-二聚体含量、血浆纤维蛋白原含量,进行对比分析。结果:与对照组相比,观察组患者在发病的第1天与第3天,其外周血小板的数量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);血浆D-二聚体的含量升高,差异具有统计学意义(P<0.05),在发病第7天二者恢复正常。脑出血患者在发病的第3天与第7天,血浆纤维蛋白原的含量增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,发病后,外周血小板的体积均表现出明显的升高,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:脑出血患者在急性期会表现出凝血功能的减弱与纤溶活性的增强,因而,治疗人员需严密观察患者的外周血小板的数量与体积、血浆D-二聚体、血浆纤维蛋白原等指标,及时进行对症治疗,确保积极的预后效果。

mtND5基因12338、12358和12406位点突变与弱精子症的相关性分析

目的 :探讨mtND5基因12338、12358和12406位点突变与弱精子症的相关性。方法:按照WHO标准收集55例弱精子症患者和33例精子活力正常者的精液标本,通过PCR及测序检测mtND5基因12338、12358和12406三个位点的突变,分析比较两组基因突变频率及活力的差异。结果:弱精子症组中精子mtND5 12338突变率(为10.91%)、12358突变率(为9.09%)、12406突变率(为12.73%)和三位点总突变率(为32.73%)均高于正常对照组(分别为9.09%、3.03%、3.03%和15.15%),但差异无统计学意义(P>0.05)。进一步分析两组的精子活力发现,突变组与非突变组a级精子百分率分别为(20.63±13.63)%、(30.61±18.87)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);a+b级精子百分率分别为(29.66±17.08)%、(41.44±22.47)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:m.12338 T>C、m.12358 A>G和m.12406 G>A可能与精子活力有一定的相关性。

mtND4基因突变与弱精子症精子的相关分析

目的分析弱精子症精子mtND4基因突变与弱精于症的相关性，探索弱精子症的分子病因。方法按WHO标准收集56例弱精子症精液标本和44例精子活力正常精液标本，用3对引物PCR扩增mtND4基因，纯化测序，分析mtND4基因突变，比较2组标本mtND4基因突变及多重单核苷酸多态性（SNP）的差异。结果发现31个同义突变位点和12个错义突变位点，其中6个核苷酸变异位点未报道过，分别为A11026G、C11215T、A11488G、C11713T、C12908T、T10908C。对照组mtND4基因T10873C和T11944C变异率分别为61．4％（27／44）和11．4％（5／44），显著高于弱精子症组的39．3％（22／56）和0％（P〈0．05）；除T10873C和TI1944C变异外，错义突变分析发现，对照组10例中与T10873C或T11944C组成多重SNP8例，而弱精子症组10例标本中仅2例，2组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；上述20例错义突变标本分成多重SNP组（与T10873C或T11944C）和非多重SNP组，多重SNP组a级精子百分率和a＋b级精子百分率均显著高于非多重SNP组（P〈0．05）。结论mtND4基因错义突变可能影响精于活动力，T10873C和T11944C多态性变异对精子活动力可能是一个有益因子，两者同时存在组成多重SNP时，两者的作用可能具有相互抵消的效应。